干擾素的研究進展及應用前景高等生物化學中期答辯作者：ZJJ學院：化學化工學院專業：藥品化學學號：干擾素的研究進展及應用前景作者：摘要：干擾素是人體受到病毒或雙股RNA刺激物的刺激產生免疫應答，由細胞合成及分泌的一族蛋白質類，含有調節機體免疫功效、抗病毒、抗腫瘤等多個作用,是機體防御系統的重要構成部分。它通過干擾病毒基因轉錄或病毒蛋白組分的翻譯，從而制止或限制病毒感染，是現在最重要的抗病毒感染和抗腫瘤生物制品。本文就干擾素的分類、分子構造、作用機理、生物學活性、體外重組技術以及臨床應用等方面的研究進展進行了綜述，并對其應用前景做出預測展望。核心詞：干擾素研究進展應用前景ResearchprogressandapplicationprospectofinterferonAuthor:(TianjinUniversityofTechnology,Tianjin300072,China)Interferon(IFN)ishumanbodygetsvirusordoublestrandedtheexcitinggenerationimmunityofRNAexciterisrespondent,bythecellsynthesisreachesexcretivegensproteinkind,hasthefunctionofregulatingtheimmunefunction,antiviralandantitumor,isanimportantpartofthebody'sdefensesystem.Itcanpreventorlimitviralinfectionbyinterferingwithviralgenetranscriptionortranslationoftheviralproteins，soitisthemainantiviralandantitumorbiologicalproducts.Theresearchofinterferonclassification,molecularstructure,mechanismofaction,biologicalactivity,vitriolrecombinationtechniquesandrelatedresearchdevelopmentofclinicalapplicationarereviewedinthepaper,andforecaststheprospecttoitsapplicationprospect.Keywords:InterferonResearchprogressApplicationProspects前言干擾素是由干擾素誘生劑誘導生物細胞后所產生的一類高活性多功效的糖蛋白，由Isaacs和Lindenmann等于1957年運用雞胚絨毛尿囊膜研究流感病毒干擾現象時發現的。干擾素自被發現以來，其廣譜的抗病毒、抗腫瘤活性及其強大的免疫調節作用而受到研究者們的重視。近年來，IFN已經成為病毒學、細胞學、分子遺傳學、免疫學、生化學、腫瘤學、以及臨床學家研究的重點對象，有逐步形成一種新興邊沿學科的趨向。該文章是對干擾素的研究進展及發展前景進行綜述。1.干擾素的產生機理與分類1.1干擾素的產生機理IFN是人和動物在細胞受到適宜刺激條件下產生的一種微量的、含有高度生物學活性的糖蛋白。IFN的產生是受細胞基因組控制的，由于細胞中IFN基因克制物（IFNsurpressor）與IFN基因結合克制復制酶系統，因此普通狀況下，IFN基因處在克制狀態。當病毒或者其它誘生劑作用于細胞膜后，使IFN基因脫解克制。IFN操縱子開始轉錄，合成mRNA,mRNA快速轉移至細胞漿，在核糖體上轉議成IFN前體，切除信號肽后，成熟的IFN分泌到細胞外[1-2]。