Contents目1檢測器的概述2檢測器的種類3檢測器的特點4檢測器的應(yīng)用及發(fā)展錄儀器分析高效液相色譜法-檢測器高效液相色譜法-檢測器儀器分析HPLC分析不受溫度和樣品沸點、揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性的限制，幾乎所有的化合物包括高沸點、極性、離子型化合物和大分子物質(zhì)均可用高效液相色譜法分析測定。因此具有更廣闊的應(yīng)用潛力。

高效液相色譜法在基礎(chǔ)理論、儀器裝置和色譜柱等方面的研究日趨成熟，已經(jīng)成為化學、化工、環(huán)境、藥學、食品等多個領(lǐng)域中最具優(yōu)勢的分離分析方法之一。

HPLC因其具有分析速度快、檢測靈敏度好、能分析和分離高沸點且不能氣化的熱不穩(wěn)定生理活性物質(zhì)的特點而被廣泛使用。HPLC的高效分離效果結(jié)合適宜的檢測器，可以實現(xiàn)多種組分、物質(zhì)的分析測定。尤其在生物化學、藥學及臨床分析中作為標準檢測方法被收錄于藥典。EDCDMSDELSDED檢測器儀器分析高效液相色譜法-檢測器UVDRIDFD高效液相色譜法-檢測器儀器分析HPLC檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測的信號，常用檢測器有：紫外可見吸收檢測器吸收（UVD）、熒光檢測器（FD）、示差折光檢測器（RID）、化學發(fā)光檢測器（CD）、電化學檢測器（ED）、質(zhì)譜檢測器（MSD）和蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）等。一、紫外可見吸收檢測器吸收（

ultraviolet－visibledetector，UVD）

紫外可見吸收檢測器(UVD)是HPLC中應(yīng)用最廣泛的檢測器之一，幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其特點是靈敏度較高，線性范圍寬，噪聲低，適用于梯度洗脫，對強吸收物質(zhì)檢測限可達1ng，檢測后不破壞樣品，可用于制備，并能與任何檢測器串聯(lián)使用。紫外可見檢測器的工作原理與結(jié)構(gòu)同一般分光光度計相似，實際上就是裝有流動地的紫外可見光度計。高效液相色譜法-檢測器儀器分析高效液相色譜法-檢測器儀器分析二、熒光檢測器(fluorescencedetector，F(xiàn)D)

熒光檢測器是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器，可檢測能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過化學衍生化生成熒光衍生物，再進行熒光檢測。其最小檢測濃度可達0.1ng／ml，適用于痕量分析；一般情況下熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個數(shù)量級，但其線性范圍不如紫外檢測器寬。

近年來，采用激光作為熒光檢測器的光源而產(chǎn)生的激光誘導熒光檢測器極大地增強了熒光檢測的信噪比，因而具有很高的靈敏度，在痕量和超痕量分析中得到廣泛應(yīng)用。高效液相色譜法-檢測器儀器分析高效液相色譜法-檢測器儀器分析三、示差折光檢測器（RID）示差折光檢測器是一種濃度型通用檢測器，對所有溶質(zhì)都有響應(yīng)，某些不能用選擇性檢測器檢測的組分，如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等，可用示差檢測器檢測。示差檢測器是基于連續(xù)測定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來測定樣品含量的。光從一種介質(zhì)進入另一種介質(zhì)時，由于兩種物質(zhì)的折射率不同就會產(chǎn)生折射。只要樣品組分與流動相的折光指數(shù)不同，就可被檢測，二者相差愈大，靈敏度愈高，在一定濃度范圍內(nèi)檢測器的輸出與溶質(zhì)濃度成正比。高效液相色譜法-檢測器儀器分析高效液相色譜法-檢測器儀器分析四、

電化學檢測器(elec)chemicaldetector，ED)

電化學檢測器主要有安培、極譜、庫侖、電位、電導等檢測器，屬選擇性檢測器，可檢測具有電活性的化合物。目前它已在各種無機和有機陰陽離子、生物組織和體液的代謝物、食品添加劑、環(huán)境污染物、生化制品、農(nóng)藥及醫(yī)藥等的測定中獲得了廣泛的應(yīng)用。其中，電導檢測器在離子色譜中應(yīng)用最多。電化學檢測器的優(yōu)點是：①靈敏度高，最小檢測量～般為ng級，有目可達pg級；②選擇性好，可測定大量非電活性物質(zhì)中極痕量的電活性物質(zhì)；③線性范圍寬，一般為4～5個數(shù)量級；④設(shè)備簡單，成本較低；⑤易于自動操作。

