臨床常用免疫學檢查血清免疫球蛋白檢測血清補體檢測細胞免疫的檢測腫瘤標志物的檢測自身抗體檢測其他免疫檢測盧葵花二0一一1ppt課件臨床常用免疫學檢查血清免疫球蛋白檢測盧葵花二0一一1ppt課概述：

隨著社會進步和醫學科學發展，臨床免疫學檢查在實驗診斷中的比重越來越大，是迄今最特異、最靈敏的檢測方法，已被廣泛用于醫學臨床與實驗研究的各個領域，成為醫學檢驗中的一個重要組成部分。2ppt課件概述：隨著社會進步和醫學科學發展，臨床免疫學概述：

免疫學檢驗的檢測對象是具有免疫活性的物質，抗原和抗體是免疫學檢驗的兩個重要因素，也是免疫學反應的基本條件，利用其不同的反應類型，建立了各種不同的免疫學技術。3ppt課件概述：免疫學檢驗的檢測對象是具有免疫活性的物免疫學技術簡介方法：散射比濁法、免疫電泳法、標記免疫法4ppt課件免疫學技術簡介4ppt課件免疫電泳法是將免疫擴散和電泳相結合的一種免疫學分析法，是免疫學基本技術之一。樣品中的各種蛋白質成分可被分成肉眼不可見的若干區帶。當停止電泳后，在與電泳方向平行的抗體槽中注入抗體，進行擴散反應，當相應的抗原抗體結合后，形成肉眼可見的沉淀弧。常見用于分析許多疾病中出現的異常免疫球蛋白及片段。5ppt課件免疫電泳法是將免疫擴散和電泳相結合的一種免疫學分析法，是免疫標記免疫是免疫技術和標記技術相結合的一門檢測技術。

免疫技術：利用Ag+Ab=Ag－Ab，以Ag或Ab作試劑，檢測對應的Ab或Ag。

標記技術：利用可提供探測信號的標記（如放射性核素、酶、熒光素），標記Ag或Ab，抗原抗體反應后探測標記信號，反映受檢Ag或Ab行為。特點：高度特異性（免疫技術），高度敏感性（標記技術）。6ppt課件標記免疫是免疫技術和標記技術相結合的一門檢測技術。6ppt課標記免疫

按標記不同，標記免疫分析可分為：放射免疫分析（RIA），用放射性核素作標記；酶免疫分析（EIA），用酶作標記；熒光免疫分析（FIA），用熒光物作標記；發光免疫分析（LIA），發光物作標記。7ppt課件標記免疫按標記不同，標記免疫分析可分為：7pp

本章就臨床常用的免疫學檢查,包括血清免疫球蛋白檢測、血清補體檢測、細胞免疫的檢測、腫瘤標志物監測、自身抗體檢測、流式細胞術檢測等作一簡介。8ppt課件本章就臨床常用的免疫學檢查,包括血清免疫球蛋白

免疫球蛋白檢測

(immunoglobulin,Ig)

免疫球蛋白是一組具有抗體活性或抗體樣結構的球蛋白，由漿細胞所合成與分泌，廣泛地存在于機體的血液、體液、外分泌液和B淋巴細胞膜的表面。可分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE五類。9ppt課件免疫球蛋白檢測

(immunoglobulin,Ig)分子量較大的一對肽鏈稱為重鏈（Heavychain，H鏈），不同的重鏈由于氨基酸殘基的排列順序、二硫鍵的數目和位置、含糖的種類及數量不同，其抗原性也不同。根據H鏈抗原性的差異可將其分為5類：μ鏈、γ鏈、α鏈、δ鏈和ε鏈，每個Ig分子的兩條重鏈亦完全相同。L鏈共有兩型，Kappa(κ）與Lambda（λ）。同一個免疫球蛋白單體分子上的L鏈型別完全相同。10ppt課件分子量較大的一對肽鏈稱為重鏈（Heavychain，H鏈）分類百分比參考值IgG70%-80%7.0-16.6g/LIgA10%-15%0.7-3.5g/LIgM5%-10%0.5-2.6g/LIgD0.02%-1%0.6-2.0mg/LIgE0.002%0.1-0.9mg/L正常人群各年齡段個體中血清IgG、IgA、IgM的含量有很大差異11ppt課件分類百分比參考值正常人群各年齡段測定方法

