第六章

芳酸類非甾體抗炎藥物的分析《藥物分析》課件基本要求掌握：本類藥物的結構和性質；主要芳酸類藥物的鑒別、檢查和含量測定的原理與特點。熟悉：主要芳酸類非甾體抗炎藥物雜質的結構、危害、檢查方法與含量限度。了解：影響芳酸類非甾體抗炎藥物穩定性的主要因素，體內樣品與臨床監測。基本內容一、典型藥物的分類與性質二、鑒別試驗三、特殊雜質檢查四、含量測定五、體內藥物分析練習與思考結構剖析理化特征鑒別試驗雜質檢查含量測定練習與思考

第一節典型藥物分類與理化性質一、分類水楊酸類：水楊酸、阿司匹林鄰氨基苯甲酸類：甲芬那酸鄰氨基苯乙酸類：雙氯酚酸鈉芳基丙酸類：布洛芬吲哚乙酸類：吲哚美辛苯并噻嗪甲酸類：吡羅昔康其它芳酸：對乙酰氨基酚結構特點：羧基(—COOH)、苯環（）1、水楊酸類阿司匹林水楊酸（鈉）雙水楊酯二氟尼柳2、鄰氨基苯甲酸類苯甲酸（鈉）代表藥物甲芬那酸3、芳基苯丙酸類布洛芬代表藥物萘普生酮洛芬4、其他芳酸類代表藥物對乙酰氨基酚返回游離羧基阿司匹林酯鍵苯環pKa=3.49直接中和法兩步滴定法H水解后生成水楊酸雜質水解后才發生三氯化鐵反應酚羥基潛在芳伯氨基苯環對乙酰氨基酚1、性狀大多數是結晶性固體；2、溶解性游離芳酸類藥物，幾乎不溶于水，易溶于有機溶劑芳酸堿金屬鹽易溶于水二、理化性質3、酸性芳酸類藥物分子中具有－COOH，所以顯弱酸性（受取代基的影響）藥用芳酸pKa在3~6之間。具有酸性，可以與堿成鹽。4、紫外和紅外特征吸收

返回2.953.494.26第二節鑒別試驗具酚羥基或水解后能產生酚羥基的藥物一、FeCl3反應紫堇色1、水楊酸反應對乙酰氨基酚的水溶液加三氯化鐵試液即顯藍紫色。2、酚羥基反應苯甲酸的中性或堿性水溶液，與三氯化鐵試液生成堿式苯甲酸鐵鹽的赭色沉淀。二、縮合反應酮洛芬二硝基苯肼橙色三、重氮化—偶合反應芳香第一胺類鑒別反應（紅色）

+CH3COONa四、水解反應五、紫外吸收光譜法一般采用對比法：樣品吸收光譜特征與標準化合物的吸收光譜特征進行對照比較或與文獻所載標準圖譜核對。（1）比較特征吸收數據（2）比較不同吸收峰處的吸收度比值（3）比較吸收曲線的一致性Amax,Amin,

max,

min,

shA1/A2六、紅外吸收光譜法七、色譜法1、TLC法：二氟尼柳膠囊2、HPLC法：阿司匹林片、泡騰片、腸溶片、腸溶膠囊第三節特殊雜質檢查典型芳酸類非甾體抗炎藥物的有關物質信息表：一、阿司匹林及雙水楊酯中游離水楊酸與有關物質的檢查（一）阿司匹林及雙水楊酸酯的合成（二）阿司匹林中游離水楊酸與有關物質的檢查1、游離水楊酸來源：Ch.P.(2005)，檢查方法：取阿司匹林原料藥0.1g，加乙醇1ml溶解后，加冷水適量使成50ml，立即加新制的稀硫酸鐵銨溶液[取鹽酸溶液（9→100）1ml，加硫酸鐵銨指示液2ml后，再加水適量使成100ml]1ml，搖勻；30秒鐘內如顯色，與對照液（精密稱取水楊酸0.1g，加水溶解后加冰醋酸1ml，搖勻，再加水使成1000ml，搖勻，精密量取1ml，加乙醇1ml，水48ml，與上述新制的稀硫酸鐵銨溶液1ml，搖勻）比較，不得更深。其限量為？檢查原理、方法(一）：Ch.P.(2010)，檢查方法：HPLC檢查原理、方法（二）：色譜柱：ODS流動相：乙腈－四氫呋喃－冰醋酸－水（20：5：5：70）檢測波長：303nm定量方法：外標法限量：＜0.1%限量規定原料0.1%阿司匹林片0.3%阿司匹林腸溶片1.5%阿司匹林膠囊(1.0%)阿司匹林泡騰片、栓3.0%HPLC法

2、有關物質檢查方法：HPLC色譜柱：ODS流動相：A（乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20：5：5：70））－B（乙腈）檢測波長：276nm檢測方法：自身稀釋對照法結果：A各雜質（除水楊酸外）＜A對照主峰三、雙水楊酯中游離水楊酸的檢查檢查原理：游離水楊酸＋Fe3+(Fe(NO3)3)→紫色配合物↓A530結果：

A供試＜A對照（限度為0.5%)四、萘普生中6-甲氧基-2-萘乙酮等有關物質的檢查（一）雜質來源Ⅰ：2-萘甲醚;Ⅱ:6-甲氧基-2-萘乙酮；Ⅳ:萘普生（二）有關物質檢查1、色譜條件與系統適用性試驗