高效液相色譜法-檢測器儀器分析高效液相色譜法-檢測器儀器分析

五、化學發(fā)光檢測器(c。iluminescencedetector，CD)

化學發(fā)光檢測器是近年來發(fā)展起來的一種快速、靈敏的新型檢測器，因其設(shè)備簡單、價廉、線性范圍寬等優(yōu)點。其原理是基于某些物質(zhì)在常溫下進行化學反應(yīng)，生成處于激發(fā)態(tài)勢反應(yīng)中間體或反應(yīng)產(chǎn)物，當它們從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時，就發(fā)射出光子。由于物質(zhì)激發(fā)態(tài)的能量是來自化學反應(yīng)，故叫作化學發(fā)光。當分離組分從色譜柱中洗脫出來后，立即與適當?shù)幕瘜W發(fā)光試劑混合，引起化學反應(yīng)，導致發(fā)光物質(zhì)產(chǎn)生輻射，其光強度與該物質(zhì)的濃度成正比。

這種檢測器不需要光源，也不需要復雜的光學系統(tǒng)，只要有恒流泵，將化學發(fā)光試劑以一定的流速泵入混合器中，使之與柱流出物迅速而又均勻地混合產(chǎn)生化學發(fā)光，通過光電倍增管將光信號變成電信號，就可進行檢測。這種檢測器的最小檢出量可達10-12g。高效液相色譜法-檢測器儀器分析高效液相色譜法-檢測器儀器分析六、蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）ELSD也是一種通用型的檢測器，可檢測揮發(fā)性低于流動相的任何樣品，而不需要樣品含有發(fā)色基團。ELSD的響應(yīng)值與樣品的質(zhì)量成正比，因而能用于測定樣品的純度或者檢測未知物。ELSD靈敏度比RID高，對溫度變化不敏感，基線穩(wěn)定，可用于梯度洗脫。現(xiàn)在ELSD已被廣泛應(yīng)用于碳水化合物、類脂、脂肪酸和氨基酸、藥物以及聚合物等的檢測。高效液相色譜法-檢測器儀器分析高效液相色譜法-檢測器儀器分析七、質(zhì)譜檢測器（MSD）

MSD是另一種通用型檢測器，在靈敏度、選擇性、通用性及化合物的分子量和結(jié)構(gòu)信息的提供等方面都有突出的優(yōu)點。但它的昂貴操作費用和復雜性限制了它的推廣應(yīng)用。高效液相色譜法-檢測器儀器分析高效液相色譜法-檢測器儀器分析光學類檢測器：UVD、FD通用型檢測器：RID、MSD、ELSD、ED、CDContents目1構(gòu)成2HPLC構(gòu)件作用錄儀器分析高壓液相色譜法高壓液相色譜法一、構(gòu)成高壓輸液系統(tǒng)進樣系統(tǒng)分離系統(tǒng)*檢測系統(tǒng)數(shù)據(jù)記錄處理系統(tǒng)儀器分析高壓液相色譜法高壓液相色譜法取樣→樣品制備→標準溶液制備→配流動相→脫氣→選柱→安柱→連接流動相瓶→開機→設(shè)置技術(shù)參數(shù)→分析樣品（定性、定量）→譜圖優(yōu)化及確認→關(guān)機→維護點檢→結(jié)束儀器分析高壓液相色譜法高壓液相色譜法原則：先開則后關(guān)

后開則先關(guān)

柱內(nèi)流向與流動相方向相同儀器分析高壓液相色譜法高壓液相色譜法基本組成高壓輸液系統(tǒng)（高壓泵）進樣系統(tǒng)（六通閥；進樣器）分離系統(tǒng)（色譜柱）檢測系統(tǒng)數(shù)據(jù)記錄處理系統(tǒng)儀器分析高壓液相色譜法高壓液相色譜法高壓輸液系統(tǒng)包括：高壓泵（恒流泵、恒壓泵）過濾器梯度洗脫裝置進樣系統(tǒng)：進樣口，六通閥，自動進樣器儀器分析高壓液相色譜法儀器分析高壓液相色譜法儀器分析高壓液相色譜法進樣系統(tǒng)色譜柱儀器分析高壓液相色譜法六通閥及原理儀器分析高壓液相色譜法六通閥及原理高壓液相色譜法分離系統(tǒng)：色譜柱、柱恒溫裝置檢測系統(tǒng)通用型：連續(xù)測定，不適合痕量分析、梯度洗脫專用型：可痕量分析、梯度洗脫儀器分析高壓液相色譜法儀器分析高壓液相色