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DDDDDDDD1DDDDDDDDD(ODD2D,D20D)1,基因:能夠表達(dá)和產(chǎn)生蛋白質(zhì)和RNA的DNA序列,是決定遺傳性狀的功能單位.2,操縱子:是指數(shù)個(gè)功能上相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起,構(gòu)成信息區(qū),連同其上游的調(diào)控區(qū)(包括啟動(dòng)子和操縱基因以及下游的轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)所構(gòu)成的基因表達(dá)單慟轉(zhuǎn)錄的RNA為多順反子.3,順式作用元件:是指那些與結(jié)構(gòu)基因表達(dá)調(diào)控相關(guān),能夠被基因調(diào)控蛋白特異性識(shí)別和結(jié)合的特異DNA序列.包括啟動(dòng)子,上游啟動(dòng)子元件,增強(qiáng)子,加尾信號(hào)和一些反應(yīng)元件等.4,啟動(dòng)子:是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列..SD序列:轉(zhuǎn)錄出的mRNA要進(jìn)入核糖體上進(jìn)行翻譯,需要一段富含喋吟的核昔酸序列與大腸桿菌16srRNA3,末端富含喀咤的序列互補(bǔ),是核糖體的識(shí)別位點(diǎn)..PCR:模擬體內(nèi)DNA復(fù)制原理,在體外用一對(duì)外側(cè)引物擴(kuò)增含目的基因的特定片段,DNA芯片:DNA芯片技術(shù)是指在固相支持物上原位合成寡核昔酸或者直接將大量的DNA探針以顯微打印的方式有序地固化于支持物表面,然后與標(biāo)記的樣品雜交,通過對(duì)雜交信號(hào)的檢測分析,即可獲得樣品的遺傳信息.由于常用計(jì)算機(jī)硅芯片作為固相支持物,所以稱為DNA芯片..癌基因:是細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)胞生長的基因,具有潛在的誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的特性.當(dāng)癌基因結(jié)構(gòu)或表達(dá)發(fā)生異常時(shí),其產(chǎn)物可使細(xì)胞無限制增殖,導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生.包括病毒癌基因和細(xì)胞癌基因.對(duì)人體的狀態(tài)和疾病作出診斷的方法和過程.反義RNA和反義核酸技術(shù):堿基序列正好與有意義的mRNA互補(bǔ)的RNA稱為反義RNA.可以作為一種調(diào)控特定基因表達(dá)的手段;反義核酸技術(shù)是通過合成一種短鏈且與DNA或RNA互補(bǔ)的,以DNA或RNA為目標(biāo)抑制翻譯的反義分子,干擾目的基因的轉(zhuǎn)錄,剪接,轉(zhuǎn)運(yùn),翻譯等過程的技術(shù)..核酶:是一種可以催化RNA切割和RNA剪接反應(yīng)的由RNA組成的酶,可以作為基因表達(dá)和病毒復(fù)制的抑制劑.DDODD(DD1D,D15D).真核生物啟動(dòng)子中的元件通常可以分為兩種:(核心啟動(dòng)子元件)和(上游啟動(dòng)子元件)。半乳糖對(duì)細(xì)菌有雙重作用;一方面(可以作為碳源供細(xì)胞生長);另一方面(它又是細(xì)胞壁的成分)。所以需要一個(gè)不依賴于 的啟動(dòng)子進(jìn)行本底水平的永久型合成;同時(shí)需要一個(gè)依賴于它的啟動(dòng)子對(duì)高水平合成進(jìn)行調(diào)節(jié)。.重組技術(shù)也稱為(基因克隆)。最終目的是(把一個(gè)生物體中的遺傳信息轉(zhuǎn)入另一個(gè)生物體)。典型的 重組實(shí)驗(yàn)通常包含以下幾個(gè)步驟:①提取供體生物的目的基因,酶接連接到另一分子上(克隆載體),形一個(gè)新的重組分子。