1.2干擾素的分類在過去,干擾素是按其與受體結合的原則,分為Ⅰ型和Ⅱ型,后來發現Ⅰ型干擾素按其與抗體結合的抗原性不同又可分為二類,故把Ⅰ型干擾素又分為A、B兩大類,將原來的Ⅱ型干擾素命名為γ,此后30數年都把干擾素分為A、B、C三大類,其中即使有諸多人聲稱發現了第四、第五類干擾素等,但均未得到國際干擾素和細胞因子研究學會(ISICR)的必定,最后均被否認。直到近幾年,干擾素的研究又有了十分重大的突破性進展。新發現的IFN-K1(lambda1)、IFN-K2和IFN-K3,或IL-28A、IL-28B和IL-29都有干擾素活性,但它結合的受體與Ⅰ型干擾素受體不同[3-4]。這些新發現的干擾素,按其與受體結合的不同，將IL-28A、IL-28B、IL-29或IFN-K1(lambda1)、IFN-K2和IFN-K3命名為Ⅲ型干擾素。因此,按干擾素與其結合的受體不同分為TypeⅠ、TypeⅡ和TypeⅢ。干擾素的具體分類以下:Ⅰ型干擾素涉及IFN-A(亞型IFNA-1、2、3等；亞亞型IFNα-1a、1b、1c或IFNα-2a、2b、2c等);IFN-β;IFN-κ;IFN-ε;IFN-ω等。Ⅱ型干擾素即過去的IFN-γ。Ⅲ型干擾素涉及IFN-λ1、IFN-λ2和IFN-λ3[5]。2.干擾素的生物活性及作用機理2.1干擾素的生物學特性2.1.1高度的生物活性IFN含有廣譜抗病毒活性,一種IFN既可克制多個RNA病毒,又可克制多個DNA病毒。不同病毒對IFN的敏感性不同,有囊膜的病毒最敏感。不僅不同種類的病毒對IFN的敏感性有差別,并且同一種的不同變種對IFN的敏感性也不完全相似。除廣譜抗病毒活性外,IFN還能克制病毒以外其它微生物的生長,克制細胞分裂,克制腫瘤細胞增殖和參加調節免疫應答。2.1.2相對的種屬特異性IFN的活力含有相對的種屬特異性,即某一種屬動物(或組織細胞)產生的IFN只能對同種屬或種屬非常靠近的動物或細胞有保護力,即IFN活力在同種細胞上高,在異種細胞上低。雞IFN在雞細胞上,1/4000的滴度即可抵抗水泡性口炎病毒(VSV)的攻擊,而在鼠細胞上,滴度1/30仍不能保護。但是這種特異性是相對的,不是絕對的,如猴細胞產生的IFN除對猴有保護作用外,對人和兔的細胞也有一定的保護作用。2.1.3微弱的抗原性1975年有人報告,用鼠或雞IFN免疫兔或豚鼠,每七天1次,在第10次出現抗體,第18次后來抗體滴度稍高。也有人報告,用人和兔的IFN免疫豚鼠,每七天1次,持續六個月才獲得中和抗體。2.2抗病毒作用及作用機理IFN-α、β、γ都有抗病毒作用[6]。動物實驗成果證明,IFN-C抗病毒活性遠較Ⅰ型低,IFN-C和IFN-B能互相加強抗病毒作用。IFN抗病毒含有廣譜性,但它對細胞抗病毒作用是間接的,并且是非特異性[7]。病毒感染細胞造成IFN的產生,并隨被感染細胞死亡、崩解而釋出。IFN分子向附近擴散,隨血液循環至全身。IFN圖2.2.1干擾素抗病毒作用Fig2.2.1Antiviraleffectofinterferon是由宿主細胞編碼的蛋白質,因其是通過作用于靶細胞,激活靶細胞內的基因而發揮作用的,故其含有廣譜抗病毒作用。當IFN進入細胞后,干擾素與細胞表面的干擾素受體結合后,可誘導細胞產生含有酶活性的抗病毒蛋白(AntivirualProtein,AVP)。已經懂得的AVP最少有3種:蛋白激酶、磷酸二脂酶和2.-5.寡腺苷酸合成酶[8]。蛋白激酶和磷酸二脂酶能破壞細胞核糖體轉譯病毒蛋白質,2.-5.寡腺苷酸合成酶能降解mRNA。這些抗病毒蛋白或克制轉錄酶,制止mRNA的形成,或克制病毒DNA和RNA的合成。因此,能夠說干擾素是通過AVP間接地克制病毒的增殖而達成抗病毒作用。2.3免疫調節作用及作用機理干擾素含有很強的免疫調節作用。