香草沒藥對p450活性的影響

乳房和止痛藥都具有活血止痛的功效。這兩種藥物通常用作復合劑，臨床應用廣泛。含有30ml片劑和未經處理的中藥。近年研究發現乳香沒藥可引起動物肝損害1材料表面1.1試驗藥物1.2實驗動物和動物Wistar大鼠和昆明種小鼠,SPF級,合格證號SCXK(津)2009-0001,購自天津市山川紅實驗動物科技有限公司。飼養于天津中醫藥大學實驗動物中心,所用飼料為大鼠全價顆粒飼料為天津市華榮實驗動物科技有限公司生產。1.3高效液相色譜法戊巴比妥鈉(國藥集團化學試劑有限公司進口分裝);甲硝唑(中國藥品生物制品檢定所);非那西丁,氯唑沙宗(AlfaAesar);氨苯砜(Fluka);NADPH(Roche);TRIS(ANGUS);甲醇,乙腈(色譜純,天津康科德科技有限公司);KCI,CaClAX205型分析天平(METTLERTOLEDO),JJ2000型精密電子天平(常熟雙杰測試儀器廠),L8-80M型高速離心機(Beckman),N-EVAP111型氮吹儀(Organomation),Waters600E型高效液相(Waters2487紫外檢測器)。2方法2.1苯巴比妥鈉對大鼠睡眠的影響2.1.1連續使用苯巴比妥鈉藥物對大鼠睡眠的影響56只小鼠,雌雄各半,分為對照組和乳香+沒藥3.15,2.10,1.05g·kg2.1.2單次使用對戊二醇鈉誘導小鼠睡眠的影響48只小鼠,雌雄各半,分為對照組和乳香、沒藥、乳香+沒藥(1∶1)混合物組,劑量均為3.15g·kg2.2影響大鼠cyp1a2、cyp2e1和cyp3a4的因素大鼠40只,雌雄各半,分為對照組、乳香組、沒藥組、乳香+沒藥(1∶1)混合組,給藥組均以3.00g·kg2.2.1體外肝微粒體體系肝微粒體懸液、NADPH及混合底物工作液的磷酸緩沖液組成體外肝微粒體體系。取肝微粒體懸液60μL和含非那西丁、氯唑沙宗、氨苯砜均為4mg·L2.2.2回收率和精密度試驗在失活肝微粒體中加入不同濃度底物混合物,按樣品處理方法處理,檢測底物的最低檢測線。在線性范圍內取高、中、低3個濃度底物混合后進行回收率、日內精密度,每個濃度5個樣,每一濃度連續測定3d為日間精密度。色譜條件為AgilentTC-C18(5μm,4.6mm×150mm)色譜柱,流動相為乙腈-水(24∶76)流速1.0mL·min3結果3.1小鼠睡眠的影響因素乳香沒藥混合物連續使用,在不同劑量均可使戊巴比妥鈉誘導的小鼠睡眠只數減少,作用強度與用藥劑量呈負相關(表1)。單次給藥的結果表明,乳香和沒藥均可使小鼠入睡數增加,與對照組無顯著性差異(表2)。3.2影響大鼠cyp1a2、cyp2e1和cyp3a4的因素3.2.1探針藥的標準曲線方程及相關指標非那西丁、氯唑沙宗、氨苯砜和內標甲硝唑分離良好,出峰時間依次為甲硝唑3.168min,氨苯砜8.374min,非那西丁10.722min,氯唑沙宗19.454min,未受干擾。3個探針藥的標準曲線方程及相關指標見表3。非那西丁回收率在95.22%~105.64%,氯唑沙宗在94.43%~106.58%,氨苯砜在98.49%~106.28%。非那西丁日內及日間RSD在2.97%~8.37%,氯唑沙宗在1.51%~10.84%,氨苯砜在2.59%~9.23%。3.2.2非那西丁和氯唑沙宗反應完畢后,乳香組、沒藥組、乳香+沒藥混合組肝微粒體體系中非那西丁和氯唑沙宗的濃度顯著低于對照組,而氨苯砜則無顯著差異。結果表明,無論是乳香、沒藥還是其混合物均可使大鼠CYP1A2,CYP2E1活性增強,而對CYP3A4則無顯著影響。4乳液沒藥對戊巴比妥鈉代謝的影響戊巴比妥鈉代謝的快慢直接受P450活性的影響。小鼠連續ig給予乳香沒藥7d使戊巴比妥鈉誘導的小鼠睡眠只數減少,說明戊巴比妥鈉在體內代謝加快,乳香沒藥連續使用可使P450活性增強,但這個誘導作用卻與乳香沒藥的劑量呈現負相關性,表明乳香沒藥在劑量增大的同時也在抑制戊巴比妥鈉在體內的代謝。乳香沒藥單次給藥使戊巴比妥鈉誘導的小鼠睡眠率升高更加證實了這一點,小鼠睡眠率升高說明戊巴比妥鈉的代謝被乳香沒藥所抑制,而整個實驗距離首次用藥不足2h,乳香沒藥在此時間中對P450表達的影響可以忽略,可能是直接影響酶空間結構而導致其活性降低或者競爭性抑制戊巴比妥鈉代謝。從乳香沒藥用藥7d誘導P450活性增強來看,更可能是競爭性抑制,但這個推測尚需進一步研究證實。根據文獻P450活性的改變對于聯合用藥的有效性和安全性有明顯影響,乳香沒藥連