血清中含量較高的

IgG、IgA、IgM多采用單向免疫擴散法、火箭免疫電泳法和免疫比濁法，而標本中含量極微的IgD和IgE則采用敏感度較高的放射免疫法和酶免疫法等進行定量測定。12ppt課件測定方法IgG占總Ig的70%~80%是血清中的主要抗體，主要由脾臟和淋巴結合成，在機體的免疫防御中起重要作用，抗細菌、病毒和寄生蟲等，還具抗毒素作用，為不完全抗體，分子量小（150000），唯一能自由地通過胎盤。半衰期約為23天，故臨床上使用丙球作治療時以2～3周注射一次13ppt課件IgG占總Ig的70%~80%IgA約占血清總Ig10%~15%分為血清型與分泌型兩種，具有抗細菌、抗病毒、抗毒素作用，其中的分泌型（SIgA）在局部與抗呼吸道、消化道和泌尿生殖道感染、炎癥或腫瘤等病變密切相關,是抗過敏的重要免疫屏障。

SIgA唾液平均為0.3g/L,初乳平均為5.06g/L,糞便平均為1.3g/L。14ppt課件IgA約占血清總Ig10%~15%分為血清IgM約占血清總Ig的5%~10%分子量最大（900000），由五個IgM單體連接而成，故又稱巨球蛋白。脾臟是它的主要合成部位，IgM主要分布于血液中，防止發生菌血癥方面起重要作用，半衰期5天左右。

天然同族凝集素抗A抗B、冷凝集素及傷寒沙門菌的抗體均屬此類。15ppt課件IgM約占血清總Ig的5%~10%分子

IgM在個體發育過程中，最先出現的球蛋白，當機體受抗原刺激后，也是最早出現的抗體，在補體和吞噬細胞參與下，其殺菌、溶菌、激活補體和促進吞噬等作用均顯著強于IgG幾百倍。在機體的早期免疫防御中占有重要地位。16ppt課件IgM在個體發育過程中，最先出現的球蛋白，當機體受抗原臨床意義：IgG、IgA、IgM在參與機體的特異性體液免疫反應中擔負了重要的作用,維持人體內的生理性動態平衡,對抗外來病原微生物的侵襲有保護功能,常規檢測了解Ig水平,可作為反映人體體液免疫狀況的指標.

17ppt課件臨床意義：IgG、IgA、IgM在參與機體的特1、IgG是主要的抗感染抗體抗菌性抗體抗毒素性抗體保護性抗體抗病毒性抗體抗自身組織或細胞成分的抗體損傷性抗體18ppt課件1、IgG是主要的抗感染抗體18ppt課件2、IgM是病原體感染或人工免疫后最先出現的抗體,針對變性自身蛋白成份時,對機體有病理性損傷.19ppt課件2、IgM是病原體感染或人工免疫后最先出現的抗體,針對變在臨床上許多疾病都可出現Ig水平的高度異常,這些指標的變化有助于臨床診斷和判斷預后,也可作為考核療效的指標.20ppt課件在臨床上許多疾病都可出現Ig水平的高度異常,這些指標高Ig血癥慢性細菌感染:肺結核,麻風,慢性支氣管炎,感染早期IgM顯著升高，以后IgG升高，IgA也可升高。自身免疫性疾病：SLE患者多有血清IgG、IgA、IgM的升高，血清Ig升高的程度與疾病的活動程度明顯相關，RA患者也有血清Ig的升高，但以IgM升高更為明顯。21ppt課件高Ig血癥慢性細菌感染:肺結核,麻風,慢性支氣管炎,感慢性肝臟疾病：慢性活動性肝炎，肝硬化，肝癌等患者血清Ig都有不同程度的升高，膽道阻塞時，血清IgA可升高。漿細胞病變：淋巴瘤、漿細胞惡性病變，MM，巨球蛋白血癥等患者血清中可有異常升高Ig和輕鏈的片段，但以單克隆升高為主。22ppt課件慢性肝臟疾病：慢性活動性肝炎，肝硬化，肝癌等患者血清Ig都有低Ig血癥

先天性低Ig血癥：主要見于先天性體液免疫缺陷或體液免疫與細胞免疫的聯合缺陷，IgG＜1g/L，IgA和IgM為正常人的1%。IgG缺陷患者常易有反復發生的化膿性感染。IgA缺乏者極易有反復呼吸道感染，

