北京市東城區(qū)2021年高二《生物》下學(xué)期期末試題與參考答案一、選擇題1.下列關(guān)于細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)和核酸的敘述，不正確的是（）A.核酸和蛋白質(zhì)的組成元素中均有C、H、O、NB.核酸和蛋白質(zhì)都是由單體組成的生物大分子C.核酸的合成過(guò)程中需要多種蛋白質(zhì)的參與D.高溫加熱會(huì)破壞蛋白質(zhì)和核酸分子中的肽鍵答案：D2.煙草花葉病毒、乳酸菌和酵母菌都具有的特點(diǎn)是（）A.以細(xì)胞膜作為系統(tǒng)邊界 B.以DNA作為遺傳物質(zhì)C.可以進(jìn)行無(wú)氧呼吸 D.都屬于異養(yǎng)型生物答案：D3.下列有關(guān)核糖體、線粒體和葉綠體的敘述，正確的是（）A.三者的結(jié)構(gòu)中都含有核酸B.三者都存在于所有真核細(xì)胞中C.三者都是ATP合成的場(chǎng)所D.三者的膜結(jié)構(gòu)中都含有蛋白質(zhì)答案：A4.在紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞的失水和吸水實(shí)驗(yàn)中，可依次觀察到甲、乙、丙三種細(xì)胞狀態(tài)。下列敘述不正確的是（）A.實(shí)驗(yàn)所用的洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞為活細(xì)胞B.甲、乙、丙可在同一個(gè)細(xì)胞內(nèi)依次發(fā)生C.與甲相比，乙所示細(xì)胞的細(xì)胞液濃度較低D.由乙轉(zhuǎn)變?yōu)楸倪^(guò)程中，有水分子進(jìn)出細(xì)胞答案：C5.科學(xué)家從菠菜葉綠體中提取了可以捕獲太陽(yáng)能的膜狀結(jié)構(gòu)，將其與酶等其他物質(zhì)放入具有多腔室結(jié)構(gòu)的反應(yīng)器中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這些反應(yīng)器能像葉綠體那樣工作，創(chuàng)造出了“人工葉綠體”。下列有關(guān)敘述不正確的是（）A.“人工葉綠體”可以利用光能，將二氧化碳轉(zhuǎn)化為有機(jī)物B.“人工葉綠體”具有的多腔室結(jié)構(gòu)可以提高光合作用的效率C.從菠菜葉綠體中提取的膜狀結(jié)構(gòu)最可能來(lái)自葉綠體內(nèi)膜D.放入生物反應(yīng)器中的酶可以降低光反應(yīng)和暗反應(yīng)的活化能答案：C6.為了研究某種樹木樹冠上下層葉片光合作用的特性，某同學(xué)選取來(lái)自樹冠不同層的A、B兩種葉片，在離體情況下分別測(cè)定其凈光合速率，結(jié)果如圖所示，有關(guān)敘述不正確的是（）A.A葉片的呼吸作用速率大于B葉片的呼吸作用速率B.光照強(qiáng)度達(dá)到一定數(shù)值時(shí)，A葉片的凈光合速率開始下降C.A葉片是樹冠下層葉片，B葉片是樹冠上層葉片D.若要比較兩種葉片葉綠素的含量可用無(wú)水乙醇提取色素答案：A7.下列關(guān)于格里菲斯和艾弗里肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)敘述，正確的是（）A.格里菲斯實(shí)驗(yàn)中加熱殺死的S型菌不能使R型細(xì)菌發(fā)生轉(zhuǎn)化B.艾弗里實(shí)驗(yàn)中DNA酶將S型菌DNA分解會(huì)導(dǎo)致R型細(xì)菌不發(fā)生轉(zhuǎn)化C.格里菲斯和艾弗里的實(shí)驗(yàn)均以小鼠的生存狀況作為實(shí)驗(yàn)結(jié)論的依據(jù)D.格里菲斯和艾弗里的實(shí)驗(yàn)思路都是將各種物質(zhì)分開單獨(dú)研究其作用答案：B8.下圖表示一個(gè)DNA分子的片段，下列有關(guān)敘述正確的是（）A.②和③交替排列構(gòu)成DNA的基本骨架B.④所示的結(jié)構(gòu)中貯存了遺傳信息C.DNA分子復(fù)制時(shí)⑤所示化學(xué)鍵斷開D.轉(zhuǎn)錄時(shí)該片段的兩條鏈都可作為模板答案：A9.1966年克里克提出擺動(dòng)學(xué)說(shuō)，即有的tRNA反密碼子的第3位堿基在與密碼子的第3位堿基進(jìn)行互補(bǔ)配對(duì)時(shí)是不嚴(yán)格的，有一定的自由度可以擺動(dòng)，同時(shí)解釋了次黃嘌呤（I）的配對(duì)方式。