如有幫助，如有幫助，10島津LC-20AT型高效液相色譜儀的圖文操作手冊一、 島津LC-20AT型高效液相色譜儀：SPD-M20A二極管陣列檢測器SPD-M20A二極管陣列檢測器SIL-20A自動進樣器RF-10AXL熒光檢測器CTO-20A柱溫箱手動進樣器貯液瓶DGU-20A3真空脫氣機Varian380-LC蒸發光檢測器LC-20AT溶液傳輸單元CBM-20A系統把握器二、 功能和用途：1還配備了具有高靈敏度、檢測范圍更廣的蒸發光檢測器。2、用途：本儀器可以高效地分別分析高沸點、熱不穩定的有機及生化試樣；藥物、氨基酸、甾類化合物等有響應；蒸發光散射檢測器對碳氫化合物、外表活性劑、聚合物、脂肪酸和氨基酸、油和揮發性低于流淌相的任何樣品、不含發色團的化合物有響應。三、 操作步驟：1、色譜柱的安裝SPD-M20A二極管陣列檢測器、RF-10AXL熒光檢測Varian380-LC蒸發光散射檢測器。樣品分析前首先要確定用什么檢測器，然后把色譜柱連接到所需的檢測器上。2aUPSDGU-20A3真空脫氣機、LC-20AT溶液CBM-20A系統把握器、所選用的檢測器、自動進樣器〔HPLC組件的電源開關大都在儀器的右下角〕90~180purge鍵進展自動脫氣，一般設置為3分鐘；然后按自動進樣器軟鍵盤的purge鍵，對25分鐘。cLcsolutionAdminOK。單擊系統配置的器配置，也可以用圖示中的藍色和紅色箭頭分別添加和去掉配置的儀將自動進樣器去掉。單擊儀器〔通訊設置IP地址。start。d、單擊儀器開關按鈕，將軟件與儀器連接e、儀器參數視圖里面，簡潔設置里面，模式選擇二元高壓梯度，設置總流B單擊繪圖，可以看查看基線。3PDA檢測器時，則按以下進展設置。數據采集：LC0.01。采集時間打勾，完畢時間為分析樣品的時間。LC0.01controllerstop。進展泵：模式選擇二元高壓梯度，設置泵B的濃度。最大壓力依據色譜柱的最大壓力進展設置。柱溫箱：設置柱溫箱的溫度。自動排氣：不需要重設置。方法設置完后，選擇文件，另存為方法文件。當儀器穩定，基線穩定后，可以下載方法，進展樣品的分析。PDA檢測器。c、4、假設選擇蒸發光檢測器，將色譜柱連接蒸發光散射檢測器。翻開Varian-380VarianELSDControl軟件方法編輯器數，設置的方法。也可以不打勾，直接選擇已經設置好的方法。STANDBY模式，加熱塊關閉，霧化氣流速設定為較低1.2SLM。Standby模式下用戶可設定儀器參數〔霧化氣流速，霧化溫度，蒸發溫度RUN。Run中，儀器會顯示“NOTREADYREAD方法使用翻開機器后，選擇適宜的方法。RUN，使儀器加熱平衡。LCsolution軟件，自動配置選擇AD2，即選擇了蒸發光檢測器。其它PDA檢測器。儀器平衡后檢察基線。在洗脫液未接入時噪音應低于0.2mv，這說明霧化氣干凈枯燥。基線毛刺一般是由霧化氣中的粒子或水分造成的。15min。1mv0.25mv，純有機溶劑1mv。緩沖體系和穩定劑可顯著增加噪音。然后進展樣品分析。4a、單次運行欄停頓或者停頓的快捷鍵，可以將分析停頓。b、批處理運行處理文件。輸入樣品組數，選擇標準品和未知。下一步。ID，校準級別，數據文件名。下一步。輸入未知品名字，ID，數據文件名。下一步。另存批處理文件。單擊批處理開頭，開頭分析樣品。5樣品分析完畢，依據色譜柱的沖洗要求進展沖洗。沖洗完后，儀器參數0，下載。然后單擊儀器開關，關閉軟件，最終將電源UPS。6處理、全部文件形式。點擊分析圖標，選擇多色譜，提取所要波長下的峰。項。識別頁面，利用時間窗或時間帶限制峰。擊幫助。點擊確定，分析完成。結果在視圖，峰表內查看。7a、外標法定量面積，一般選擇面積選項，下一步。選擇要標定的峰，下一步。零點，一個校準級別，選擇強制通過，其它選擇未強制。加權方法無。輸入濃度，下一步。步。保存方法。件的級別中，有幾個級別，則相應的拖到相應的級別中。另存為方法。b、內標法定量定量方法為內標法，確定內表物的峰。8看結果。9顯示報告，將數據拖動到報告模板中即顯示報告。四、 留意事項：1、高壓恒流泵的維護：要留意保養和定期更換。應實行以下措施以延長使用壽命：而造成柱塞桿的干磨。管路。HPLC級試劑。壓力過高而損壞儀器。壓力下限應設置在0.5~1MPa，以防止儲液器中的流淌相被抽干或嚴峻滲漏而引起柱塞的干磨。2、流淌相的使用：必需使用HPLC0.45μm薄膜過濾。O2等，如不脫氣易產生氣泡、基線噪聲增加、靈敏度下降，甚至無法分析。丙酮、四氫呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亞砜等試劑。含有緩沖溶液流淌相的清洗方法：a100%3~5ml/min20min大的空間的清洗。1ml/min的流5%的甲醇主要是為了保護色譜柱。100%1ml/min2min左右，然后關機。假設流淌相中不含鹽，則只使用上述第三步清洗即可。3、更換流淌相：流淌相進展過濾、清洗。則就是承受與這二種需更換的流淌相都能相溶的流淌相。一般清洗時間為30~40分鐘，直至系統完全穩定。更換流淌相時，要用100ml的燒杯，放入需要更換的流淌相，將慮頭放入燒杯中，上下反復沖洗，然后將排液閥逆時針180度，purge。然后將排180度。儲液器的留意事項：HPLC級HPLC0.45μm過濾器除區去其中的微量物質。4、色譜柱的使用：a、使用前10％左右的低濃度的析出，堵塞色譜柱。b、樣品樣品也要盡可能清潔，可選用樣品過濾器或樣品預處理柱〔SPE〕對樣樣品時，全部的溶劑和樣品應嚴格脫水。c、色譜柱的保存〔含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞〕中，并將購置色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度最好是室溫。d、色譜柱的再生高降低，峰寬加大或消滅肩峰的現象，一般來說可能是柱效下降。、反相柱的再生：依次承受20~30倍的色譜柱體積的甲醇/水=10/90〔V/V洗色譜柱。、正相柱的再生：依次以20-30倍色譜柱的體積的正己烷、異丙醇、要留意上述溶劑必需嚴格脫水。5、色譜柱在使用過程中易消滅的問題和解決方法〔管路堵塞及壓力傳感器故障除外，可能的緣由有如下幾點：a、色譜柱頭的過濾篩板堵塞或污染；b、色譜柱頭的填料被樣品污染；析出；d、流淌相PH值過大或過小使固定相構造破壞或溶解。解決方法如下：a、如確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染，可以將色譜柱反方向用甲醇沖10％的稀硝酸內超聲清洗1010分鐘，重裝入色譜柱。b、如確定色譜柱頭的填料被污染，將柱頭螺絲卸