1名以清修利以義制績以勤勉匯通天下李安平新晉商理念1名以清修利以義制李安平新晉商理念1分析方法驗證

主講人：王建光

2李宏析方法驗證主講人：王建光2李宏業136011192402重點議題法規要求驗證目的檢驗項目和驗證內容分析方法確認分析方法再驗證3重點議題法規要求33分析方法的法規要求第十二條質量控制的基本要求：（四）檢驗方法應當經過驗證或確認；4分析方法的法規要求第十二條質量控制的基本要求：44分析方法的法規要求第二百二十三條物料和不同生產階段產品的檢驗應當至少符合以下要求：（二）符合下列情形之一的，應當對檢驗方法進行驗證：1.采用新的檢驗方法；2.檢驗方法需變更的；3.采用《中華人民共和國藥典》及其他法定標準未收載的檢驗方法；4.法規規定的其他需要驗證的檢驗方法。5分析方法的法規要求第二百二十三條物料和不同生產階段產品的檢5分析方法的法規要求（三）對不需要進行驗證的檢驗方法，企業應當對檢驗方法進行確認，以確保檢驗數據準確、可靠；6分析方法的法規要求（三）對不需要進行驗證的檢驗方法，企業應當6分析方法的法規要求藥典或官方標準收載的方法－不需完整驗證－需驗證方法的適用性（確認）自研方法或對官方標準進行了大幅調整－需完整驗證7分析方法的法規要求藥典或官方標準收載的方法77驗證的目的證明采用的方法適合于相應的檢測要求。8李宏證的目的8李宏業136011192408檢驗項目和驗證內容

注：—表示通常不需論證的項目；+表示通常需論證的項目；

①

假如已論證重現性，可不需再論證中間精密度；

②缺乏專屬性的分析方法，應由其他分析方法來作補充；

③有些情況不需要。

9檢驗項目和驗證內容99術語（1）準確度－－是指用該方法測定的結果與真實值或參考值接近的程度，一般用回收率（％）表示。精密度－－是指在規定的測試條件下，同一個均勻供試品，經多次取樣測定所得結果之間的接近程度，一般用偏差，標準偏差或相對標準偏差表示。10術語（1）準確度－－是指用該方法測定的結果與真實值或參考值接10術語（2）專屬性－－是指在其他成分（如雜質、降解產物，輔料等）可能存在下，采用的方法能正確測定出被測物的特性。如方法不夠專屬，應采用多個方法補充。檢測限－－是指試樣中被測物能被檢測出的最低量。定量限－－是指試樣中被測物能被定量測定的最低量，其測量結果應具一定準確度和精密度。11lihongye術語（2）專屬性－－是指在其他成分（如雜質、降解產物，輔料等11術語（3）線性－－是指在設計的范圍內，測試結果與試樣中被測物濃度直接呈正比關系的程度。范圍－－是指能達到一定精密度、準確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區間。耐用性－－是指在測定條件有小的變動時，測定結果不受影響的承受程度，為使方法可用于提供常規檢驗依據。12lihongye術語（3）線性－－是指在設計的范圍內，測試結果與試樣中被測物12分析方法的驗證項目典型分析方法驗證的項目：－專屬性specificity

－精密度precision－準確度accuracy－檢測限detectionlimit

－定量限quantitationlimit－線性linearity－范圍range－耐用性robustness

13分析方法的驗證項目典型分析方法驗證的項目：1313分析方法的驗證-專屬性專屬性－定義：指一種方法在有可能的干擾物質（如雜質、降解產物和基質）存在時，能夠準確無誤地評估被分析物的能力鑒別:確保可以鑒別被分析物純度檢查：確保所有的分析過程能夠為雜質的含量提供準確的數據，如相關物質檢查、重金屬限度檢查、有機揮發性雜質檢查等含量測定：提供準確的檢測結果以保證含量樣品中被分析物的含量或效價值準確無誤14分析方法的驗證-專屬性專屬性1414分析方法的驗證-專屬性專屬性－方法定性分析（鑒別）：樣品陽性結果＋空白陰性結果＋結構相似物質的陰性結果；雜質檢查（對照品可得）：將可能的雜質對照品加入樣品中；雜質檢查（對照品不可得）：－用另外一種官方的標準或經驗證的方法對樣品和經降解的樣品分析，比較兩種方法得到的雜質概況15分析方法的驗證-專屬性專屬性1515分析方法的驗證-專屬性雜質檢查（對照品不可得）－使用其他技術對峰純度進行檢查，如二極管陣列檢測器、MS等含量測定：