具體配對(duì)關(guān)系如下表所示密碼子C或UGUA或GA、U、C反密碼子GCAUI下列相關(guān)敘述正確的是（）A.細(xì)胞中只有同時(shí)含有61種tRNA才能保證翻譯的正常進(jìn)行B.擺動(dòng)現(xiàn)象的存在降低了密碼子中第三個(gè)堿基改變?cè)斐傻挠绊慍.mRNA和tRNA進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)需要RNA聚合酶的作用D.遺傳信息可以從mRNA的密碼子流向tRNA的反密碼子答案：B10.下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的有關(guān)敘述中，不正確的是（）A.將雞的成熟紅細(xì)胞置于清水中，紅細(xì)胞破裂后將DNA釋放出來(lái)B.用2mol/L的氯化鈉溶液溶解提取物并離心后，須棄去上清液C.在提取液中加入95%冷酒精后DNA會(huì)與蛋白質(zhì)分離并析出D.提取的絲狀物溶解后加入二苯胺溶液，水浴加熱后溶液變?yōu)樗{(lán)色答案：B11.下列關(guān)于PCR技術(shù)及其應(yīng)用的敘述，正確的是（）A.反應(yīng)體系中需要加入DNA解旋酶、DNA聚合酶等多種酶B.反應(yīng)體系中加入的兩種引物之間能夠進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)C.低溫復(fù)性的目的是使解旋的兩條模板鏈重新恢復(fù)雙螺旋D.可以用于檢測(cè)DNA病毒，也可以先進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄檢測(cè)RNA病毒答案：D12.下列關(guān)于基因工程中操作工具的敘述，不正確的是（）A.限制性內(nèi)切酶識(shí)別并在特定位置斷開磷酸二酯鍵B.處理載體和處理目的基因的限制酶通常是相同的C.載體中常以抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因D.HIV病毒可以直接作為基因工程的載體答案：D13.科學(xué)家利用深海魚美洲擬鰈抗凍蛋白基因成功培育出了耐寒的番茄新品種（1~4號(hào)），并在低溫條件下進(jìn)行了致死溫度的測(cè)定，結(jié)果如下。有關(guān)敘述不正確的是（）對(duì)照組新品種1號(hào)2號(hào)3號(hào)4號(hào)致死溫度（℃）-5℃-6℃-6．5℃-7℃-7℃A.通常采用顯微注射法將抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞B.利用組織培養(yǎng)技術(shù)將轉(zhuǎn)基因番茄細(xì)胞培育成植株C.應(yīng)使用未轉(zhuǎn)入抗凍蛋白基因的番茄作為對(duì)照組D.表中數(shù)據(jù)表明番茄新品種的抗寒能力有所提高答案：A14.下圖為人工種子的示意圖，有關(guān)敘述不正確的是（）A.與常規(guī)種子繁殖方法相比，人工種子具有繁殖速度快的優(yōu)點(diǎn)B.人工種皮應(yīng)具有透氣性，保證胚狀體呼吸作用的正常進(jìn)行C.胚狀體是經(jīng)過(guò)脫分化形成的，此時(shí)細(xì)胞處于未分化狀態(tài)D.人工胚乳中應(yīng)含有植物激素、糖類、水和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)答案：C15.2018年《細(xì)胞》期刊報(bào)道，中國(guó)科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)靈長(zhǎng)類動(dòng)物進(jìn)行克隆，獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”。有關(guān)敘述不正確的是（）A.“中中”和“華華”的獲得涉及核移植和胚胎培養(yǎng)的過(guò)程B.克隆猴體細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)與核供體的遺傳物質(zhì)完全相同C.以雌性和雄性個(gè)體細(xì)胞作為核供體，得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目相同D.以雌性和雄性個(gè)體細(xì)胞作為核供體，得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的性染色體組合不同答案：B二、非選擇題16.