它能夠調節T、B淋巴細胞的免疫功效,小劑量起增進作用,大劑量起克制作用。干擾素也可增加IgG的Fc受體體現，從而有助于巨噬細胞對抗原的吞噬，K細胞、NK細胞對靶細胞的殺傷以及T、B淋巴細胞的激活，增強機體免疫應答能力。IFN或IFN誘生劑解決后,可引發IFN敏感細胞表面抗原和某些受體的體現增加。。另外，IFN還能影響抗原提呈作用，如IFN-γ能明顯增加抗原提呈細胞體現MHC-Ⅱ類抗原的數量，增強抗原提呈細胞與T細胞的互相作用，增加輔助T細胞的數量并增強遲發型超敏反映。IFN含有巨噬細胞活化因子的作用，能引發巨噬細胞的殺腫瘤效應。IFN-A/B重要是通過對淋巴細胞和巨嗜細胞的調節或誘導MHCI型分子的體現起免疫調節作用的[10]。IFN-α/β能誘導淋巴細胞釋放腫瘤壞死因子(TNF),啟動細胞毒性T細胞(CLT)和NK細胞的分化;IFN-α/β能誘導巨嗜細胞提高Fc受體的體現,增強巨嗜細胞吞噬抗原的能力;IFN-α/β能誘導病毒感染細胞和腫瘤細胞提高MHCI型分子的體現水平,增強免疫系統對其的去除作用。近年來研究發現,IFN-α/β在先天性免疫與獲得性免疫的轉變過程中起重要的作用。IFN-α/β這一重要功效以樹突狀細胞的產生和激活為紐帶[11]。IFN-γ對克制性T細胞的作用有雙向性［12］。首先,IFN-γ可激活NK等細胞,增強抗病毒、抗腫瘤的功效;另首先,它能克制B細胞分泌IgE,從而避免因IgE水平過高而發生Ⅰ型超敏反映,它還能恢復克制性T細胞的功效,減少免疫復合物的局部沉積,克制Ⅲ型超敏反映的發生。IFN-γ克制TH細胞的增殖和產生IL-4、IL-10等細胞因子，這種克制作用能變化免疫反映的類型和產生抗體的類型。IFN-γ能誘導人B細胞的增殖和分化，與IL-2協同增加輕鏈合成，IFN-γ對B細胞的促增殖作用可能由其它因素介導，由于完全純化的B細胞對IFN-γ無反映。IFN-γ能夠明顯增加病毒感染細胞和抗原遞呈細胞體現MHCII型分子產生的能力。IFN-γ可誘導單核細胞、巨嗜細胞、樹突狀細胞、皮膚成纖維細胞、血管內皮細胞等MHCII類抗原的識別過程;IFN-γ可使靜止的CD4+T細胞分化為Th1細胞,并克制Th2細胞的增殖,可增進CD8+CLT的成熟及殺傷活性;IFN-C可作用于B細胞,促使其增殖分化,產生抗體,并誘導IgG2a和IgG3的類型轉換；2.4抗腫瘤作用及作用機理實驗表明,在體內外干擾素都能夠控制腫瘤生長,克制腫瘤復發和轉移[13]。在3類干擾素中,抗腫瘤作用以IFN-γ最強。干擾素抗腫瘤重要體現在：第一，克制腫瘤的增殖，但需連圖2.4.1IFN抗腫瘤作用機理示意圖Fig2.4.1SchematicdiagramofIFNanti-tumoreffect續使用干擾素，才干顯示抑瘤效果；有些腫瘤的發生與病毒有關,這些病毒的核酸往往需要整合到細胞的DNA中去,形成病毒基因,這些基因持續存在是腫瘤的發生因素之一。由于IFN的克制作用,感染病毒的量明顯減少,這樣就可避免新細胞受病毒侵犯而轉化成腫瘤細胞。第二，克制腫瘤細胞的增生,干擾素作用于細胞膜,刺激腺苷酸環化酶,使cAMP增加,克制DNA的合成及細胞分裂,故有抗腫瘤作用；第三，調動機體免疫系統,提高機體抗瘤免疫力。研究者已將IFN-γ基因借助逆轉錄病毒載體轉移入腫瘤細胞，使腫瘤細胞自行分泌IFN-γ，發揮殺瘤效應。IFN能增強巨噬細胞及NK細胞的殺傷性,增加細胞表面抗原和受體的體現,克制B細胞的功效,從而減少腫瘤細胞表面封閉抗體的水平。第四，干擾素能變化瘤細胞表面性能,誘發新的抗原,從而易被免疫監視細胞識別并加以排斥。3.干擾素的基本特性3.1普通特性干擾素可在多個誘導劑的誘導下產生,用植物凝集素(PHA)、病毒等作為誘導劑,均可運用半數細胞病變克制法(CPEI50)測到誘導生成的干擾素活性[14]。