第十三章凝集反應本章要點凝集反應概念、特點及類型。1直接凝集反應原理、方法類型及臨床應用。2間接凝集反應原理、方法類型及臨床應用。3抗球蛋白試驗原理、方法類型及臨床應用。4冷凝集試驗的原理和臨床應用。5CONTENTS目錄01020304概述直接凝集反應間接凝集反應抗球蛋白試驗0506冷凝集試驗小結概述00概述早在1896年，Widal就利用傷寒病人的血清與傷寒桿菌發生特異性凝集的現象，有效地診斷傷寒病。至1903年，Landsteiner在特異性血凝現象的基礎上發現了人類ABO血型，并于1930年獲得了諾貝爾醫學獎。概述一、概念一、概念細菌、紅細胞等顆粒性抗原與相應抗體結合后，在適當電解質存在下，形成肉眼可見的凝集現象。顆粒性抗原還包括可溶性抗原（或抗體）與載體顆粒(O型人紅細胞、綿羊紅細胞、聚苯乙烯膠乳、炭粒等)結合成的致敏顆粒。概述二、特點二、特點抗原分子大，介質中成均勻的顆粒懸液。抗原抗體復合物以抗原為主。試驗時稀釋抗體。效價報告抗體的稀釋度。概述三、主要技術類型三、主要技術類型直接凝集反應01直接凝集反應細菌、紅細胞等顆粒抗原，在適當電解質參與下可直接與相應抗體結合出現凝集，稱為直接凝集反應（directagglutination）。凝集反應中的抗原稱為凝集原（agglutinogen），抗體稱為凝集素（agglutinin）。常用的凝集試驗有玻片法和試管法兩種。直接凝集反應一、玻片凝集試驗直接凝集反應一、玻片凝集試驗YYY+直接凝集反應臨床應用:1.菌種鑒定2.血清學分型3.血型鑒定方法評價:1.操作簡單、快速2.敏感度低3.定性檢測直接凝集反應二、試管凝集試驗直接凝集反應二、試管凝集試驗在試管內顆粒性抗原直接與抗體結合，在電解質的作用下，出現肉眼可見的凝集現象。直接凝集反應二、試管凝集試驗為半定量試驗方法，在微生物學檢驗中常用已知菌液與一系列稀釋的受檢血清混合，保溫后觀察每管內抗原凝集程度，通常以產生明顯凝集現象的最高稀釋倍數作為血清中抗體的效價，亦稱為滴度。二、試管凝集試驗臨床應用:1.肥達試驗Widaltest2.外斐氏試驗Weil-felixtest3.交叉配血試驗方法評價:1.半定量試驗2.操作簡便、快速3.敏感度不高4.可有假陽性間接凝集反應02間接凝集反應將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面，然后與相應的抗體或抗原反應，在電解質的作用下，出現肉眼可見的凝集現象。間接凝集反應一、載體間接凝集反應一、載體

RBC

聚苯乙烯膠乳載體的種類離子交換樹脂活性炭明膠顆粒間接凝集反應載體的條件：1.不溶于水，理化性質穩定且無化學和免疫學活性。2.大小均勻，密度與介質相近。3.能直接吸附和通過偶聯劑牢固結合抗原抗體。間接凝集反應二、方法類型二、方法類型根據致敏載體用的是抗原或抗體以及凝集反應的方式不同，間接凝集反應可分為4類:1.正向間接凝集試驗2.反向間接凝集試驗3.間接凝集抑制試驗4.協同凝集試驗間接凝集反應二、方法類型間接凝集反應二、方法類型間接凝集反應二、方法類型間接凝集反應二、方法類型間接凝集反應三、間接血凝試驗間接凝集反應三、間接血凝試驗抗原致敏紅細胞紅細胞+抗原抗原致敏紅細胞凝集抗體間接凝集反應四、膠乳凝集試驗間接凝集反應四、膠乳凝集試驗膠乳凝集試驗也是間接凝集反應，因所用的載體顆粒為聚苯乙烯膠乳而得名。間接凝集反應膠乳凝集抑制試驗檢測HCG：標本中加入相應量的HCG抗體，抗體與尿中HCG結合，再加入HCG膠乳抗原，本應凝集反應受到抑制，說明尿中含HCG，妊娠反應陽性。抗球蛋白試驗03抗球蛋白試驗抗球蛋白試驗由C-oombs于1945年建立，故又稱為Coombs試驗，是檢測抗紅細胞不完全抗體的經典方法。Coombs利用抗球蛋白抗體作為第二抗體，連接結合在紅細胞表面抗原的不完全抗體，使紅細胞凝集。常用試驗方法有直接抗球蛋白試驗和間接抗球蛋白試驗。抗球蛋白試驗一、直接抗球蛋白試驗抗球蛋白試驗一、直接抗球蛋白試驗一、直接抗球蛋白試驗直接抗球蛋白試驗既可用玻片法定性測定，也可用試管法作半定量分析。常用于新生兒溶血癥、自身免疫性溶血性貧血和醫源性溶血性疾病等的檢測。抗球蛋白試驗二、間接抗球蛋白試驗抗球蛋白試驗二、間接抗球蛋白試驗二、間接抗球蛋白試驗此試驗可用于檢測母體Rh（D）抗體，以便及早發現和避免新生兒溶血癥的出現。還可對某些細菌、立克次體感染后產生的不完全抗體進行檢測。可用于對紅細胞不相容輸血所產生的血型抗體進行檢測。冷凝集試驗04冷凝集試驗冷凝集試驗是用于檢測血清中冷凝集素的方法。冷凝集素（coldagglutinin）是冷反應型抗紅細胞抗體，具有較強的凝集紅細胞的作用，屬于IgM型抗體，可存在于正常人血清中，但是正常人血清抗紅細胞抗原的lgM冷凝集素效價比較低。冷凝集試驗冷凝集試驗可協助診斷肺炎支原體感染引起的肺炎，可用于輔助診斷冷凝集素綜合征、傳染性單核細胞增多癥、瘧疾、肝硬化、淋巴瘤及多發性骨髓瘤等。冷凝集試驗是傳統的實驗方法，但是其敏感度和特異性不強。小結Sumup方法類型原理臨床用途方法評價玻片凝集試驗抗原與抗體在玻片上直接反應血型的鑒定、菌種診斷或分型簡便、快速，敏感度低，多用于定性試驗試管凝集試驗抗原與系列倍比稀釋的血清在試管內反應交叉配血、輔助診斷傷寒和斑疹傷寒操作簡單，敏感度不高，為半定量試驗間接凝集試驗抗原（抗體）致敏載體，檢測標本中相應抗體（抗原）檢測病原微生物和自身免疫病相關抗體操作簡單、快速，敏感度和特異性高小結Sumup方法類型原理臨床用途方法評價間接凝集抑制試驗抗原致敏載體檢測是否存在與致敏抗原相同的抗原絨毛膜促性腺激素(HCG)的檢測靈敏度高于上面間接凝集試