被分析物與其他干擾峰完成分離。向樣品中加入一定量的干擾物，含量測定的結果不受干擾；檢查主峰的純度16分析方法的驗證-專屬性雜質檢查（對照品不可得）1616分析方法的驗證-專屬性鑒別試驗：本品的紅外吸收圖譜應與對照品的圖譜一致。采用與被測物結構類似的化合物以及被測物分別進行紅外測試。被測物為正反應。被測物結構類似的化合物為負反應。被測物結構類似的化合物可選用中間體、副產物或降解產物等。17分析方法的驗證-專屬性鑒別試驗：1717分析方法的驗證-專屬性鑒別：化學滴定的顏色反應；采用與被測物結構類似的化合物以及被測物分別進行鑒別試驗。被測物為正反應。被測物結構類似的化合物為負反應。被測物結構類似的化合物可選用中間體、副產物或降解產物等。18分析方法的驗證-專屬性鑒別：1818分析方法的驗證-精密度精密度precision－定義：對均一樣品重復取樣檢測每個檢測結果間的接近程度，RSD%,CV%

－重復性repeatability：短時間內同一分析人員使用同一儀器－中間精密度intermediateprecision:在同一實驗室內的變化，如不同分析時間、不同分析人員、不同分析儀器－重現性reproducibility:在不同實驗室內重復

19分析方法的驗證-精密度精密度precision1919分析方法的驗證-精密度精密度－方法

－100％濃度≥6次－3濃度×3次20分析方法的驗證-精密度精密度2020分析方法的驗證-準確度準確度－定義：方法的檢測結果與真實值的接近程度。－方法：

－原料藥：分析已知含量的對照品；第二種確定的方法分析，結果比較－制劑：加樣回收；第二種確定的方法分析，結果比較－應在方法的范圍內－計算回收率：3濃度×3次

21分析方法的驗證-準確度準確度2121分析方法的驗證-檢測限檢測限detectionlimit－定義：在聲明的實驗條件下所能檢測到的被分析物的最小量。限度檢查的指標；表示為在樣品中的濃度％,ppm－方法：－檢測已知濃度的樣品(對照品)－雜質的DL<0.05%－信噪比2:1/3:122分析方法的驗證-檢測限檢測限detectionlimit222分析方法的驗證-定量限定量限quantitationlimit－定義：在聲明的實驗條件下被分析物可被定量分析并能滿足合格的精密度和準確度的最小值。微量物質的定量分析：有關物質定量分析，有機揮發性物質的定量分析。％，ppm－方法：－已知濃度樣品（對照品）－相關物質<0.05％－證明精密度和準確度－信噪比10:123分析方法的驗證-定量限定量限quantitationlim23分析方法的驗證-線性與范圍－方法：一定范圍內的不同濃度點進樣，繪制響應值（y）與濃度(x)之間的回歸線，計算回歸方程，相關系數（r,r2）