項黎新等還用草魚出血病病毒(GCHV)體外誘導草魚白細胞產生干擾素。干擾素的分子質量普通為20ku~100ku,不能透過普通透析膜,但可通過濾菌器,干擾素比病毒顆粒小,能沉淀病毒的離心力不能沉降干擾素[15]。干擾素普通在56℃下30min不會被滅活,-20℃下可長久保存。Ⅰ型干擾素含有耐酸性,在pH2.0~10.0條件下很穩定。Ⅱ型干擾素不耐酸,也不耐熱,在pH2時不穩定,在56℃下30min會被破壞。干擾素普通由130個~170個氨基酸構成,含17種以上的氨基酸,其中的天冬氨酸、谷氨酸和亮氨酸含量較高,不含核酸,因此不被DNA酶或RNA酶破壞,但易被胰蛋白酶、乙醚、氯仿、酮基等破壞。干擾素含有廣譜性，即干擾素作用于機體有機組織細胞后，可使其獲得抗多個病毒和微生物的能力。但干擾素僅作用于異常細胞，對正常細胞的作用很小，也就是說，干擾素對一種體細胞來說又有嚴格的選擇性，并且有相對的種屬特異性，即由某一種生物細胞產生的干擾素只作用于同種生物細胞，使其獲得保護力[16]。對其它種生物細胞則無作用，因而其應用受到限制。3.2干擾素的分子構造和基因IFN-α和IFN-β基因位于人9號染色體和小鼠4號染色體上,并連鎖在一起,而人和小鼠IFN-γ基因分別定位于12號和10號染色體[17]。在DNA水平上,IFN-γ基因與IFN-α/β基因無同源性,而人和小鼠的IFN-γ有65%左右同源性。IFN-α有多個亞型,各亞型均含165~166個氨基酸殘基,構造相似。IFN-α1型分子中含有5個半胱氨酸的殘基,形成2對二硫鍵,分別為Cys1-Cys98和Cys29-Cys138。第85位上半胱氨酸的巰基游離。IFN-α2型分子在第85位不是半胱氨酸,而是酪氨酸,它所形成的二硫鍵與IFN-α1型完全相似。IFN-α活性形式為單體,盡管某些干擾素在翻譯后進行N-糖苷鍵型和O-糖苷鍵型糖基化修飾,但大多數亞型都沒有糖基化。現在已鑒定出的IFN-α非等位基因最少有15個;IFN-β由單基因編碼,含166個氨基酸殘基。IFN-β分子中含有3個半胱氨酸殘基,其中能形成二硫鍵的是Cys31-Cys141,它與IFN-α的Cys29-Cys138構造同源。第17位的半胱氨酸巰基游離。IFN-γ也是由單基因編碼的,其天然活性形式是N-糖基化的同源二聚體。IFN-C有不同于Ⅰ型干擾素的細胞表面結合受體[17]。IFN-γ不含半胱氨酸,在第25位和第97位的Asn處有兩個N糖基化位點。另外,尚有來源于白細胞的IFN-X,IFN-X含172~174個基酸殘基。不同類型IFN分子含有不同程度的氨基酸同源性(IFN-α與IFN-β分子同源性為28%,與IFN-X分子同源性高達60%)。IFN-α與IFN-β的構造基因均定位于人的第9號染色體上,并且都不含有內含子,IFN-γ基因定位于第12號染色體上,共含有3個內含子。動物IFN-γ基因4個外顯子編碼數目相近的氨基酸,第一種外顯子包含5.UTR編碼19個氨基酸的信號肽序列和22個氨基酸的成熟蛋白質;外顯子2、3、4分別編碼23、60、40個氨基酸,外顯子4包含終止子與3.UTR,外顯子2與4編碼的氨基酸序列含有高度保守性,分別為56.5%與42.5%。3個內含子精確插入兩個密碼子之間的開放閱讀框。內含子都含有保守性序列,涉及5,GT與3,AG。盡管氨基酸序列存在差別,但I型干擾素含有相似的三維構造,都由緊密排列的α螺旋構造域構成,并體現出相似的生理生化特性,如對pH值的穩定性和對同類細胞表面受體的識別相似[18]。4.干擾素的基因工程隨著基因工程技術的發展,20世紀70年代,科學家開始探索干擾素的基因工程生產辦法。國際上最先克隆的干擾素為IFN-β,由日本的Taniguchi等于1979年完畢的。