IgM缺乏者易患革蘭氏陰性菌敗血癥。23ppt課件低Ig血癥先天性低Ig血癥：主要見于先天性體液免獲得性低Ig血癥：主要見于某些病毒感染后對機體免疫功能的破壞，患者在感染前體液免疫指標正常，以后血清Ig水平降低。因疾病丟失的低Ig血癥：最常見腎病綜合征患者，終末期尿毒癥患者，因大量蛋白從尿中丟失。嚴重胃腸疾患因合成↓，代謝增加。24ppt課件獲得性低Ig血癥：主要見于某些病毒感染后對機體免疫功

3、IgE增高：見于IgE型多發性骨髓瘤、重鏈病、肝臟病、結節病、RA和各種過敏性疾病。

IgE降低：見于丙種球蛋白缺乏癥、惡性腫瘤、長期用免疫抑制劑者和共濟失調性毛細血管擴張癥等。

25ppt課件3、IgE增高：見于IgE型多發性骨髓瘤、重鏈

檢測到M蛋白，提示單克隆免疫球蛋白增殖性疾病。見于多發性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、重鏈病、輕鏈病和半分子病等。26ppt課件檢測到M蛋白，提示單克隆免疫球蛋白增殖性血清補體的檢測

補體（complement,C）是存在于正常人和動物血清中的一組與免疫有關的具有酶活性的球蛋白，不穩定，加熱56℃30分鐘即被滅活。補體成分有C1(C1q、C1rC1s)C2……C9等9個成份(11種球蛋白)，各成分通常以非活性狀態存在于血清和體液中，需經激活才能表現出生物學活性。補體：是一組具有酶原活性的糖蛋白，由傳統途徑的9種成分C3-C9、旁路途徑的3種成分及其衍生物組成，參與滅活病原體的免疫反應，也參與破壞自身組織和自身細胞而造成的免疫損傷。

27ppt課件血清補體的檢測補體（complement,C

正常人血清中的補體含量相對穩定。只有在患病時補體含量才會發生變化，因此測定補體的含量對于診斷自身免疫性疾病、免疫復合物引起的變態反應性疾病、補體缺陷病等都有一定的意義。28ppt課件正常人血清中的補體含量相對穩定。只有在患病總補體溶血活性檢測

總補體溶血活性（CH50）以溶血素（抗體）致敏的綿羊紅細胞（抗原抗體復合物）激活待測血清中的C1

，進而引起補體活化的連鎖反映，在綿羊紅細胞上形成多分子的聚合物，影響其膜表面的結構與功能，最終導致綿羊紅細胞溶解。溶血程度與補體量呈正相關，為S形曲線。故一般以50%溶血作為檢測終點。29ppt課件總補體溶血活性檢測總補體溶血活性（CH50）

【參考值】試管法50～100kU/L主要檢測補體傳統途徑活化的活性程度。反映的是補體9種成分的綜合水平。1、CH50

增高見于急性炎癥、組織損傷和某些惡性腫瘤；30ppt課件【參考值】試管法50～100kU/L30ppt課2、CH50

降低見于嚴重反復的細菌感染,各種免疫復合物性的疾病，如腎小球腎炎、RA、SLE、強直性脊柱炎等自身免疫性疾病的活動期。補體活化過度，血清補體水平下降。大S燒傷，大出血及腎病綜合征等大量補體蛋白丟失。急、慢性肝炎、肝硬化或肝癌患者，血漿蛋白合成不足。31ppt課件2、CH50降低見于嚴重反復的細菌感染,補體C3檢測是一種由肝臟合成的β2-球蛋白，由α和β兩條多肽鏈組成。是傳統途徑和旁路途徑被激活的關鍵物質。[參考值]0.8～1.5g/L32ppt課件補體C3檢測是一種由肝臟合成的β2-球蛋白，由α和β兩條多肽[臨床意義]正常人血清中補體組分的含量相對穩定，患病時，補體在體內合成降低，活化代謝增強和消耗異常或先天性缺陷可引起血清中各補體組分水平的變化。33ppt課件[臨床意義]33ppt課件增高：由于急性期反應使補體合成增多，它可與其它血漿蛋白的改變相伴隨，如CRP的增多和TRF（轉鐵蛋白）降低。總補體活性以及C3和C4的含量增多，見于所有風濕性疾病的急性期，如RA（伴有關節外表現時可↓），風濕熱，強直性脊柱炎34ppt課件增高：由于急性期反應使補體合成增多，它可與其它血漿蛋白的改變