②將這個(gè)重組 分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞中復(fù)制保存,這個(gè)過程稱為轉(zhuǎn)化。③對(duì)那些吸收了重組 的受體細(xì)胞進(jìn)行(篩選和鑒定)。④對(duì)含有重組 的細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng),檢測外援基因是否表達(dá)。4.大腸桿菌乳糖操縱子含Z,Y,A三個(gè)結(jié)構(gòu)基因,分別編碼(半乳糖昔酶),(透過酶)和半乳糖昔乙酰轉(zhuǎn)移酶,沒有乳糖存在時(shí),1基因編碼的(阻遏蛋白)結(jié)合于操縱序列0處,乳糖操縱子處于阻遏狀態(tài),不能合成分解乳糖的三種酶;有乳糖存在時(shí),乳糖作為誘導(dǎo)物誘導(dǎo)阻遏蛋白變構(gòu),不能結(jié)合于操縱序列,乳糖操縱子被誘導(dǎo)開放合成分解乳糖的三種酶.所以,乳糖操縱子的這種調(diào)控機(jī)制為(可誘導(dǎo)的負(fù)調(diào)控);另外,在啟動(dòng)子上游有CAP結(jié)合位點(diǎn),當(dāng)大腸桿菌從以葡萄糖為碳源的環(huán)境轉(zhuǎn)變?yōu)橐匀樘菫樘荚吹沫h(huán)境時(shí),cAMP濃度(升高),與CAP結(jié)合,使CAP發(fā)生變構(gòu),CAP結(jié)合于乳糖操縱子啟動(dòng)序列附近的CAP結(jié)合位點(diǎn),激活(RNA聚合)酶活性,促進(jìn)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄.5、DNA引發(fā)酶分子與DNA解旋酶直接結(jié)合形成一個(gè)(引發(fā)體)單位,它可在復(fù)制叉上沿后隨鏈下移,隨著后隨鏈的延伸合成RNA引物。6、復(fù)制叉上DNA雙螺旋的解旋作用由(DNA解旋酶),催化的,它利用來源于ATP水解產(chǎn)生的能量沿DNA鏈單向移動(dòng)。7、如果DNA聚合酶出現(xiàn)錯(cuò)誤,會(huì)產(chǎn)生一對(duì)錯(cuò)配堿基,這種錯(cuò)誤可以被一個(gè)通過甲基化作用來區(qū)別新鏈和舊鏈的特別(錯(cuò)配校正)系統(tǒng)進(jìn)行校正。8、多數(shù)類型的RNA是由加工前體分子產(chǎn)生的,真核生物前體tRNA的加工包括()的切除和()的拼接。隨著端部序列的切除,3,端加上了序列()。內(nèi)含子;外顯子;CCA三'不定項(xiàng)選擇題每題分共分TOC\o"1-5"\h\z1、在真核生物細(xì)胞中,翻譯的哪一個(gè)階段需要GTP? ( )(a)力口RNA的5,末端區(qū)的二級(jí)結(jié)構(gòu)解旋(b)起始tRNA同核糖體的結(jié)合(c)在延伸的過程中,tRNA同核糖體的結(jié)合(d)核糖體的解體(e)5,帽子結(jié)構(gòu)的識(shí)別2、下列關(guān)于原核生物轉(zhuǎn)錄的敘述中哪一項(xiàng)(那一些)是正確的?( )(a)核糖體的小亞基能直接同mRNA作用(b)IF-2與含GDP的復(fù)合物中的起始tRNA結(jié)合(c)細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成不需要ATP(d)細(xì)菌所有蛋白質(zhì)的第一個(gè)氨基酸是修飾過的甲硫氨酸(e)多肽鏈的第一個(gè)肽鍵的合成不需要EF-G3、下面關(guān)于真核生物翻譯的敘述中,哪一個(gè)(一些)是正確的?( )(a)起始因子elF只有同GTP形成復(fù)合物才起作用(b)終止密碼子與細(xì)菌的不同(c)白喉毒素使EF-1ADP核糖酰化(d)真核生物蛋白質(zhì)的第一個(gè)氨基酸是修飾過的甲硫氨酸,在蛋白質(zhì)合成完成之后,它馬上被切除,(e)真核生物的核糖體含有兩個(gè)tRNA分子的結(jié)合位點(diǎn)TOC\o"1-5"\h\z4、下列敘述不正確的是: ( )(a)共有20個(gè)不同的密碼于代表遺傳密碼(b)色氨酸和甲硫氨酸都只有一個(gè)密碼子(c)每個(gè)核昔酸三聯(lián)體編碼一個(gè)氨基酸(d)不同的密碼子可能編碼同一個(gè)氨基酸(e)密碼子的第三位具有可變性5、核糖體的E位點(diǎn)是: ( )(a)真核mRNA加工位點(diǎn)(b)tRNA離開原核生物核糖體的位點(diǎn)(c)核糖體中受EcoRI限制的位點(diǎn)(d)電化學(xué)電勢驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)的位點(diǎn)6、下列關(guān)于核糖體肽酰轉(zhuǎn)移酶活性的敘述正確的是: ( )(a)肽酰轉(zhuǎn)移酶的活性存在于核糖體大亞基中;(50s或60S)(b)它幫助將肽鏈的C末端從肽酰tRNA轉(zhuǎn)到A位點(diǎn)上氨酰tRNA的,N末端(c)通過氨酰tRNA的脫乙酰作用,。幫助氨酰照舊A的N末端從A位點(diǎn)移至P位點(diǎn)中肽酰tRNA的C末端(d)它水解GTP以促進(jìn)核糖體的轉(zhuǎn)位(e)它將肽酰tRNA去酰基7、哪些有關(guān)剪接位點(diǎn)的敘述是正確的? ( )(a)剪接位點(diǎn)含有長的保守序列(b)5,與3,剪接位點(diǎn)是互補(bǔ)的(c)幾乎所有的剪接位點(diǎn)都遵從GT—AG規(guī)律(d)剪接位點(diǎn)被保留在成熟的mRNA中(e)內(nèi)含子3,與5,剪接位點(diǎn)間的距離可以很大①一個(gè)內(nèi)含子的5'剪接位點(diǎn)只能與同一個(gè)內(nèi)含子的3,剪接位點(diǎn)作用,雜合內(nèi)含子不能被剪接TOC\o"1-5"\h\z8、分支位點(diǎn)核昔酸 ( )(a)總是A(b)的位置在內(nèi)含子內(nèi)是隨機(jī)的(c)位于一個(gè)非嚴(yán)格保守的序列內(nèi)(d)通過與3,剪接位點(diǎn)作用起始剪接的第一步(e)在剪接的結(jié)于步完成后與內(nèi)含子中另外三個(gè)核昔酸共價(jià)連接9、轉(zhuǎn)酯反應(yīng): ( )(a)不需要ATP(b)拆開一個(gè)化學(xué)鍵后又形成另一個(gè)化學(xué)鍵(c)涉及對(duì)糖磷骨架0H基團(tuán)的親核攻擊(d)以上都正確10、選出所有有關(guān)snRNA的正確敘述: ( )(a)snRNA只位于細(xì)胞核中(b)大多數(shù)snRNA是高豐度的(c)snRNA在進(jìn)化的過程中是高度保守的(d)某些snRNA可以與內(nèi)含子中的保守序列進(jìn)行堿基配對(duì)(e)以上都正確11、細(xì)胞器DNA能夠編碼下列哪幾種基因產(chǎn)物? ( )(a)mRNA(b)大亞基rRNA(C)小亞基rRNA(d)tRNA(e)4.5SrRNA(f)5SrRNA、II型剪接與前體mRNA剪接的相似之處是 ( )(a)兩種內(nèi)含子具有相似的剪接位點(diǎn):(b)它們都通過向樣的機(jī)制進(jìn)行剪接,其中涉及套索中間體(c)都由肋A催化進(jìn)行(d)都需要UlsnRNP(e)都可以在沒有蛋白的情況下進(jìn)行①兩種內(nèi)含子都形成精細(xì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)13、tRNA中的內(nèi)含子 ( )(a)通過兩步轉(zhuǎn)酯反應(yīng)被切除(b)具有與反密碼子互補(bǔ)的序列(c)都形成相似的二級(jí)結(jié)構(gòu)(d)由蛋白酶(核酸內(nèi)切酶和連接酶)切除(e)在5f和3P剪接位點(diǎn)的序列是保守的14、在前體mRNA上加多聚腺昔酸尾巴 ( )(a)涉及兩步轉(zhuǎn)酯機(jī)制(b)需要保守的AAUAAA序列(c)在AAUAAA序列被轉(zhuǎn)錄后馬上開始(d)通過一個(gè)多組分復(fù)合物的逐步組裝進(jìn)行(e)由依賴于模板的RNA聚合酶催化15、可變剪接能增加轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,這些轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物問的區(qū)別在于( )(a)mRNA的5,非轉(zhuǎn)錄區(qū)(b)mRNA的編碼區(qū)(c)mRNA的3,非轉(zhuǎn)錄區(qū)(d)上述全是(e)上述全不是1、(b,c)2、(a,d,e)3、(a,e)4、(a)5、(b)6、(a,b,e)7、(c,e)8、(a,c,e)9、(d)10>(e)11、(a,b,C,d,e,f) 、(a,b,c)13、(b,c,d)14、(b,d)15、(d)四'判斷正誤(每題1分,共10分高等真核生物的大部分DNA是不編碼蛋白質(zhì)的.