研究表明,通過工程化大腸桿菌、酵母及真核細胞(如CHO等系統)體現的重組干擾素含有與天然干擾素高度相似的生物學活性,且純度更高、性能更均一。美國食品藥品管理局(FDA)1986年首先同意IFN-αIIa和IFN-αIIb干擾素投放市場,基因工程IFN-β、IFN-γ也相繼于1990、1993年獲準投放市場。我國基因工程干擾素的研制工作是由侯云德專家首先開始的,他于1982年建立了無性繁殖系統,并于1985年成功體現出干擾素。隨即我國科學家于1989年又成功研制出中國人基因克隆和體現的基因工程藥品-基因工程IFN-αlb型干擾素,并于1992年獲得國家一類新藥證書。此后,人的多個干擾素不停得到克隆與體現,并在臨床醫學上得到廣泛應用。近年來,隨著新型載體的不停開發,獸用基因工程干擾素得到進一步研究,如陳濤等[19]用巨引物PCR法介導的定點突變將其克隆的豬IFN-A第86位Cys(TGC)突變為Tyr(TAC),將其成熟蛋白N端第一種密碼子TGT同義突變為大腸桿菌偏愛的密碼子TGC,構建了大腸桿菌融合基因體現載體pGEX-IFN,體現了豬IFN-α;謝海燕等[20-21]也克隆了豬IFN-α基因,構建了原核體現載體,成功地體現了豬IFN-α;葛麗等[22]克隆了豬IFN-A,構建了真核體現載體,并成功地體現了豬IFN-α;曹瑞兵等[23]克隆并改造了豬IFN-α1基因,實現了在原核系統中的高效體現;黃志清等[24]則實現了豬IFN-γ基因在真核體現載體中的體現。這些研究為重組干擾素用作新型廣譜抗病毒生物制劑和免疫增強劑的開發奠定了基礎。圖4.1注射用重組人干擾素α2aFig4.1Recombinanthumaninterferonα2a5.干擾素的臨床應用由于干擾素含有較強的抗病毒、抗腫瘤和參加免疫調節作用,因此干擾素在人類臨床醫學中得到了廣泛應用。臨床證明,IFN類藥品中,IFN-α2a和IFN-α2b的再次給藥可提高療效,正在進行治療慢性非活動性肝炎、亞急性硬化癥腦炎、人T細胞白血病病毒骨髓癥等適應癥的研究。IFN-γ可激活Th1細胞以增進細胞免疫功效,針對免疫原性弱的癌細胞可激活細胞免疫應答。針對癌癥、艾滋病、丙型肝炎抗感染治療藥的開發[25],IFN-γ的研究有可能使其成為治療慢性風濕性關節炎、慢性肉芽腫的藥品,也有可能成為對現有抗癌藥無效的腫瘤的治療藥品。并且IFN是唯一一種被FDA同意治療慢性丙型肝炎的藥品。病毒唑聯合IFN-A治療丙型肝炎,對于40%慢性丙型肝炎患者含有不同程度的療效。新開發的一種藥品聚乙二醇干擾素,由于其獨特的藥動學特點,在機體內耐受性要優于普通干擾素[26],臨床實驗中顯示出比普通干擾素更加好的療效。因此,聚乙二醇干擾素聯合利巴韋林治療慢性丙型肝炎被證明是現在的最佳療法[27-28]。運用IFN-γ對細胞因子網絡所發揮的重要作用,即通過克制IL-24而減少IgE的產生,IFN-γ也可能成為全新的抗過敏藥[29]。由于干擾素能夠減少SARS病毒在肺部的含量,干擾SARS病毒的增殖,也可用于SARS的治療。而在人的Caco2細胞(人的結腸癌細胞)和Vero細胞中,Ⅱ型IFN-γ和Ⅰ型干擾素((IFN-α,IFN-β)對SARS-CoV含有較好的抗病毒活性[30]。用病毒唑與IFN-β聯合給藥能夠克制病毒的增殖,其中病毒唑的使用量減少至單獨使用量的1/10;IFN-β濃度減少了50倍~2000倍,免疫克制治療實驗數據顯示較高的協同抗病毒作用。結合治療的辦法不僅減少了單個劑量的用量,并且在早期的SARS治療階段中效果明顯,可有效地克制病毒復制,制止了免疫病理損傷。另外,干擾素還應用于生殖道衣原體感染、淺表膀胱癌、鋒利濕疣、皮膚病、血液系統疾病、艾滋病有關綜合征等的治療。世界上已有許多國家同意生產使用重組干擾素制劑,用于治療多個疾病。