2、溶液制備與測定法

供試品溶液對照品溶液對照溶液3、結果A6-甲氧基-2-萘乙酮（樣）＜A6-甲氧基-2-萘乙酮（對）A其它雜質（樣）＜2A6-甲氧基-2-萘乙酮（對）A總雜質（樣）＜A萘普生（對）五、對乙酰氨基酚中對氨基酚和對氯苯乙酰胺的檢查（一）雜質來源（二）有關物質檢查（HPLC法）

1、對氨基酚及有關物質

2、對氯苯乙酰胺反應摩爾比1：1原理產物為強堿弱酸鹽宜選酚酞為指示劑+NaOH溶解阿司匹林防止酯鍵水解第四節含量測定一、酸堿滴定法（一）直接滴定法（１）優點：簡便、快速缺點：酯鍵水解干擾

酸性雜質干擾（如水楊酸）討論：

（2）適用范圍：用于合格原料藥的含量測定方法:取本品0.4g,精密稱定,加中性乙醇(對酚酞指示液顯中性)20ml,溶解后,加酚酞指示液3滴,用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定.每1ml的氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當于18.02mg的C9H8O4。2NaOH（過量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O剩余滴定：水解：2NaOH（總）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O空白試驗主試驗（二）水解后剩余滴定法

（1）反應摩爾比為1∶2（2）優點：消除了酯鍵水解的干擾（3）缺點：酸性雜質干擾尚存在討論：取阿司匹林原料藥1.5078g，加入氫氧化鈉滴定液（0.5mol/L）50.0ml，混合，緩緩煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mol/L，F＝0.996）滴定剩余的氫氧化鈉，消耗15.70ml，空白試驗消耗49.70ml。

(1)計算滴定度。MC9H8O4＝180.16g/mol。（2）計算含量。（三）兩步滴定法適用于阿司匹林片劑、阿司匹林腸溶片的測定片劑穩定劑:酒石酸或枸櫞酸分解產物:水楊酸和醋酸第一步:中和第二步:水解和測定第一步中和酒石酸枸櫞酸水楊酸醋酸+NaOH→酒石酸鈉枸櫞酸鈉水楊酸鈉醋酸鈉不用于含量計算第二步水解后剩余滴定反應摩爾比為1∶1+NaOH定量過量主試驗2NaOH（總）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O空白試驗（1）消除了酸性雜質的干擾，（2）消除了酯鍵水解的干擾優點：片劑含量測定結果的計算：取標示量為0.3g/片的阿司匹林片10片，質量為3.5469g，研細，精密稱取其片粉0.3592g，用20ml中性乙醇溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氫氧化鈉液至使溶液顯粉紅色，再精密加氫氧化鈉溶液（0.1mol/L）40ml，至水浴上加熱15min，迅速冷至室溫，用硫酸液（0.0539mol/L）滴定至終點，消耗19.02ml，空白消耗該溶液34.87ml。（1）計算滴定度。(M阿司匹林＝180.16g/mol)（2）求阿司匹林片的含量。二、柱分配色譜-紫外分光光度法USP32－NF27測定阿司匹林膠囊的含量。經柱色譜分離后，可同時定量測定阿司匹林和水楊酸。280nm波長處測定吸收度，外標法計含量算

阿司匹林栓Ch.P（2010）

外標法定量三、HPLC法色譜條件：固定相：ODS流動相：乙腈-四氫呋喃-冰醋酸水（20:5:5:70）檢測波長：276nm取本品5粒，精密稱定，置小燒杯中，在40～50℃水浴上微溫熔融，在不斷攪拌下冷卻至室溫，精密稱取適量（約相當于阿司匹林0.1g），置50ml量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液適量，在40～50℃水浴中充分振搖使阿司匹林溶解，放冷，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，置冰浴中冷卻1h，取出，迅速濾過，取續濾液作為供試品貯備液。精密量取供試品貯備液5ml，置100ml量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取阿司匹林對照品，精密稱定，加1%冰醋酸的甲醇溶液振搖使溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。1.乙酰水楊酸及其制劑中的游離水楊酸是如何引入的？簡述檢查方法的原理及其限量。2.酸堿滴定法測定阿司匹林的含量，加中性乙醇的作用是什么?3.用水解后剩余滴定法測定阿司匹林含量時要進行同樣條件下的空白試驗，為什么？4.對氨基水楊酸鈉中的特殊雜質是什么？試述檢查這種雜質的方法的原理？5.阿司匹林含量測定通常采用哪幾種方法？設計水楊酸鈉的含量測定方法設計阿司匹林片的含量測定方法1、阿司匹林含量測定中避免水楊酸干擾的中和滴定法是

A直接滴定法

B氧化中和法

C雙相滴定法

D兩步滴定法

2、三氯化鐵與水楊酸類藥物顯色反應最適宜酸度是

A強酸性

B弱酸性

C中性

D弱堿性

E強堿性3、水楊酸類藥物鑒別反應

A三氯化鐵試劑呈紫色-紫堇色

B重氮化偶合反應呈橙紅色

C碳酸鈉試液煮沸加酸酸化成白色沉淀

DA+C兩項反應

EA+B+C三項反應4、芳酸類的紅外光譜是重要的鑒別方法。水楊酸的結構為苯環，羧基和鄰位羥基，紅外光譜的主要特征峰，是A3300-2300cm-1；1600cm-1；890cm-1；775cm-1

B3300-2300cm-1；1600cm-1；775cm-1

C3300-2300cm-1；1600cm-1；890cm-1

D3300-2300cm-1；1600cm-1；1610，1570，1480，1440cm-1

E3300-2300cm-1；1600cm-1；1610，1570，1480，1440cm