－主成分含量測定：80％－120％檢測濃度－雜質含量測定：定量限（50％）－120％標準－裝量差異：70％－130％檢測值－溶出實驗：±20％規定范圍2023/8/1224分析方法的驗證-線性與范圍－方法：一定范圍內的不同濃度點進樣24分析方法的驗證-線性與范圍線性和范圍linearityandrange－定義：－線性：在給定的范圍內使檢測結果直接或通過數學轉換后與被分析物在樣品中的濃度成比例的能力－范圍：在適當的精密度、準確度和線性基礎上檢測到的被分析物的最低水平到最高水平區間25分析方法的驗證-線性與范圍線性和范圍linearitya25分析方法的驗證-線性與范圍26李宏提供如下數據：回歸方程y＝a+bx回歸曲線相關系數分析方法的驗證-線性與范圍26李宏業1360111924026分析方法的驗證-耐用性耐用性robustness－定義：分析方法的某些參數發生微小變化時方法抗干擾的能力，表示在正常使用時的可靠性－方法：刻意改變參數，考察結果的變化流動相的pH值、流動相的組成（極性的變化）、不同供應商柱子、柱溫、流速等27分析方法的驗證-耐用性耐用性robustness2727分析方法的驗證-耐用性液相：評估柱溫、流速、色譜柱、緩沖鹽pH、有機相比例、流動相比例、溶液放置時間對檢測結果的影響氣相：評估柱溫、流速、色譜柱、溶液放置時間對檢測結果的影響28分析方法的驗證-耐用性液相：評估柱溫、流速、色譜柱、緩沖鹽p28分析方法的驗證-系統適用性系統適用性systemsuitability－耐用性驗證的結果－影響參數在方法中列出－在日常樣品分析前、過程中進行考察－色譜方法中尤為重要29分析方法的驗證-系統適用性系統適用性systemsuita29分析方法的驗證-系統適用性液相和氣相可以不同；液相：任何兩個組分之間的分離度R不小于1.5；重復進樣(6次)的相對標準偏差RSD不大于2.0%氣相：任何兩個組分之間的分離度R不小于3；重復進樣(6次)的相對標準偏差RSD不大于15%。30分析方法的驗證-系統適用性液相和氣相可以不同；3030分析方法的驗證USP對不同方法驗證項目的要求*根據不同的方法特點也可能需要

“＋”需要“－”不需要31分析方法的驗證USP對不同方法驗證項目的要求3131分析方法的驗證I類方法：制劑中原料藥或活性成分（包括防腐劑）的定量分析方法；II類方法：原料藥中雜質或制劑中降解化合物的分析方法；包括定量方法和限度檢查；III類方法：藥物性能特征分析方法：溶出，藥物釋放IV類方法：鑒別實驗32分析方法的驗證I類方法：制劑中原料藥或活性成分（包括防腐劑）32分析方法確認適用于藥典方法和其他已驗證的法定標準。因為藥典方法和其他法定標準被認為是驗證過的分析方法，不需要驗證，但需要通過方法確認來證明方法在該實驗室條件下的適應性。33分析方法確認適用于藥典方法和其他已驗證的法定標準。因為藥典方33分析方法確認對于方法確認，通常采用兩種方式：一、由兩名檢驗人員分別獨立對同一批產品進行檢驗（如可能使用不同的儀器）比較兩人的檢測結果來證明方法在本實驗室（人員，分析儀器，試劑）的適用性；二、根據驗證目的和評估結果選擇相關項目進行確認：（具體見下表）34分析方法確認對于方法確認，通常采用兩種方式：3434分析方法確認35分析方法確認3535分析方法再驗證在某些情況下，如原料藥合成工藝改變、制劑處方改變、分析方法發生部分改變等，均有必要對分析方法再次進行部分或完整的再驗證，以保證分析方法可靠。36分析方法再驗證在某些情況下，如原料藥合成工藝改變、制劑處方改36分析方法再驗證當原料藥合成工藝發生改變時，可能引入新的雜質，雜質檢查方法和含量測定方法的專屬性就需要再進行驗證，以證明有關物質檢查方法能夠檢測新引入的雜質，且新引入的雜質對主成份的含量測定應無干擾。37分析方法再驗證當原料藥合成工藝發生改變時，可能引入新的雜質，37分析方法再驗證當制劑的處方組成改變、輔料變更時，可能會影響鑒別的專屬性、溶出度和含量測定的準確度，因此需要對鑒別、含量測定方法再驗證。當原料藥產地來源發生變更時，可能會影響雜質檢查和含量測定的專屬性和準確度，因此需要對雜質檢查方法和含量測定方法進行再驗證。38分析方法再驗證當制劑的處方組成改變、輔料變更時，可