通過臨床應用治療表明,用干擾素治療,普通無嚴重副反映,少數病例可有發熱、疲勞不適、食欲不佳、白細胞減少以及血壓波動等癥狀,但停藥后會很快消失。6.干擾素的研究進展及市場前景為了將干擾素用于臨床實際,通過了幾十年不間斷的努力,先后經歷了干擾素誘導物研究、干擾素作用介質的研究和干擾素血液制品的研究三個階段,仍舊沒有解決干擾素的臨床需要問題。直到20世紀70年代開始探索用基因工程的辦法生產干擾素,改造干擾素及其體現系統,獲得了很大進步。1980年Derynck等克隆了人干擾素基因,1981年Goeddel報道干擾素-γ基因克隆成功,1982年Deuager等根據人干擾素氨基酸序列,首先人工合成了干擾素基因,并克隆成功。我國于1982年從新城疫病毒(NDV)誘生的臍帶血白細胞中提取干擾素mRNA,經反轉錄合成cDNA,也建立了人干擾素基因無性繁殖系,并產生了重組干擾素[31]。十數年的臨床應用研究成果表明,干擾素活性的發揮受微細基因組的調控,與機體內許多RNA及蛋白質的合成有關。1986年,美國食品藥品管理局(FDA)首先同意α2a和α2b干擾素投放市場,基因工程β、γ干擾素也相繼于1990年、1993年獲準投放市場。已有57個國家同意干擾素上市,治療約30多個疾病。國內研制開發的人αⅠa、αⅡb基因工程干擾素已經投放市場,其中人工αⅠb型基因工程干擾素屬我國首創。基因工程載體技術的研究和應用也增進了干擾素的研究與開發。人干擾素-β基因在煙草中體現成功、新型載體不停構建成功、新的亞型干擾素基因陸續被克隆、測序和體現。例如,構建了新型雙順反子體現載體PEC34和人干擾素-γ植物雙元體現載體;克隆和測序了豬干擾素-β基因和肉雞干擾素-α基因,并將后者在大腸埃希菌中進行了體現；克隆和鑒定了雞干擾素-γ基因,為進一步研究該基因的功效及其在控制家禽傳染病方面的應用奠定了一定基礎。隨著人們對干擾素研究的不停進一步,特別是當代分子生物學飛速發展,人們對干擾素的分子構造、理化特性、生物學特性、產生和作用機理的不停闡明,使得人們在干擾素領域獲得了空前的進步。在將來的臨床研究中,干擾素獨特、多樣的生物學效應是開發這種細胞因子治療優勢的基本點,將干擾素與癌癥疫苗或病毒疫苗結合使用,通過選擇適宜的劑量和給藥辦法,可能是在機體內產生最佳的和持久的抗癌應答及抗病毒應答的重要途徑。干擾素適應癥廣泛，已獲同意的適應癥臨床應用療效確切，現在尚無哪種新藥能夠取代干擾素。根據新藥開發研制周期的特點，最少將來3~5年內國內干擾素的市場不會受到大的沖擊，甚至會不停增加。全國干擾素市場銷售額靠近10億元人民幣。1997年以前國內重組干擾素市場重要由進口產品獨霸天下，97年后來國產重組干擾素先后問世，當時干擾素年銷量但是億元，短短5年時間，銷量翻了幾翻，并且價格也不停下調到比較符合中國老百姓現在的承受水平，在市場競爭中占有明顯的價格優勢，使進口產品市場不停減少，國產干擾素成為市場的主導。盡管我國面臨加入WTO后給干擾素帶來的挑戰與沖擊，但干擾素以其質量高，療效穩定，價格低，兩種注射劑型的優勢，一定能打出獨特的國內干擾素品牌效應，贏得市場，贏得民心。

現在國內生產總值以每年7%的速度發展，而醫藥工業每年以10-15%的速度增加。生物制藥業年產值最多僅相稱于醫藥工業產值的2%，但增加速度很快。隨著人口的增加和生活水平的提高，對醫藥的需求不停增加，衛生部1997年的統計數字表明，每年平均每一住院患者住院醫療費增加31%，其中藥費占50%。將來3-5年應重視農村市場的開發，這是不容無視的戰略重點，農村人口多，地區廣，市場容量大，投入產出比值大，渴望能成為新的增加點。參考文獻：[1]銀曉,關平原.干擾素的研究進展[J].畜牧與飼料科學,(2):66-68.