促甲狀腺素測定標準操作規程?1檢驗原理：采用兩步法免疫檢測，運用化學發光微粒子免疫檢測（CMIA）技術與靈活的檢測模式的結合，測定人血清和血漿中是否含有促甲狀腺激素（TSH）。第一步，將樣本、βTSH抗體包被的順磁微粒子和TSH項目稀釋液混合。樣本中的TSH與TSH抗體包被的微粒子結合。沖洗后進入第二步，加入吖啶酯標記的αTSH抗體結合物。然后將預激發液和激發液加入反應混合物中；測量化學發光反應結果，以相對發光單位（RLUs）表示。樣本中的TSH含量和ARCHITECTi光學系統檢測到的RLUs值成正比。2.試劑主要組成部分：2.1試劑盒微粒子：βTSH抗體（小鼠、單克隆）包被的微粒子，儲存于含有蛋白（牛）穩定劑的三羥甲基氨基甲烷（TRIS）緩沖液中。最低濃度：0.07%固體物質。防腐劑：抗菌劑。結合物：吖啶酯標記的αTSH抗體（小鼠、單克隆）結合物，儲存于含有蛋白（牛）穩定劑的2-（N-嗎啡啉）乙磺酸（MES）緩沖液中。最低濃度：60ng/mL.防腐劑：抗菌劑。項目稀釋液：促甲狀腺激素（TSH）項目稀釋液，儲存于三羥甲基氨基甲烷（TRIS）緩沖液中。防腐劑：抗菌劑。2.2需要但未提供的試劑預激發液：預激發液含有1.32%（W/V）過氧化氫激發液：激發液含有0.35N氫氧化鈉濃縮清洗緩沖液：濃縮清洗緩沖液含有磷酸鹽緩沖液。防腐劑：抗菌劑。3.樣本要求：人血清（包括采集于血清分離管中的血清）或采集于肝素、肝素鋰或EDTA鉀抗凝管中的血漿。血清和血漿樣本中應不含纖維蛋白、紅細胞或其他顆粒物質。2-8℃可保存7天；-10℃以下可保存6個月。樣本應避免反復凍融。4.檢驗方法：儀器法（詳見雅培i1000標準操作規程）5.參考范圍樣本參考范圍（uIU/ml）血清或血漿0.35-4.946.檢驗結果的解釋6.1促甲狀腺激素項目通過四參數Logistic曲線擬合數據約簡法（4PLC,Y加權）生成一條校準曲線6.2結果單位轉換：濃度（uIU/ml）×1=濃度（mIU/ml）7.檢驗方法的局限性7.1進行TSH檢測時必須按照采集管生產商指導說明書對樣本進行處理。處理不充分，包括與建議的凝固時間、離心時間、離心速度和樣本制備技術存在偏差都有可能使檢測結果不準確。7.2將檢測結果用于診斷時，應與其他數據：如癥狀、其他甲狀腺檢查結果、臨床表現等結合使用。7.3TSH檢測結果與臨床癥狀不符時，需要通過附加試驗來驗證檢測結果。7.4由于TSH水平較低或檢測不到而懷疑為甲狀腺功能亢進時，應通過附加甲狀腺功能檢查并結合其他臨床資料進行驗證。7.5接受小鼠單克隆抗體制劑診斷或治療的患者，其樣本中可能含有人小鼠抗體（HAMA）。使用含有小鼠單克隆抗體的試劑盒檢測此樣本時，檢測值可能會假性升高或降低。7.6人血清中的異嗜性抗體可與試劑中的免疫球蛋白發生反應，干擾體外免疫測定。經常與動物或動物血清產品接觸的患者，其樣本可能容易受到此干擾，并使檢測結果出現異常值。可能需要其他信息用于診斷。7.6關于樣本局限性的信息，參加本試劑盒說明書第一節8.產品性能指標8.1精密度：促甲狀腺激素項目的精密度為總CV≤10%8.2回收率：通過檢測已知TSH濃度的樣本得出促甲狀腺激素項目的平均回收率為100±10%8.3靈敏度：8.3.1功能靈敏度；功能靈敏度定義為批間CV在20%時能檢測到的TSH濃度。促甲狀腺激素項目的功能靈敏度≦0.01uIU/ml，符合第三大TSH檢測的要求。