微生物發酵豆粕對早期斷奶仔豬生長及血清指標的影響

豆豆是我國廣泛使用的主要蛋白質飼料資源。然而，根據研究，大量豆豆被用作飼料蛋白，是因為養分和抗劑原因的存在，年輕動物的腸道過敏反應，損害了腸道的形態結構，影響了養分的吸收和健康生長。斷奶仔豬由于其消化道生理功能發育不完善,內源酶分泌不足,對飼料營養源質量要求高,蛋白質營養是斷奶仔豬營養的核心,對仔豬的生長發育起著舉足輕重的的作用。近年來,研究顯示,生物發酵可以改善大豆及豆粕的營養品質,降低抗營養因子含量,尤其是抗原蛋白水平。因此,本研究采用Aspergillusoryzae發酵處理豆粕,通過對仔豬生長、腸道形態學及血清相關指標分析,以探討微生物處理豆粕的生物學價值。1材料和方法1.1試驗豬及飼糧營養水平試驗地點在浙江省海寧市三聯養豬廠,選擇60頭出生時間相近,出生體重相似,健康狀況良好的35日齡斷奶杜×長×大三元雜交仔豬作為試驗仔豬,飼喂期為23d。試驗仔豬隨機分為2組:試驗組(微生物發酵豆粕組)和對照組(豆粕組),每組3個重復,每個重復10頭。飼糧營養水平參照NRC(1998)豬的營養需要。飼糧配方如表1。1.2發酵溫度和接種發酵豆粕的制備參照Hong等方法稍作修改。干燥的豆粕在蒸餾水里浸泡60min,接著在溫度為60～70℃蒸汽罐里煮1h,室溫下冷卻1h,然后按照0.3%的Aspergillusoryzae接種,混合,在無菌塑料袋發酵48h。新鮮的發酵豆粕在50～60℃干燥3d,粉碎,混合到飼料中,對照為不發酵的普通豆粕。發酵前后營養成分變化見表2。1.3測試方法1.3.1試驗4:30日增重、食性能計劃1次飼養場地定期進行消毒,以確保飼養條件。試驗仔豬自由飲水,每天飼喂5次,從早上7:30到晚上9:30每3h飼喂1次。試驗開始、結束時,仔豬空腹24h稱個體重,統計每重復耗料量,計算仔豬平均日增重、采食量、料重比。試驗結束后,從每個處理選出6頭仔豬(每個重復2頭),進行屠宰試驗,取血清和試驗所需樣品。1.3.2腹瀉率的觀察腹瀉程度用腹瀉指數表示,腹瀉指數為糞便評分之和。1.3.3血清免疫指標測定血清尿素氮用瑞典產BeckmanCX-7DELTA型全自動生化分析儀按脲酶法測定,血清免疫指標用瑞典產BeckmanCX-7DELTA型全自動生化分析儀按免疫濁度法測定,所用試劑盒由寧波慈城生化試劑廠提供。1.3.4討論十二指腸的形態試驗光鏡樣本的制作和觀察為固定樣品經脫水-包埋-切片-染色等處理后,用LeicaDMR型光鏡進行觀察。1.4處理數據數據處理與分析采用SPSS11.5統計軟件進行單因子方差分析和Duncan氏多重比較,結果以平均值±標準差表示。2結果2.1平均日增重和腹瀉指數試驗結果表明,飼喂微生物發酵豆粕能使仔豬的平均日增重提高5.68%(P<0.05),料重比降低8.39%(P<0.05),腹瀉指數降低39.96%(P<0.01)。2.2比例:5.97%p>0.1由表4可知,血清尿素氮含量降低39.47%(P<0.01);血清IgG水平下降6.35%(P<0.05),IgA與IgM水平未產生顯著變化。2.3對腸道形狀的光度觀察圖1光鏡觀察表明,試驗組仔豬的小腸上皮細胞微絨毛較好,整齊而致密,顯得發育良好;對照組仔豬空腸上皮微絨毛有萎縮現象,微絨毛稀疏。3討論3.1新型豆漿和消化豆豆粕是目前飼料工業廣泛應用的植物蛋白源,但研究表明,普通熱處理的大豆產品仍會引起斷奶仔豬的消化過程異常,包括消化物的運動和腸道黏膜的炎癥反應,這種變化是由于一些殘留和未降解的抗營養因子所引起,最終影響動物正常生長。研究顯示,豆粕經過處理,使其中的抗營養因子去除或減少,能有效提高仔豬的生產性能。Hong等研究顯示豆粕經過發酵處理顯著降低了大分子抗原蛋白和胰蛋白酶抑制因子的水平。Kiers研究發現Rhizopussubtilis發酵豆粕飼喂仔豬能顯著提高仔豬的日增重和采食量。本研究使用Aspergillusoryzae發酵豆粕,改善了豆粕的營養價值,同時有效的去除了胰蛋白酶抑制因子(Table2)。試驗結果顯示用發酵豆粕飼喂仔豬,可顯著提高仔豬的生長性能,同時降低其腹瀉率。3.2免疫刺激作用血清生理生化指標有利于判定飼用大豆蛋白源對仔豬的適合程度。本研究發現,微生物發酵豆粕降低了仔豬血清中免疫球蛋白IgG水平,其原因可能是發酵后豆粕中的抗原蛋白被有效降解,減少了對仔豬的免疫刺激效應。同時,本試驗中豆粕經微生物發酵后能有效降低仔豬血漿尿素水平,表明進入體內的蛋白質利用效率提高,從日增重和飼料利用率的相對顯著提高也表明經微生物處理能顯著提高氮的利用率。3.3胰蛋白酶抑制因子的影響小腸絨毛是養分吸收的主要場所,絨毛上皮細胞是消化吸收的功能細胞,對酶的活動和營養物質吸收非常有利。Zarkadas等研究表明,斷奶仔豬的絨毛高度與胰蛋白酶抑制因子的水平呈負相關。本試驗表明,飼喂斷奶仔豬發酵豆粕后,小腸上皮細胞和微絨毛發育良好;而對照組微絨毛萎縮,排列不整。這表明,發酵后胰蛋白酶抑制因子的完全消除,有效的降低了豆粕對斷奶仔豬腸道的影響。此外,還有研究表明,豆粕中的抗原蛋白(主要包括11s球蛋白和β-伴球蛋白)對仔豬消化道也有很大的負面影響。4發酵豆漿飼婦人①與普通豆粕相比,微生物發酵