[2]曲建惠,張玲霞.干擾素的分子生物學機制研究進展[J].國際流行病學傳染病學雜志,,33(1):38-44.[3]KotenkoSV,GallagherG,BaurinVV,etal.IFN-Ksmediateantiviralprotectionthroughadistinctclassòcytokinereceptorcomplex[J].NatureInmunol,,4:69-77c.[4]SheppardP,KindsvogelW,XuW,etal.IL-28,IL-29andtheirclassIIcytokinereceptorIL-28R[J].NatureImmunol,,4:63-68.[5]劉新垣.干擾素研究及其重大突破性研究進展[J].中國處方藥,,7:33-35.[6]張君,于三科.干擾素-C介導的抗弓形蟲作用及其作用機理[J].動物醫學進展,,21(1):25-27.[7]劉淑芳.干擾素抗病毒的臨床研究進展[J].濱州職業學院學報,,3(1):67-70.[8]高建忠,祝衛東,黃玉幫.干擾素的研究進展[J].動物科學與動物醫學,,21(2):58-60.[9]孫圣蘭,江青艷,傅偉龍.干擾素的研究進展[J].動物醫學進展,,06:39-41.[10]ChinsangaramJ,PicconeME,GrubmanMJ.AbilityofFoot-and-MouthDiseaseVirustoFormPlaquesinCellCultureisAssociatedwithSuppressionofAlpha/BetaInterferon[J].JViro,l1999,73(11):9891-9898.[11]LeBonA,ToughDF.LinksbetweenInnateandAdaptiveImmunityviaTypeIInterferon[J].CurrOpinImmuno,l,14(4):432-436.[12]張彩,田志剛.γ干擾素的負向免疫調節作用[J].當代免疫學,,02:89-92.[13]潘燁,鄭起.干擾素在腫瘤治療中應用的研究進展[J].國外醫學:外科學分冊,,32(1):10-13.[14]汪明,宋江楠,白泉.干擾素誘導跨膜蛋白1協同干擾素克制癌細胞增值[J].農業生物技術學報,,40(8):377.[15]王軍志.國外重組細胞因子藥品研究新動向[J].中國腫瘤生物治療雜志,1997,4(2):146[16]陳炬,衛引茂,蘇曉東.1990.干擾素抗腫瘤克制的應用.中國科學(B輯),19(3):253[17]孫志宏,陳正禮,范光麗.干擾素研究進展[J].延安大學學報,,19(3):76-79.[18]亓立峰,許梓榮.干擾素的分子生物學研究進展[J].中國獸藥雜志,,37(6):22-25.[19]陳濤.豬A型干擾素基因的克隆及其在大腸桿菌中的體現[D].南京:南京師范大學,[20]謝海燕,郭霄峰.豬A-干擾素的原核體現[J].華南農業大學學報,,25(4):86-88.[21]吳丹.豬α干擾素基因的克隆、體現及其抗豬瘟病毒活性的研究[D].北京:中國農業大學動物醫學院,.[22]葛麗,李震,于瑞嵩,等.豬α型干擾素基因在畢赤酵母中的分泌體現[J].中國獸醫學報,,25(3):89-292.[23]曹瑞兵,徐學清,周斌,等.豬A1干擾素的基因改造與高效原核體現[J].生物工程學報,,20(2):291-294.[24]黃志清,胡宏宇,陳小玲,等.豬干擾素-C基因在畢赤酵母中的分泌體現[J].生物工程學報,,21(5):731-736.[25]TabetaK,GeorgelP,JanssenE,etal.Tol-llikereceptors9and3asessentialcomponentsofi