護(hù)骨素基因多態(tài)性與老年男性骨質(zhì)疏松癥的關(guān)系護(hù)骨素基因多態(tài)性與老年男性骨質(zhì)疏松癥的關(guān)系1摘要目的探討護(hù)骨素(OPG)基因啟動(dòng)子區(qū)T950C單核苷酸多態(tài)性與老年男性骨質(zhì)疏松癥發(fā)生的關(guān)系。方法選擇98例老年男性骨質(zhì)疏松癥患者和101例正常老年男性,利用聚合酶鏈反應(yīng)—限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析技術(shù)檢測(cè)OPGT950C多態(tài)位點(diǎn)的基因型,分析比較兩組之間OPGT950C位點(diǎn)基因型頻率的差異。結(jié)果OPGT950C基因型頻率分布符合Hardy-Weinberg平衡,OPGT950C位點(diǎn)CC基因型頻率在老年男性骨質(zhì)疏松癥患者和正常老年男性之間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。結(jié)論OPG基因啟動(dòng)子區(qū)T950C位點(diǎn)多態(tài)性與老年男性骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生有關(guān),OPGC950C基因型可能是老年男性發(fā)生骨質(zhì)疏松的遺傳易感性指標(biāo)。摘要目的探討護(hù)骨素(OPG)基因啟動(dòng)子區(qū)T950C單核苷酸2關(guān)鍵詞骨質(zhì)疏松基因多態(tài)性護(hù)骨素老年人關(guān)鍵詞骨質(zhì)疏松32007年10月~2009年3月,我們以中國(guó)漢族老年男性為研究對(duì)象,探討了護(hù)骨素(OPG)基因啟動(dòng)子區(qū)域單核苷酸多態(tài)性與骨質(zhì)疏松癥發(fā)生的關(guān)系。2007年10月~2009年3月,我們以中國(guó)漢族老年男性為研41.資料與方法1.1臨床資料選擇我院確診的老年男性骨質(zhì)疏松癥患者98例(觀察組),年齡61~78(70.9±8.2)歲;骨質(zhì)疏松癥診斷參照中國(guó)老年學(xué)會(huì)骨質(zhì)疏松委員會(huì)制定的標(biāo)準(zhǔn),即同部位骨密度值低于本地區(qū)峰值減低兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差定為骨質(zhì)疏松癥。同期選取健康老年男性101例(對(duì)照組),年齡62~77(71.0±7.5)歲。1.資料與方法1.1臨床資料選擇我院確診的老年男性骨質(zhì)疏5入選對(duì)象排除糖尿病、原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)以及甲狀腺功能亢進(jìn)、皮質(zhì)醇增多癥、肝腎功能不良、嗜酒、營(yíng)養(yǎng)不良、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等影響骨代謝的疾病;半年內(nèi)未應(yīng)用雄激素、降鈣素、大量鈣劑、二膦酸鹽及其他影響骨代謝的藥物。兩組年齡、身高、體質(zhì)量以及飲食、日常運(yùn)動(dòng)等方面具有可比性。入選對(duì)象排除糖尿病、原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)以及甲狀腺功能亢進(jìn)61.2方法收集外周靜脈血2m,l分離白細(xì)胞、裂解,按常規(guī)酚/氯仿法抽提細(xì)胞DNA,置-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩＠肞CR-RELP法檢測(cè)OPG基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)性,OPG啟動(dòng)子區(qū)擴(kuò)增引物序列,上游引物5′-GTTCCTCAGCCCGGTGGCTTTT-3′,下游引物5′-TGTGGTCCCCGGAACCTCAGG-3′(由上海生物工程公司合成)。PCR反應(yīng)條件和步驟參考相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行。擴(kuò)增產(chǎn)物以限制性內(nèi)切酶HinCⅡ進(jìn)行酶切,然后利用2.5%瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳,紫外燈下觀察判斷基因型。1.2方法收集外周靜脈血2m,l分離白細(xì)胞、裂解,按71.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS10.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。組間基因型頻率比較采用卡方檢驗(yàn),同時(shí)分析判斷基因頻率分布是否符合Hardy-Weinberg平衡。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS10.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析82.結(jié)果兩組OPGT950C基因型頻率分布均符合Har-dy-Weinberg平衡。觀察組與對(duì)照組CC基因頻率分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),而TC和TT基因型頻率分布無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。提示OPGC950C基因型可能與老年男性骨質(zhì)疏松的發(fā)生有關(guān)。見表1。2.結(jié)果兩組OPGT950C基因型頻率分布均符合Har-d9護(hù)骨素基因多態(tài)性與老年男性骨質(zhì)疏松癥的關(guān)系課件103.討論多數(shù)研究認(rèn)為,骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生與遺傳因素密切相關(guān)。人群骨密度峰值主要由遺傳因素決定,而且遺傳因素還能影響峰值形成之后骨量丟失的速度。基因多態(tài)性和骨質(zhì)疏松的關(guān)系是近年國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn),但是來自不同人群和不同地區(qū)的研究結(jié)論存在很大差異。3.討論多數(shù)研究認(rèn)為,骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生與遺傳因素密切相關(guān)。人11Langdahl等分析了268例老年性骨質(zhì)疏松患者和327例正常人OPGT950C基因型,發(fā)現(xiàn)C950C基因型與老年性骨質(zhì)疏松骨折的風(fēng)險(xiǎn)有關(guān),但與腰椎及股骨的骨密度無關(guān)。本研究以老年男性為觀察對(duì)象,分析98例骨質(zhì)疏松癥患者和101例正常人OPGT950C基因型頻率差異,發(fā)現(xiàn)CC型與骨質(zhì)疏松癥發(fā)生密切相關(guān),而TT和TC與骨質(zhì)疏松癥發(fā)生無明顯關(guān)系,與上述研究基本一致。Langdahl等分析了268例老年性骨質(zhì)疏松患者和327例12但是,Arko等對(duì)自然絕經(jīng)后高加索婦女進(jìn)行研究,沒有發(fā)現(xiàn)T950C多態(tài)性與腰椎和股骨頸骨密度的相關(guān)性。國(guó)內(nèi)研究也沒有發(fā)現(xiàn)絕經(jīng)后婦女OPGT950C多態(tài)性與骨質(zhì)疏松癥的關(guān)系。