高考生物二輪專題專題八第講基因工程和細胞工程第1頁，課件共33頁，創作于2023年2月限制酶載體基因表達載體的構建目的基因的檢測和鑒定轉基因動物基因治療基因可產生自然界沒有的蛋白質細胞的全能性植物體細胞雜交作物新品種的培育細胞增殖動物細胞核的全能性細胞膜的流動性給小鼠注射特定抗原產生專一抗體的雜交瘤細胞網絡構建第2頁，課件共33頁，創作于2023年2月第3頁，課件共33頁，創作于2023年2月第4頁，課件共33頁，創作于2023年2月目的基因的檢測與鑒定類型步驟檢測內容方法結果顯示分子檢測第一步目的基因是否進入受體細胞DNA分子雜交(DNA和DNA之間)是否成功顯示出雜交帶第二步目的基因是否轉錄出mRNA分子雜交技術(DNA和mRNA之間)是否成功顯示出雜交帶第三步目的基因是否翻譯出蛋白質抗原—抗體雜交是否成功顯示出雜交帶第5頁，課件共33頁，創作于2023年2月個體水平鑒定做抗蟲或抗病的接種實驗，以確定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程產品與天然產品的功能進行活性比較，以確定功能是否相同第6頁，課件共33頁，創作于2023年2月第7頁，課件共33頁，創作于2023年2月第8頁，課件共33頁，創作于2023年2月動物細胞培養和植物組織培養比較項目動物細胞培養植物組織培養前處理培養基成分培養基狀態無菌；用胰蛋白酶處理，使組織細胞相互分散開無菌、離體葡萄糖、氨基酸、無機鹽、促生長因子、微量元素、動物血清等礦質元素、蔗糖、維生素、植物激素等液體培養基固體培養基第9頁，課件共33頁，創作于2023年2月項目動物細胞培養植物組織培養過程能否培養成個體應用舉例動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織→原代培養→傳代培養→細胞群不能能大規模生產有重要價值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等；皮膚移植；檢測有毒物質的毒性等快速繁殖、培育無病毒植株；生產藥物；制造人工種子；培育轉基因作物等第10頁，課件共33頁，創作于2023年2月特別提醒：(1)兩種技術手段培養過程中都進行有絲分裂，都是無性繁殖，都可稱為克隆，都不涉及減數分裂；(2)均為無菌操作，都需要適宜的溫度、pH等條件。第11頁，課件共33頁，創作于2023年2月植物體細胞雜交和動物細胞融合項目植物體細胞雜交動物細胞融合(單克隆抗體的制備)理論基礎(原理)融合前處理促融細胞膜的流動性、植物細胞的全能性細胞膜的流動性、細胞增殖酶解法去除細胞壁(纖維素酶、果膠酶等)注射特定抗原的免疫小鼠，獲取B淋巴細胞①物理法：離心、振動、電激等；②化學法：聚乙二醇(PEG)等①物化法、化學法：與促進植物細胞融合的方法相同；②生物法：滅活的病毒第12頁，課件共33頁，創作于2023年2月項目植物體細胞雜交動物細胞融合(單克隆抗體的制備)過程用途第一步：原生質體的制備；第二步：原生質體的融合；第三步：雜種細胞的篩選與培養；第四步：雜種植株的誘導與鑒定第一步：細胞培養；第二步：誘導細胞融合；第三步：某種細胞選擇；第四步：雜種細胞克隆與純化克服遠緣雜交不親和的障礙，大大擴展了雜交親本的組合范圍①作為診斷試劑；②用于治療疾病和運載藥物,如“生物導彈”第13頁，課件共33頁，創作于2023年2月重點提煉細胞工程的幾個流程圖比較細胞工程技術技術過程圖示植物組織培養第14頁，課件共33頁，創作于2023年2月動物細胞培養植物體細胞雜交第15頁，課件共33頁，創作于2023年2月動物細胞的融合第16頁，課件共33頁，創作于2023年2月核移植第17頁，課件共33頁，創作于2023年2月單克隆抗體的制備第18頁，課件共33頁，創作于2023年2月動物細胞培養的特殊條件歸納(1)胰蛋白酶的使用：首先用胰蛋白酶處理動物的器官或組織，以制備單細胞懸液；培養過程中發生接觸抑制時，同樣需要用胰蛋白酶使細胞分散開。(2)避免雜菌污染的措施：培養液及培養用具滅菌處理；加入一定量的抗生素；定期更換培養液。(3)特殊的營養條件①液體培養基。②加入動物血清、血漿等。③通入氧氣以滿足代謝的需要。④通入二氧化碳以維持培養液的pH。第19頁，課件共33頁，創作于2023年2月動物細胞融合與單克隆抗體制備的歸納(1)制備單克隆抗體時選用一種抗原處理的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行細胞融合，產生雜交瘤細胞，雜交瘤細胞兼有兩個親本細胞的特性——在體外培養條件下能不斷增殖，同時能產生出某種特異性的抗體。(2)進行動物細胞的誘導融合，形成的雜種細胞有三種：AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我們所需要的雜種細胞，所以需要用選擇性培養基進行篩選。(3)相比植物體細胞雜交，動物細胞融合特有的誘導方法是用滅活的病毒處理，其他物理、化學誘導融合的手段與植物體細胞雜交過程中原生質體誘導融合的方法相同。第20頁，課件共33頁，創作于2023年2月1.攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選必須通過分子檢測(2014·天津，4A)(