心臟是人體的重要器官，心肌細(xì)胞是構(gòu)成心臟的最基本單位，延緩心肌衰老對(duì)改善老年人生活質(zhì)量具有非常重要的意義。（1）許多研究表明線粒體與心肌細(xì)胞衰老密切相關(guān)，線粒體中與有氧呼吸有關(guān)的酶主要分布在____________。心肌細(xì)胞每天能產(chǎn)生相當(dāng)于自身重量70倍的ATP，但細(xì)胞中ATP含量卻很低，其原因是_____________。研究人員選取青年鼠和老年鼠各20只，研究?jī)山M小鼠心肌細(xì)胞ATP的合成能力，在檢測(cè)介質(zhì)中加入各組小鼠離體心肌線粒體，置于適宜的溫度和氣體環(huán)境中，加入_____________、ADP和Pi等反應(yīng)物啟動(dòng)線粒體內(nèi)的反應(yīng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)老年組ATP合成活力明顯下降，推測(cè)心肌細(xì)胞衰老的過(guò)程中會(huì)發(fā)生線粒體損傷。（2）在青年健康心肌細(xì)胞中，損傷線粒體可以通過(guò)自噬機(jī)制被清除（如下圖），a形成囊泡包裹損傷的線粒體并與b進(jìn)行融合，b中的酸性水解酶可以將線粒體水解。圖中a來(lái)源于____________（填細(xì)胞器名稱），b代表的細(xì)胞器是____________。有研究表明衰老心肌細(xì)胞中線粒體自噬水平降低，導(dǎo)致受損線粒體堆積，進(jìn)而產(chǎn)生炎癥反應(yīng)進(jìn)一步減弱自噬。（3）適量運(yùn)動(dòng)是公認(rèn)的延緩心肌衰老的方式，研究人員取40只青年小鼠分為兩組，其中運(yùn)動(dòng)組小鼠每天進(jìn)行一定負(fù)荷的耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練。將兩組小鼠心肌組織進(jìn)行切片，用電子顯微鏡觀察心肌細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu)和線粒體自噬情況。結(jié)果見下圖（圖中白色箭頭指示自噬小泡，黑色箭頭指示線粒體）。可以看到__________，推測(cè)適量運(yùn)動(dòng)通過(guò)提高線粒體自噬水平延緩心肌細(xì)胞衰老。（4）很多研究表明大強(qiáng)度的急性運(yùn)動(dòng)反而會(huì)引起包括炎癥反應(yīng)在內(nèi)的一系列不良反應(yīng)，請(qǐng)基于上述研究提出一個(gè)導(dǎo)致該現(xiàn)象發(fā)生的可能原因：_____________。答案：（1）線粒體基質(zhì)和線粒體內(nèi)膜；ATP與ADP之間的相互轉(zhuǎn)化，使細(xì)胞內(nèi)的ATP總是處于動(dòng)態(tài)平衡之中，且ATP與ADP之間的轉(zhuǎn)化十分迅速，從而保證了細(xì)胞能量的持續(xù)供應(yīng)；[H]（2）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)；溶酶體（3）運(yùn)動(dòng)組的小鼠心肌細(xì)胞內(nèi)自噬小泡比對(duì)照組的多（4）大強(qiáng)度的急性運(yùn)動(dòng)可能會(huì)使線粒體超負(fù)荷，導(dǎo)致?lián)p傷更多的線粒體，進(jìn)而產(chǎn)生炎癥反應(yīng)在內(nèi)的一系列不良反應(yīng)17.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）是一種自身免疫病，患者的成纖維樣滑膜細(xì)胞（FLS）異常活化。藥物B能夠抑制位于細(xì)胞膜上的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白活性，科研人員期待它能成為一種治療RA的新型藥物。（1）已有實(shí)驗(yàn)表明藥物B在食道癌、卵巢癌的治療中有較好的作用。癌細(xì)胞具有_________等特點(diǎn)（至少寫出2點(diǎn)），其發(fā)生的根本原因是_________。（2）研究人員首先研究了藥物B對(duì)RA一FLS細(xì)胞活力的影響，結(jié)果如圖1。本實(shí)驗(yàn)的自變量是___________，由圖1可以說(shuō)明藥物B抑制細(xì)胞活力，請(qǐng)解釋藥物B抑制細(xì)胞活力的可能原因：___________。