免疫質量控制

莫炳強檢驗質量的重要性醫學檢驗是一門綜合性應用學科，是現代醫學不可缺少的組成部分，其檢驗質量直接影響著醫療工作的整體水平。免疫質量控制相關的幾個概念質量Quality

一組固有特性滿足要求的程度。

注1：術語“質量”可使用形容詞如差、好或優秀來修飾。

注2：“固有的”（其反義詞是“賦予的”）就是指存在某事或某物中本身就的，尤其是那種永久的特性。質量控制(QualityControl,QC)

質量管理的一部分，致力于滿足質量要求質量保證(QualityAssurance,QA)質量管理的一部分，致力于提供質量要求會得到滿足的信任。

室間質量評價（ExternalQualityAssessment,EQA）//能力驗證(ProficiencyTesting,PT)

利用實驗室間的比對確定實驗室的檢測能力(能力驗證)室內質量控制采用每天隨標本測定質控血清的方法，并將結果誤差控制在一定限度之內系統誤差通常表現為質控物測定均值的漂移,是由操作者所使用的試劑、儀器設備、標準品或校準物出現的問題而造成的,這種誤差可以通過質量控制的措施和方法加以控制,是可以排除的。隨機誤差

則表現測定SD的增大,主要是因為實驗操作人員的操作等隨機因素所致,其出現難以完全避免和控制。單波長與雙波長

單波長如：405nm、450nm、490nm、630nm等要設空白對照孔，所有孔要減空白對照值

雙波長如：主波長450nm，參考波長630nm等可不用設空白對照孔OD值與S/CO值

OD值:酶標儀比色的吸光度S/CO值:標本OD值/判斷值（CUT-OFF）

統計數據時要選用S/CO

臨界值（CUT-OFF）

是ELISA方法檢測的陰陽性結果的判斷值。不同項目的試劑盒CUT-OF值不同,常見有以下幾種方式:試劑盒直接提供的常數如HCV-IgGCO=1.5與陰性對照相關的計算值如HBsAgCO=2.1N與陰陽性對照相關的計算值如HBcAbCO=1/2(N+P)“灰區”（可疑結果的含義）

把定量分析的正常值范圍引入定性分析建立灰區概念，即將CO值上下的一段區域定為陽性可疑，需重復實驗或換試劑重測以確定其陰陽性，如仍落在灰區范圍內則報告“+”（陽性）定性酶免疫測定的CUT-OFF值ELISA檢測的“鉤狀”效應“HOOKEFFECT”一步法和二步法均存在，只是前者出現的更早些，大多數是高值低吸光度，很少陰性結果。

質量控制血清質控血清是已知靶值的血清，在每次的常規檢驗中加入一份或數份，通過所得結果來了解本次檢驗的情況。質控血清檢驗的結果如能控制其誤差在一定范圍內，就說明該檢驗沒有發生不允許的誤差。如果出現超過允許誤差范圍的異常結果，提示該檢驗不合格，應尋找原因，糾正后，重檢待測標本。因此質控血清在質控工作中起重要作用。

臨界值質控血清

質量控制血清分定值和未定值兩種。如只用一份質控血清定值，一般定在正常值與異常值交界點上，定性測定時處于弱陽性水平，稱為臨界值。乙肝標志物臨界值的制定，應按臨床需求，為臨床提供統一的判斷弱陽性的標準。臨界值質控血清可以作為試劑盒中的陽性對照品和陰性對照品以外的第三個對照品，它可以靈敏地反映出試劑盒的檢出水平，確保弱陽性反應的標本不漏檢。

質控品（臨界血清）通常選用的濃度衛生部臨檢中心提供：HBsAg1IU/mlHBsAb10mIU/mlHBeAg2NCU/mlHBeAb4NCU/mlHBcAb2NCU/mlHCV-IgG2NCU/mlHIV-Ab2NCU/mlTP2NCU/ml質量控制的形式按其進行范圍和評價目的：室間質量評價室內質量控制室間質量評價的目的是相互校正各參與實驗室測定結果的準確性，要求保持在臨床所能接受的誤差范圍內，從而使參加活動的實驗室之間結果具有可比性，因此室間質量評價著重考察檢驗操作的整體狀態，由于室間質量評價活動是借助外部力量來進行回顧性檢查，而不能控制實驗室每天所發生的報告質量，故絕不能代替室內質量控制。相反只有首先搞好室內質量控制，保證檢驗結果達到一定的精密度，才能得到較好的室間質量評價成績，才談得上室間結果的可比性。當室間質量評價某一項目出現明顯差異時，又要從室內質量控制中尋找原因，重新制訂改進計劃。

