去甲長春花堿抗腫瘤的研究進展

長春堿（va）是雅豆科植物從長春花中分離出來的一種抗癌活性物質。在20世紀70年代，有幾種主要藥物，如長春新堿（rcr）、長春花堿（vlb）、近年來的長春花堿性酰胺（vd）和長春花堿（nvb）被廣泛使用。本文就此類藥物近幾年的文獻進行了復習。一、vanvb誘導的微管解聚作用長春堿類藥物的結構相似,由碳-碳橋連結的二個復雜的多環系統構成。多年的研究表明這類藥物的細胞毒性通過與微管蛋白的結合來實現,它們在微管蛋白二聚體上有共同的結合位點。由于藥物與微管蛋白二聚體的結合抑制微管聚合,使分裂的細胞不能形成紡錘體而使分裂停止于中期。Lobert等應用了3種不同的模型再次證實了這一點,幾種VA的衍生物中與微管蛋白結合力的大小為VCR>VDS>NVB,與臨床上VCR的劑量最低而NVB最高是一致的。為了進一步驗證此結果,他們還觀察了VA誘導產生聚合體的松解時間,VCR最長而NVB最短,前者的時間比VDS或NVB誘導聚合體的松解時間長20倍以上。新的VA類藥物NVB雖然也可通過粘合于微管、抑制微管聚合而產生抗腫瘤活性,但NVB的這種作用遠遜于VCR和VLB,VCR幾乎可使所有微管解聚,而只有高濃度(40μmol/L)的NVB方可誘導大量微管蛋白解聚。從Binet等的研究中可以確定有絲分裂的抗微管活性與抗腫瘤活性有關,而軸突的抗微管活性又與神經毒性有關。與VCR和VLB比較,NVB在遠低于使軸突解聚所需的濃度下即可導致有絲分裂微管的完全解聚,使其具有更大的治療指數,同時也證明NVB的劑量限制性毒性是骨髓抑制而非神經毒性。近年的體外研究證實,長春堿類藥物10-8mol/L濃度時可明顯抑制大鼠MTX乳腺癌細胞系和T24(HTB4)細胞系的增殖,Mary等在Hela細胞系中的研究也證實了這一點。長春堿對細胞增殖的抑制作用是通過改變有絲分裂紡錘體兩端微管蛋白的加入和丟失動力學實現的,而并非使微管解聚。每一種長春堿的衍生物對Hela細胞增殖抑制的濃度與其導致50%的細胞聚集在中期的濃度基本一致,抑制細胞增殖并將細胞阻斷在中期的作用均在VA的最低有效濃度時出現,同時無或少見微管的解聚或紡錘體的重組。臨床上,VA各種藥物的抗腫瘤活性和毒性是不相同的,且其抗腫瘤活性與其抑制微管聚集的能力并不是正相關,因而或許存在其它新的機制。VA各衍生物的抗增殖活性各不相同,可能與其不同的抗腫瘤活性相關。二、持續靜脈滴注藥物的安全性靜脈注射VA的藥代動力學通常為開放的三室模型(表1),其特點為:①表觀分布容積大;②全身清除率高;③終末相T1/2長;④分子內、個體內及個體間的差異大。VCR、VLB、VDS、NVB代謝的初始相和中間相的T1/2基本相似,但終末相T1/2有顯著差異(分別為85小時、24小時、24小時、40小時)。VCR的T1/2最長、全身清除慢也可解釋其最大耐受劑量低于其它幾種藥物的現象。持續靜脈滴注的方法是基于VA是細胞周期特異性藥物、治療窗口窄的特點設計的。靜脈注射雖然初始濃度高,但此高濃度僅能維持數秒且帶來很大的毒性。持續靜脈滴注既可避免高濃度帶來的毒性又可延長有效濃度藥物在血中的停留時間。研究顯示,血液系統腫瘤、乳腺癌或頭頸部腫瘤在靜脈注射VDS或VLB治療失敗后再持續靜脈滴注該藥仍可有較高的緩解率,持續靜脈滴注后VCR、VDS、VLB的清除率下降。由于NVB的分布容積大,與微管的作用強,人們推測持續低濃度的NVB可能會提高療效。口服NVB膠囊的生物利用度為24%,且不受食物的影響。當每周重復使用50～180mg后,服藥1～2小時內即可達到的峰濃度為0.07～0.8mg/L。口服后的藥代學特性與靜脈注射的相似。三、治療乳腺癌的nvb盡管VA的化學結構非常相似,但抗瘤譜、劑量限制性毒性(VCR為神經毒性,NVB為骨髓毒性)和最大耐受劑量(NVB的最大耐受劑量明顯高于其它各藥)相差很大。VCR、VLB及VDS已應用多年,其特性已為人們所熟悉。