（3）研究人員繼續(xù)利用Transwell小室法研究了藥物B對(duì)RA-FLS細(xì)胞侵襲能力的影響。實(shí)驗(yàn)裝置由若干小室組成（如圖2），小室分為上室和下室兩部分，上、下室由一層聚碳酸酯膜隔開，膜上鋪有基質(zhì)膠，穿過(guò)基質(zhì)膠的細(xì)胞數(shù)量越多，說(shuō)明細(xì)胞侵襲能力越強(qiáng)。RA-FLS細(xì)胞經(jīng)____________處理分散制成細(xì)胞懸液。與不同濃度的藥物B混合后注入不同小室的上室，下室中加入高營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)液。37℃培養(yǎng)48h，對(duì)____________的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，結(jié)果如圖3，說(shuō)明藥物B會(huì)對(duì)RA-FLS細(xì)胞的侵襲能力具有明顯的抑制作用。（4）RA-FLS降解基質(zhì)膠依賴于基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2），研究人員檢測(cè)了藥物B處理下RA-FLS細(xì)胞的MMP-2蛋白表達(dá)情況。①β-actin是細(xì)胞中普遍存在的肌動(dòng)蛋白，檢測(cè)該蛋白表達(dá)的目的是排除_____________的干擾。②由結(jié)果可知，藥物B_____________，從而抑制了RA-FLS細(xì)胞的侵襲能力。（5）綜上所述，你認(rèn)為藥物B能否成為治療RA的潛在藥物?請(qǐng)寫出你的理由_____________。答案：（1）無(wú)限增殖、形態(tài)結(jié)構(gòu)改變；原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變（2）藥物B的濃度和處理的時(shí)間；藥物B通過(guò)抑制細(xì)胞膜上的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的活性，使細(xì)胞吸收葡萄糖減少，降低細(xì)胞呼吸強(qiáng)度，細(xì)胞產(chǎn)能減少，而抑制細(xì)胞的活力（3）胰蛋白酶；下室（4）無(wú)關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果；通過(guò)抑制MMP-2蛋白的表達(dá)（5）可以；因?yàn)樗幬顱可以明顯抑制RA-FLS細(xì)胞的侵襲能力18.閱讀下面的材料，完成（1）~（4）題。細(xì)胞生命歷程包括細(xì)胞的分裂、分化、衰老和凋亡等。一些細(xì)胞會(huì)面臨著一個(gè)命運(yùn)的選擇，要不要復(fù)制產(chǎn)生一個(gè)新的細(xì)胞?這個(gè)選擇關(guān)系到人體發(fā)育和穩(wěn)態(tài)的維持等生理過(guò)程，它的失調(diào)也與癌癥等疾病的發(fā)生發(fā)展有著密切聯(lián)系。細(xì)胞在何時(shí)感受到胞外信號(hào)變化并決定產(chǎn)生一個(gè)新細(xì)胞呢?幾十年來(lái)科學(xué)家普遍認(rèn)為，細(xì)胞只在細(xì)胞周期G1期的限制點(diǎn)（R點(diǎn)）之前感受到來(lái)自于細(xì)胞外環(huán)境中分裂信號(hào)，一旦細(xì)胞感受到分裂信號(hào)并通過(guò)R點(diǎn)，該細(xì)胞就能夠進(jìn)入S期并完成其后的細(xì)胞周期過(guò)程（見圖1）。但有科學(xué)家對(duì)此結(jié)果提出質(zhì)疑，因?yàn)檠芯繒r(shí)所采用的方法本身就會(huì)引起胞外環(huán)境的改變，可能對(duì)胞外分裂信號(hào)存在干擾。注：G1、S、G2和M分別表示復(fù)制前期、DNA復(fù)制期、復(fù)制后期和分裂期近年來(lái)，有科學(xué)家利用抑制MAPK信號(hào)通路的方法替代原有的研究方法尋找細(xì)胞感受分裂信號(hào)的時(shí)間，這是因?yàn)镸APK信號(hào)通路在感受分裂信號(hào)的過(guò)程中發(fā)揮重要作用。該通路完成標(biāo)志是CDK2的活性升高，MAPK可以被磷酸化的MAPK激酶（MAPKK）激活，而其中的MAPKK被磷酸化的MAPKK激酶（MAPKKK）激活，此處的MAPKKK通過(guò)與GTP酶（催化水解GTP）相互作用而被激活，經(jīng)過(guò)這一系列過(guò)程將胞外的細(xì)胞分裂信號(hào)與細(xì)胞核內(nèi)的反應(yīng)聯(lián)系在一起。