其它疾患如急性病毒性肝炎，急性心梗，癌，糖尿病，妊娠，結節病淀粉樣變性，甲狀腺炎，傷寒，大葉性肺炎和小腸炎性病等補體值↑35ppt課件其它疾患如急性病毒性肝炎，急性心梗，癌，糖尿病，減低：⑴分解增加，任何與循環復合物有關的疾病如：大多數急性腎小球腎炎、鏈球菌感染后腎炎、狼瘡性腎炎患者。還見于活動性SLE和類風濕關節炎等。36ppt課件36ppt課件⑵合成↓如嚴重肝臟疾患⑶先天性缺陷（僅有一種補體）⑷其它：肝素、人造腎的透析膜（使活化）37ppt課件⑵合成↓如嚴重肝臟疾患37ppt課件細胞免疫的檢測

淋巴細胞（lymphocyte）是體內分布廣泛、種類繁多且功能各異的細胞群體。可分為T、B和NK等細胞群，它們又可分為若干亞群，各有其特異的表面標志和功能。各種淋巴細胞形態相似，在一般光鏡下不易區分。

38ppt課件細胞免疫的檢測淋巴細胞（lymphocytT細胞花結形成試驗

用于檢測T細胞的數量。

T細胞表面有綿羊紅細胞（SRBC）受體，可與SRBC結合形成花結樣細胞，稱為紅細胞玫瑰花結形成試驗或E玫瑰花結形成試驗（ERFT）。顯微鏡下計數花結形成細胞占淋巴細胞的比例，以每個淋巴細胞黏附3個或3個以上羊紅細胞者為花結形成細胞。

39ppt課件T細胞花結形成試驗用于檢測T細胞的數量。39

【參考值】EtRFC為64.4±6.7%

【臨床意義】①降低；見于免疫缺陷性疾病，如惡性腫瘤、免疫性疾病、某些病毒感染、大面積燒傷、多發性神經炎等。②升高：見于甲亢、甲狀腺炎、重癥肌無力、慢性活動性肝炎、SLE活動期和器官移植排斥反應等。

40ppt課件【參考值】EtRFC為64.4±6.7%40腫瘤標志物檢查

是由腫瘤細胞本身合成、釋放或者是由機體對腫瘤反應而產生的一類物質，主要包括蛋白質類、糖類物質和酶類腫瘤標志物。41ppt課件腫瘤標志物檢查是由腫瘤細胞本身合成、釋放或者是由機體甲胎蛋白測定(由胎肝和卵黃囊合成的特殊蛋白質，電泳時位于白蛋白和α球蛋白之間，胎兒出生后一到兩周即消失）癌胚抗原測定（CEA）

胚胎期主要存在于胎兒的胃腸管、胰腺和肝臟，出生后含量極低。胃腸道惡性腫瘤時↑↑，是一種廣譜腫瘤標志物。42ppt課件甲胎蛋白測定(由胎肝和卵黃囊合成的特殊蛋白質，電泳時位于白蛋

甲胎蛋白測定定性陰性定量<25μg/L升高見于：原發性肝癌、消化道腫瘤、支氣管腫瘤、生殖腺胚胎瘤、病毒性肝炎及肝硬化等。生理性↑見于孕婦。原發性肝癌陽性率可達75%~80%以上，其值可達300μg/L以上43ppt課件甲胎蛋白測定定性陰性原發性肝癌胚抗原測定（CEA）胎兒早期的消化管及某些組織合成，孕六個月后含量逐漸減少，出生后含量極低，對腫瘤的診斷、預后、復發判斷有意義。正常低于15μg/L。↑↑見于90%的胰腺癌、74%的結腸癌、60%的乳腺癌，常高于60μg/L。44ppt課件癌胚抗原測定（CEA）胎兒早期的消化管及某些組織合成，孕結腸炎、胰腺炎、肝臟疾病、肺氣腫及支氣管哮喘也可升高。胃癌病人胃液和唾液中可檢測出CEA。45ppt課件結腸炎、胰腺炎、肝臟疾病、肺氣腫及支氣管哮喘也可升高。45p自身抗體的檢測

某些原因削弱或破壞健康人的自身免疫耐受，使得自身免疫系統對自身組織或成分產生免疫應答，稱為自身免疫。由此所產生的疾病稱為自身免疫病，診斷方法是作自身抗體免疫檢測。46ppt課件自身抗體的檢測某些原因削弱或破壞健康人的自身免疫耐類風濕因子RF

