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免疫組化實驗中的抗原修復來源：網絡抗原修復是指石蠟、冰凍、火棉膠、塑料切片免疫組織化學(IHC)前用胰蛋白酶、尿素、表面活性劑、微波緩沖液和金屬鹽等，使被掩蓋的抗原決定簇或變性的抗原重新暴露或抗原性得到一定程度的恢復過程。免疫組化實驗中的抗原修復:免疫組化實驗中的抗原修復:1、酶消化：如胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白水解酶。2、 抗原熱修復：高壓法、微波法、水煮法。眾所周知，免疫組化染色中最關鍵的莫過于抗原修復，而絕大多數常用抗體的修復是通過加熱來完成的，熱抗原修復優于酶消化，更有效，染色結果更易一致，操作單一。3、 修復時間：既要獲得最強的染色結果，又要保持組織形態的完整性。許多抗原修復存在的問題是組織固定時間過短時，強烈的抗原修復可引起形態破壞、脫片及組織完全消化，解決的方法可采用較短時間的熱修復或減少酶的消化時間。4、 抗原修復緩沖液：有檸檬酸鹽緩沖液(pH6.0)、Tris(pH7-8)、EDTA(pH8.0?9.0)、EGTA(pH9.0)等。檸檬酸鹽緩沖液（PH6.0）的優點是染色背景清晰，適合于大多數抗體，Tris和EDTA兩種修復液對部分抗原修復效果較強，但其染色背景同時加深，如使用不當易造成假陽性結果的判斷。目前還沒有一種抗原修復液能適合于所有的抗體，檸檬酸緩沖液（PH6.0）可作為免疫組化常規使用的抗原修復緩沖液，但也不能除外某些抗體適用于EDTA和EGTA緩沖修復液，一般抗原比較難于表達的抗體多選擇高PH值的修復液。例如：ER、PR、Bcl-2、Bcl-6、TdT、Ki-67、CyclinD1等。5、 抗原熱修復注意事項：無論哪一步都不要讓切片干凅，加熱后需要冷卻15－30分鐘。充分的抗原修復是影響染色結果的唯一重要因素，加熱的溫度和時間可導致修復不足或過度修復。6、 抗原熱修復對組織中內源性生物素的影響：抗原熱修復在增強抗原決定簇表達的同時，也增強了組織中內源性生物素的反應。采用卵白素-生物素（Avidin-biotin）檢測系統，組織中內源性生物素容易出現人為假象，在加熱抗原處理條件完全相同的陰性對照片中可以觀察到較強的內源性生物素的反應，沒有經過熱抗原處理的切片中沒有出現類似的情況。在細胞漿中呈均一的細顆粒狀的淺棕色陽性，有時表達也非常強，與真陽性的結果表達很相似，在以往的免疫組化染色中內源性生物素的影響對診斷造成許多的誤差，卻常常被忽略。值得提醒的是在概念上一定要十分清楚，陰性對照片必須與一抗的抗原修復處理條件完全相同，才能準確發現內源性生物素出現的部位。7、 內源性生物素封閉方法：一般在抗原修復以后，加抗體前使用卵白素進行生物素阻斷處理，也可使用非生物素的檢測系統，如：EliVision、EnVision、SuperVesion等。抗原修復能最大程度地恢復在制片等過程中損失的抗原性，使原來認為不能在石蠟切片上進行IHC的許多抗體獲得了良好的染色結果，成為一種有效的補救措施。【本訂閱號為非盈利學術交流訂閱號，部分資料來源于網絡，如

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