因此抑制MAPK信號(hào)相當(dāng)于阻斷了細(xì)胞感知外界分裂信號(hào)的能力。利用抑制MAPK信號(hào)通路的方法研究發(fā)現(xiàn)，與傳統(tǒng)“限制點(diǎn)”模型不同，對(duì)于連續(xù)分裂的細(xì)胞，細(xì)胞并不是在自己所在細(xì)胞周期的R點(diǎn)前感受分裂信號(hào)，而是取決于它的親代細(xì)胞G2期是否感受到分裂信號(hào)，這決定了該細(xì)胞能否完成細(xì)胞分裂。研究人員據(jù)此提出了“G2期窗口”模型。2020年4月，我國(guó)科學(xué)家閔明瑋的研究團(tuán)隊(duì)在《Science》雜志上發(fā)表文章，又進(jìn)一步提出了一個(gè)模型。為了評(píng)估這種模型，研究人員在親代細(xì)胞間期的不同時(shí)間段抑制MAPK通路，每次抑制一個(gè)小時(shí)（如圖2），利用A物質(zhì)活性傳感器監(jiān)測(cè)MAPK通路的抑制情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在所有不同處理時(shí)間段對(duì)MAPK通路的抑制，都會(huì)導(dǎo)致子代增殖細(xì)胞的比例減少，這與支持“G2期窗口”模型的預(yù)期結(jié)果不同。閔明瑋研究團(tuán)隊(duì)在本實(shí)驗(yàn)和其他實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上提出新模型。這個(gè)重要發(fā)現(xiàn)也改寫了教科書中關(guān)于細(xì)胞增殖決定的認(rèn)識(shí)。（1）動(dòng)物體細(xì)胞分裂的主要方式是__________________。（2）GTP和ATP的結(jié)構(gòu)類似，其中的堿基A替換為G，GTP的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)式為_______________。推測(cè)GTP水解的意義是________________的同時(shí)使MAPKKK磷酸化而被激活。請(qǐng)?jiān)谙聢D中將MAPK的信號(hào)通路簡(jiǎn)圖補(bǔ)充完整。（3）文中提到閔明瑋團(tuán)隊(duì)利用A物質(zhì)活性傳感器監(jiān)測(cè)MAPK通路的抑制情況，其中的A物質(zhì)應(yīng)為___________。采用閔明瑋團(tuán)隊(duì)的研究方法，若出現(xiàn)的預(yù)期結(jié)果為____________，則支持“G2期窗口”模型，但實(shí)際實(shí)驗(yàn)結(jié)果與此不符。（4）下圖a、b分別為傳統(tǒng)“限制點(diǎn)”模型和“G2期窗口”模型示意圖，請(qǐng)?jiān)趫Dc中將閔明瑋團(tuán)隊(duì)的研究成果表示出來(lái)____________。答案：（1）有絲分裂（2）G-P～P～P；釋放能量（3）CDK2；只在親代細(xì)胞間期的G2期的時(shí)間段抑制MAPK通路的，才會(huì)導(dǎo)致子代增殖細(xì)胞的比例減少，而抑制親代細(xì)胞間期的其它時(shí)期的MAPK通路的，子代增殖細(xì)胞的比例不變（4）19.阿爾茨海默癥（AD）是一種神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，其發(fā)病的主要誘因是β—淀粉樣蛋白（Aβ）在腦組織液中沉積，影響了神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞（MC細(xì)胞）的功能，發(fā)病機(jī)制模式圖如圖1，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）MC細(xì)胞接收到Aβ沉積的信號(hào)后，細(xì)胞質(zhì)中經(jīng)磷酸化的K酶可以______________IK磷酸化，磷酸化的IK蛋白很快就與NF蛋白分離，游離的NF進(jìn)入______________內(nèi)，與IL-1基因前端的調(diào)控序列結(jié)合，該基因通過(guò)______________過(guò)程合成IL-1mRNA，mRNA通過(guò)進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，經(jīng)______________過(guò)程合成并分泌大量IL-1蛋白，誘發(fā)炎癥，最終導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)的功能障礙。