NVB是近幾年開始應用的一個新的VA類藥物,體外研究發現其對L1210白血病、P388白血病、B16黑色素瘤均有明顯的抗腫瘤活性。其它研究發現NVB與多種藥物如DDP、VP16、MMC等聯合應用療效增強而毒性不變。由于NVB獨特的抗腫瘤作用,FDA已于1994年12月批準將單制劑的NVB與DDP聯合應用作為不可切除的晚期非小細胞肺癌(NSCLC)患者的一線治療藥物,這是20年中第一種被推薦用于NSCLC治療的新藥。關于這方面的研究在國內外已有很多,本文著重探討NVB的一些新動向。近年對NVB與紫杉醇的聯合應用引起人們的極大興趣。NVB的作用是抑制微管聚合,而紫杉醇的作用則為促進其聚合,抑制解聚。Hin等在體外研究了NVB與docetaxel合用對于PC-9人肺腺癌細胞系及B16黑色素瘤細胞系的作用,結果顯示,先用VA者二藥顯示協同作用,順序相反則顯示拮抗作用。進一步的研究證明先用的VA細胞毒作用并不被后用的docetaxel作用所削弱。Louboutin等接著進行的NVB與docetaxel治療28例晚期乳腺癌的I期臨床研究發現最常見的不良反應是深鍵反射的減弱,占89%(25/28);另外39%(11/28)的患者出現輕度可逆的感覺異常,但發熱性的中性白細胞下降則是劑量限制性毒性。推薦用于Ⅱ期臨床研究的劑量為NVB20mg/m2第1、5天,docetaxel85mg/m2第1天。Weiseberg等進行的NVB與Paclitaxel聯合用藥治療轉移性乳腺癌的I期臨床研究發現主要的劑量限制性毒性為中性白細胞下降,合用G-CSF后可進一步增大劑量。其它不良反應還有肌痛、疲乏等,均較輕且可逆。可評價的10例中2例完全緩解,1例部分緩解。復發轉移的小細胞肺癌(SCLC)的治療一直是困擾人們的一個重要問題,Furuse等在這方面進行了有益的嘗試,24例治療后復發的SCLC接受了NVB25mg/m2重復4次或更多的單藥治療,結果12.5%(3/24)獲部分緩解,且有效的患者均是既往經VA類藥物治療過的,說明NVB對經治復發轉移的SCLC有一定的療效,對既往經VA類藥物治療失敗者仍有較好的療效。Furuse等隨機研究了NVB與VDS對204例ⅢB或Ⅳ期初治NSCLC的療效。結果顯示NVB單藥組的緩解率為31.1%,VDS單藥組的緩解率為8.9%(P=0.0002);前者的中位緩解期為18.5(7.9～107.5)個月,后者的中位緩解期為11.7(6～35)個月。毒性方面,二者引起白細胞下降的作用相當,NVB組的神經毒性略輕。四、新的動態化合物1.對va耐藥人群的藥代動力學研究S12363(vinfosiltine)是在O4-deacetyl-VLB的C23上添加了一個α-磷氨。體外研究顯示其細胞毒性分別為VCR和VLB的72倍和36倍,Alain等進行的臨床前研究發現S12363對鼠的移植腫瘤P388白血病、L1210白血病、B16黑色素瘤、M5076肉瘤及結腸腺癌38均有顯著的抗腫瘤作用,但對Lewis肺癌無效。對人HT-29結腸癌、NCI-H460肺癌、HCI-H125肺癌等移植腫瘤均有明顯抑制作用。在體內研究中對VA耐藥的P388白血病亦有效。I期藥代動力學研究顯示靜脈用藥后成三相分布,終末相半衰期為49±16小時,血漿清除率為每公斤0.14±0.4L/h,穩態分布容積為5.0±2.8L/kg。在體內,其藥代與劑量在0.08～0.84mg/m2范圍內成線性相關,劑量限制性毒性為血液學毒性。Ⅱ期臨床研究在晚期乳腺癌中進行,用法為0.3mg/m2,每周1次或0.6mg/m2每2周1次,結果不論是作為一線治療還是作為二線用藥均無效,神經毒性為主要毒性。2.k-ras-nrk細胞Conophylline是從小葉狗牙花中提取出來的新的VA衍生物。在體外可使K-ras-NRK和K-ras-NIH細胞系出現正常