室間質量評價的目的

室內質量控制的目的

實驗室為了監測和評價本室工作質量，決定常規檢驗報告能否發出所采取的一系列檢查、控制手段，旨在檢測和控制本室常規工作的精密度，并檢測其準確度的改變，提高本室常規工作中批間和日間標本檢測的一致性。

室內質量控制的質量保證提昌全程保證或全方位保證，主要因素：人質量體系

實驗前的質量保證實驗中的質量保實驗后的質量保證人是質量保證的關鍵素質：

熱愛醫學檢驗專業具有廣泛的臨床醫學知識和檢驗基礎知識具有高度的責任心具有閑熟的檢驗操作技能具有嚴謹的工作作風和實事求是的工作態度設立質量監督管理員：督促、檢查、落實各項質量要求

質量管理體系建立各種管理文件（操作規程）包括:分析前、中、后各個環節

相關表格的建立、填寫及歸檔

建立各項標準化操作程序（SOP）

包括:儀器設備檢驗項目等

室內質量控制的基本內容包括分析前的質控分析中的質控分析后的質控

病人準備量具與測量計算結果標本采集試劑質量標準曲線標本轉移儀器狀態質控圖繪制標本處理反應條件結果統計分析標本儲存比色測定

免疫室內質控各種表格的填寫

冰箱、水浴箱溫度記錄表儀器設備故障維修記錄本各種儀器設備使用記錄本各種儀器設備校準記錄本各種儀器設備保養記錄本環境溫度、濕度記錄表各種原始操作記錄表

尤瑞納斯、I2000操作記錄表雜項操作記錄表自身抗體操作記錄表TORCH操作記錄表ASA、ACA操作記錄表體檢項目操作記錄表HIV-Ab標本檢測登記表HIV-Ab原始記錄、

原始結果記錄

試劑、質控物批次更換記錄免疫室內質控失控結果記錄尤瑞納斯室內質控即時審核記表即刻法—室內質控原始數據記錄（計算）表HCV-Ab陽性報告記錄表HIV-A結果登記表室內質控圖月分析總結室間質評回報結果分析總結免疫質控方法

Levey-Jennings法(回顧性)

“即刻審核”分析“L-J”質控方法

免疫質控目前沒有統一的方法,最合適的質控方法尚待研究建立中。目前由各實驗室根據各自的情況制定,但必須要滿足臨床的需要，本實驗室引用“L-J”質控方法，其內容基本上與臨床化學測定的質控方法相同,但失控的判斷標準不同。

本室ELISA失控的判斷標準暫定：1.標本OD值≥CO值為陽性的，S/CO值＜1為失控；標本OD值＜CO值為陽性的，S/CO值＞1為失控；

2.S/CO值≥±3S為失控。免疫質控的特點

影響ELISA檢測的因素很多。檢測時，陰陽性對照物、質控物和標本同時同板進行檢測。檢測完成后要對空白孔、陰陽對照孔、質控物進行即刻審核，判定是否在控，該板結果可否發出。即時審核規則UranusAE200（所有項目數據自動換算自動傳輸）:設空白1孔，陰、陽性對照各2孔,室內質控1孔（乙肝兩對半、HIV-Ab、HCV-Ab、TP、CEA、AFP、EB、肝吸蟲抗體）

乙肝兩對半（上海科華）在控的情況下，陽性結果必須符合特有的模式方可發出報告；對少見或不可能出現的模式必須復查。重點注意HBsAg，復查的方法有:金標、兩步法、時間分辨、PCR、中和試驗等。（HBsAgHBsAbHBeAg）

CUT-OFF值=2.1N(N-陰性對照,OD值不到0.05按0.05算)。通常CO值為0.105。結果判斷陽性：≥CUT-OFF值；陰性：＜

CUT-OFF值（HBeAbHBcAb）CUT-OFF值=1/2（N+P）（N-陰性對照,P-陽性對照)。通常CO值為1.5-1.7。結果判斷陽性：＜CUT-OFF值；陰性：≥

CUT-OFF值x-x-x-HIV-Ab（北京金豪）

篩查陽性按條例規定用另一種方法和本法復查，3次2陽送確認，發“HIV-Ab待復查”報告，3次2陰發“陰性”報告。CUT-OFF值