（2）為探明藥物X治療AD的機(jī)理，科研人員利用正常的MC細(xì)胞進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2。由圖2結(jié)果可知，藥物X能夠抑制Aβ的作用，判斷的依據(jù)是___________。已知藥物X對(duì)細(xì)胞核中NF蛋白含量無(wú)顯著影響，綜合圖1和圖2，藥物X治療AD的機(jī)理可能是___________。（3）已知IK的磷酸化位點(diǎn)位于其末端肽段N。欲驗(yàn)證“IK磷酸化能誘發(fā)炎癥”，請(qǐng)?jiān)诳崭裉幪钊胱帜妇幪?hào)將實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)補(bǔ)充完整（已有研究表明，實(shí)驗(yàn)中的肽段對(duì)細(xì)胞內(nèi)NF蛋白的入核、IL-1蛋白的合成與分泌均無(wú)直接影響）。分組實(shí)驗(yàn)處理炎癥檢測(cè)指標(biāo)對(duì)照組①________②______________實(shí)驗(yàn)組③______④ca．細(xì)胞中導(dǎo)入與N的氨基酸種類、數(shù)目、序列相同的肽段b．細(xì)胞中導(dǎo)入與N的氨基酸種類、數(shù)目、序列不同的肽段c．加入溶于緩沖液的Aβ沉積物d．加入與c等量的同種緩沖液e．培養(yǎng)液中IL-1的含量f．MC細(xì)胞中磷酸化IK與IK的比值答案：（1）促進(jìn)；細(xì)胞核；轉(zhuǎn)錄；翻譯（2）隨著藥物X濃度的增大，IL-1的相對(duì)表達(dá)量遞減；藥物X通過(guò)抑制IL-1的翻譯過(guò)程減少IL-1的分泌量（3）①.b②.c③.a④.e20.蘇云金芽孢桿菌產(chǎn)生的Bt毒蛋白具有良好的殺蟲效果，且具有高效、安全的優(yōu)點(diǎn)，Bt基因也因此成為應(yīng)用最為廣泛的殺蟲基因。Bt基因位于蘇云金芽孢桿菌的質(zhì)粒A上，為了了解Bt基因的序列信息首先要得到完整的Bt基因，科學(xué)家們進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：（1）首先用限制酶HindIII處理質(zhì)粒A，得到多個(gè)DNA片段，分別與質(zhì)粒B連接，獲得重組DNA分子，并將這些重組DNA分子導(dǎo)入經(jīng)_____________處理的大腸桿菌中，由此構(gòu)建了蘇云金芽孢桿菌的部分基因組文庫(kù)。（2）研究人員利用抗Bt毒蛋白的抗體，進(jìn)行_____________，并通過(guò)電泳檢測(cè)上述文庫(kù)中不同大腸桿菌菌株的Bt毒蛋白表達(dá)情況，結(jié)果如圖1所示。根據(jù)電泳結(jié)果推測(cè)菌株3中僅插入了Bt基因的一部分序列，并非完整基因，研究人員作出這一推測(cè)的依據(jù)是_____________。對(duì)菌株3中插入的DNA片段序列進(jìn)行測(cè)序（計(jì)為Bt-1序列），并根據(jù)序列制成了DNA探針X。（3）為了獲得完整的Bt基因，研究人員又使用限制酶PstI切割質(zhì)粒A，得到多個(gè)DNA片段。利用探針X通過(guò)_____________方法可確定其中含有Bt基因序列的DNA片段，進(jìn)行測(cè)序（計(jì)為Bt-2序列）。如圖2，為了將Bt-1和Bt-2兩段DNA分子連接起來(lái)，研究人員用限制酶_____________和DNA連接酶處理兩段序列，獲得的重組DNA分子計(jì)為Bt-3。（4）為了進(jìn)一步驗(yàn)證Bt-3中包含完整的Bt基因，請(qǐng)寫出簡(jiǎn)要的實(shí)驗(yàn)步驟和檢測(cè)指標(biāo)。_____________________________________________________________________答案：（1）Ca2+（2）抗原-抗體雜交；菌株3中Bt基因表達(dá)的蛋白質(zhì)的分子量小于Bt毒蛋白的分子量（3）DNA分子雜交；HindIII或PstI（4）將Bt-3與質(zhì)粒B連接構(gòu)建重組DNA后，導(dǎo)入大腸桿菌，用抗Bt毒蛋白的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交，并通過(guò)電