假基因通常與它們相似的基因位于相同的染色體上。在有絲分裂中,端粒對(duì)于染色體的正確分離是必要的。在核酸雙螺旋(如DNA)中形成發(fā)夾環(huán)結(jié)構(gòu)的頻率比單鏈分子低。發(fā)夾結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生需要回文序列使雙鏈形成對(duì)稱的發(fā)夾,呈十字結(jié)構(gòu)。大多數(shù)看家基因編碼低豐度的mRNA。所有真核生物的基因都是通過對(duì)轉(zhuǎn)錄起始的控制進(jìn)行調(diào)控的。只有活性染色質(zhì)轉(zhuǎn)錄的基因?qū)Nasel敏感。如果DNA沿合成,那它則需以5,三磷酸或3,脫氧核昔三磷酸為末端的鏈作為前體。大腸桿菌DNA聚合酶缺失校正外切核酶活性時(shí)會(huì)降低DNA的合成速率但不影響它的可靠性。真核細(xì)胞中的RNA聚合酶僅在細(xì)胞核中有活性。VXXVV XXVXX五'簡答題(從下列5道題中選作4道,先將不選的題目劃掉,每題5分,共20分)1、簡述原核基因組的特點(diǎn):①為一條環(huán)狀雙鏈DNA;②只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn);③具有操縱子結(jié)構(gòu);④絕大部分為單拷此⑤可表達(dá)基因約50%,大于真核生物小于病毒;⑥基因一般是連續(xù)的,無內(nèi)含子;⑦重復(fù)序列很少.2、簡述SANGER雙脫氧鏈終止法的原理答:DNA鏈中核昔酸以3',5'-磷酸二酯鍵連接,合成DNA所用的底物是2:脫氧核昔三磷酸.2',31ddNTP與普通dNTP不同,它們?cè)诿撗鹾颂堑?彳立置缺少一個(gè)羥基.在DNA聚合酶作用下通過三磷酸基團(tuán)摻入到延伸的DNA鏈中,但由于沒有3,羥基,不能同后續(xù)的dNTP形成磷酸二酯鍵,因此,正在延伸的DNA鏈不能繼續(xù)延伸.在DNA合成反應(yīng)混合物的4種普通dNTP中加入少量的一種ddNTP,鏈延伸將與偶然發(fā)生但卻十分特異的鏈終止競爭,產(chǎn)物是一系列的核昔酸鏈,其長度取決于引物末端到出現(xiàn)過早鏈終止位置間的距離.在4組獨(dú)立酶反應(yīng)中分別采用4種不同的ddNTP,結(jié)果將產(chǎn)生4組寡核昔酸,它們將分別終止于模板鏈的A,C,G或T位置.3、核酸分子雜交的原理答:具有互補(bǔ)序列的兩條單鏈核酸分子在一定的條件下(適宜的溫度及離子強(qiáng)度等)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合,重新形成雙鏈;在這一過程中,核酸分子經(jīng)歷了變性和復(fù)性的變化,以及在復(fù)性過程中個(gè)分子間鍵的形成和斷裂雜交的雙方是待測核酸和已知序列4、PCR的基本原理和過程答PCR是在試管中進(jìn)行的DNA復(fù)制反應(yīng),基本原理是依據(jù)細(xì)胞內(nèi)DNA半保留復(fù)制的機(jī)理,以及體外DNA分子于不同溫度下雙鏈和單鏈可以互相轉(zhuǎn)變的性質(zhì),人為地控制體外合成系統(tǒng)的溫度,以促使雙鏈DNA變成單鏈,單鏈DNA與人工合成的引物退火,然后耐熱DNA聚合酶以dNTP為原料使引物沿著單鏈模板延伸為雙鏈DNA.PCR全過程每一步的轉(zhuǎn)換是通過溫度的改變來控制的.需要重復(fù)進(jìn)行DNA模板解鏈,引物與模板DNA結(jié)合,DNA聚合酶催化新生DNA的合成,即高溫變性,低溫退火,中溫延伸3個(gè)步驟構(gòu)成PCR反應(yīng)的一個(gè)循環(huán),此循環(huán)的反復(fù)進(jìn)行,就可使目的DNA得以迅速
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