8.3.2分析靈敏度：促甲狀腺激素項目的分析靈敏度≦0.0025uIU/ml。8.4分析特異性：向TSH濃度正常的人血清樣本中添加下列物質（濃度見下表）然后進行檢測，促甲狀腺激素項目的分析特異性通過與以下物質的交叉反應率來表示，結果＜10%項目濃度FSH≤500uIU/mlLH≤500uIU/mlhCG≤200，000uIU/ml8.5干擾性項目濃度干擾率血紅蛋白≤500mg/dL＜10%膽紅素≤20mg/dL＜10%甘油三酯≤3000mg/dL＜10%蛋白質≤2g/dL和12g/dL＜10%8.6準確度（相關性）：促甲狀腺激素項目與AxSYM超敏hTSHⅡ項目比較的斜率為1.00±0.20，相關系數（r）≧0.959臨床意義：人促甲狀腺激素（TSH）或甲狀腺刺激激素是一種糖蛋白，分子量約為28,000道爾頓，由垂體前葉的嗜堿性細胞（促甲狀腺細胞）合成。TSH由α和β兩個亞基非共價連接而成。雖然促黃體生成素（LH），尿促卵泡素（FSH）以及人絨毛膜促性腺激素（hCG）中都含有與TSH相同的α亞基，但這些糖蛋白的β亞基都是激素特異性的，具有生物學和免疫學特異性。α和β亞基同時存在才具有生物學活性。TSH通過與甲狀腺細胞表面的特定受體相互作用，刺激具有代謝活性的甲狀腺激素、甲狀腺素（T4）以及三碘甲狀腺原氨酸（T3）的生成和分泌。T3和T4負責調節體內各種生化反應，這些生化反應是人體生長、新陳代謝和神經系統正常工作的必要保障。血液中甲狀腺激素水平較低時，促甲狀腺激素釋放激素（TRH），一種下丘腦分泌的三肽會刺激TSH的合成和分泌。T3和T4水平的升高會通過經典的負反饋機制抑制TSH的生成。另有證據表明生長激素抑制素和多巴胺可以抑制TSH的釋放，這表明下丘腦既能抑制又能刺激由腦垂體分泌的TSH的生成。任何程度的下丘腦-垂體-甲狀腺軸失調都會導致T4和/或T3生成不足（甲狀腺功能減退）或生成過量（甲狀腺功能亢進）。原發性甲狀腺功能減退時，T3和T4水平較低而TSH水平卻會明顯升高。無論是由于內源性下丘腦疾病還是垂體疾病引起的垂體功能紊亂，即中樞性甲狀腺功能減退，基礎TSH水平正常或輕度升高，雖然T4和/或T3水平會顯著下降。通常在這種情況下，TSH的生物活性降低，從而使TSH出現異常值。這種情況下建議通過常規TRH刺激試驗來確診。繼發性甲狀腺功能減退往往會降低TSH對TRH的反應，而三發性甲狀腺功能減退時TSH對TRH的反應可能為正常、延遲或過度。原發性甲狀腺功能亢進（如Grave病或結節性甲狀腺）與高水平的甲狀腺激素和低水平或低于檢測水平的TSH有關。甲狀腺功能亢進的診斷中使用了TRH刺激試驗。甲狀腺功能亢進患者對TRH試驗的反應低于正常人。另外，大量使用糖皮質激素、生長激素抑制素、多巴胺和甲狀腺激素替代療法都會減少或從總體上削弱TSH對TRH的反應。早期使用血清TSH檢測作為判斷甲狀腺功能的初步檢測時，顯示出檢測方法的靈敏度較低。現在出現了各種靈敏的TSH檢測方法，改變了甲狀腺功能檢測。隨著檢測能力的提高，這些檢測項目可以明確的鑒別甲狀腺功能正常和甲狀腺功能亢進人群。分析靈敏度，曾經是評估低值檢測準確度的方法，已被功能靈敏度所取代。美國甲狀腺協會已經正式建議使用功能靈敏度作為TSH項目的靈敏度指標，雖然目前廣泛使用的仍是分析靈敏度。第三代TSH項目可以用于鑒別真正的甲狀腺功能亢進患者和亞臨床甲狀腺功能亢進以及一些非甲狀腺疾病引起的TSH抑制患者，在檢測濃度<0.02μIU/mL的樣本時間CV為20%。