RF最初由Rose(1948)在類風濕性關節炎患者血清中發現的。RF與天然IgG結合的能力較差，最易與免疫復合物中的IgG或聚合的IgG結合，活化補體，或被吞噬C吞噬，后者釋放的溶酶體酶、活性肽、膠原酶、前列腺素E2等，可造成骨關節損傷及血管炎。47ppt課件類風濕因子RFRF最初由Rose(1948)在

類風濕因子是由于感染因子（細菌、病毒等）引起體內產生的以變性IgG（一種抗體）為抗原的一種抗體，故又稱抗抗體。常見的類風濕因子有IgM型、IgG型、IgA型和IgE型。人體內普遍存在著類風濕因子，并起著一定的生理作用。48ppt課件類風濕因子是由于感染因子（細菌、病毒等）引起體內產生的以

近年來對IgM型類風濕因子的生物作用已有所了解，這些生物作用包括：1、調節體內免疫反應；2、激活補體，加快清除微生物感染；3、清除免疫復合物使機體免受循環復合物的損傷。只有類風濕因子的量超過一定的滴度時稱類風濕因子陽性。49ppt課件近年來對IgM型類風濕因子的生物作用已有所了解，這些生由于IgM型類風濕因子是類風濕因子的主要類型，而且具有高凝集的特點，易于沉淀，故臨床上主要測定IgM型類風濕因子，測定方法為乳膠凝集法和酶聯免疫吸附法。50ppt課件由于IgM型類風濕因子是類風濕因子的主要類型，而且具

【參考值】正常為陰性類風濕性疾病陽性率達70%-90%，RF為RA病情活動程度的判斷指標之一。

自身免疫性疾病多發性肌炎、干燥綜合癥、SLE、自身免疫性溶血性貧血某些感染性疾病傳染性單核細胞增多癥、感染性心內膜炎、結核病等。特異性不高哦！51ppt課件特異性不高哦！51ppt課件丙種反應性蛋白CRP是一種由肝臟合成，能與肺炎雙球菌C多糖體起反應的急性時相反應蛋白。急性期濃度可升高上千倍，

CRP能結合多種細菌、真菌、原蟲以及核酸、磷脂酰膽堿等，有激活補體、促進吞噬和調節免疫的作用。廣泛存在于血清和其他體液中。52ppt課件丙種反應性蛋白CRP是一種由肝臟合成，能與肺

定性陰性定量＜8mg/L【臨床意義】

↑見于：化膿性感染、組織壞死、惡性腫瘤、結締組織病、器官移植急性排斥等，有助于早期診斷升高不升高感染細菌性非細菌風濕熱活動期穩定期疾病器質性功能性53ppt課件53ppt課件

歡迎進入課后習題54ppt課件歡迎進入課后習題54ppt課件1、IgG降低見于：（）A、病毒感染B、肺結核C、鏈球菌感染D、慢性肝炎E、淋巴瘤55ppt課件1、IgG降低見于：（）55ppt課件2、IgG、IgA、IgM在參與機體的特異性體液免疫反應中擔負了重要的作用。作為反映人體體液免疫狀況的指標應測：A、IgG水平即可反映B、IgG、IgA、IgM三種水平即可反映C、IgG、IgA水平即可反映D、應測定IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五類Ig水平才能反映。56ppt課件2、IgG、IgA、IgM在參與機體的特異性體液免疫反應中3、甲說：“IgE又稱親細胞抗體，是介導Ⅱ型變態反應的主要抗體。”乙說：“IgE又稱反應素，是介導Ⅰ型變態反應的主要抗體。A、甲對乙不對B、甲乙都對C、乙對甲不對D、甲、乙都不對57ppt課件3、甲說：“IgE又稱親細胞抗體，是介導Ⅱ型變態反應的主要抗4、獲得性低Ig血癥是：A、先天性體液免疫缺陷，導致血清中Ig濃度較低B、先天性體液免疫和細胞免疫的聯合缺陷導致血清中Ig濃度降低。C、因大量蛋白從尿中丟失，出現血清Ig水平下降D、主要見于某些病毒感染后對體液免疫功能的破壞，導致感染前正常的血清Ig水平下降。58ppt課件4、獲得性低Ig血癥是：A、先天性體液免疫缺陷，導致血清中I5、CH50實驗是一個經典的實驗，它主要測定：A、血清補體經典途徑的濃度含量B、血清補體替代途徑的濃度含量C、血清補體9種成分的綜合含量D、血清補體經典途徑的溶血活性