)2.轉基因抗蟲棉植株抗蟲效果的鑒定必須通過分子檢測(2014·天津，4C)(

)3.一種限制性核酸內切酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸序列(2007·全國Ⅱ，4A)(

)4.用限制性核酸內切酶切割煙草花葉病毒的核酸(2010·浙江，2A)(

)錯混診斷×√××第21頁，課件共33頁，創作于2023年2月5.每個重組質粒至少含一個限制性核酸內切酶識別位點(2011·浙江，6B)(

)6.自然界中天然存在的噬菌體自行感染細菌后其DNA整合到細菌DNA上，屬于基因工程(2010·大綱全國Ⅱ，5D)(

)7.轉抗蟲基因的植物，不會導致昆蟲群體抗性基因頻率增加(2010·江蘇，18B)(

)8.重組質粒與探針能進行分子雜交是因為DNA分子脫氧核糖和磷酸交替連接(2013·安徽，6C)(

)×

√

×

×

第22頁，課件共33頁，創作于2023年2月11.產生抗人白細胞介素-8抗體的雜交瘤細胞的篩選必須通過分子檢測(2014·天津，4B)(

)12.21三體綜合征的診斷必須通過分子檢測(2014·天津，4D)(

)13.培育草莓脫毒苗所采用的主要技術是組織培養(2012·廣東，2A)(

)14.去除植物細胞的細胞壁和將動物組織分散成單個細胞均需酶處理(2008·全國Ⅰ，5B)(

)√

×

√

√

9.應用DNA探針技術，可以檢測轉基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(2011·四川，5D)(

)10.動物的生長激素基因轉入植物后不能表達(2010·江蘇，18C)(

)×

×

第23頁，課件共33頁，創作于2023年2月15.培養保留接觸抑制的細胞在培養瓶壁上可形成多層細胞(2010·浙江，4A)(

)16.動物雜交瘤細胞產生單克隆抗體體現了細胞的全能性(2012·江蘇，22C)(

)17.體細胞雜交技術可用于克隆動物和制備單克隆抗體(2011·江蘇，14B)(

)18.單克隆抗體技術可以用于治療老年癡呆癥(2010·江蘇，17C)(

)√

×

×

×

第24頁，課件共33頁，創作于2023年2月2008年［生物—選修3現代生物科技專題］（15分）回答下列有關動物細胞培養的問題：（1）在動物細胞培養過程中。當貼壁細胞分裂生長到細胞表面

時，細胞會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的

。此時，瓶壁上形成的細胞層數是

。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是

。（2）隨著細胞傳代次數的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現

現象；但極少數細胞可以連續增殖，其中有些細胞會因遺傳物質發生改變而變成

細胞，該種細胞的黏著性

，細胞膜表面蛋白質（糖蛋白）的量

。（3）現用某種大分子染料，對細胞進行染色時，觀察到死細胞被染色，而活細胞不染色，原因是

。（4）檢查某種毒物是否能改變細胞染色體的數目，最好選用細胞分裂到

期的細胞用顯微鏡進行觀察。（5）在細胞培養過程中，通常在

條件下保存細胞。因為在這種條件下，細胞中

的活性降低，細胞

的速率降低。⑹給患者移植經細胞培養形成的皮膚組織后，發生了排斥現象，這是因為機體把移植的皮膚組織當作

進行攻擊。⑴相互接觸接觸抑制單層（或一層）胰蛋白酶⑵衰老甚至死亡不死性降低減少⑶由于活細胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進入活細胞內，故活細胞不能著色（或由于死細胞的膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進入死細胞內而著色）⑷中⑸冷凍（或超低溫、液氮）酶新陳代謝⑹抗原第25頁，課件共33頁，創作于2023年2月2010年[生物——選修模塊3：現代生物科技專題](15分)請回答：（1）植物微型繁殖技術屬于植物組織培養的范疇。該技術可以保持品種的

，繁殖種苗的速度

。離體的葉肉細胞在適宜的條件下培養，最終能夠形成完整的植株，說明該葉肉細胞具有該植物的全部

。(2)把試管苗轉接到新的培養基上時，需要在超凈工作臺上進行，其原因是避免

的污染。（3）微型繁殖過程中，適宜濃度的生長素單獨使用可誘導試管苗

，而與

配比適宜時可促進芽的增殖。若要抑制試管苗的生長，促使愈傷組織產生和生長，需要使用的生長調節劑是

(脫落酸、2，4-D)。（4）將某植物試管苗培養在含不同濃度蔗糖的培養基上一段時間后，單株鮮重和光合作用強度的變化如圖。據圖分析，隨著培養基中蔗糖濃度的增加，光合作用強度的變化趨勢是

，單株鮮重的變化趨勢是

。據圖判斷，培養基中不含蔗糖時，試管苗光合作用產生的有機物的量

(能、不能)滿足自身最佳生長的需要。(5)據圖推測，若要在誘導試管苗生根的過程中提高其光合作用能力，應

(降低，增加)培養基中蔗糖濃度，以便提高試管苗的自養能力?！敬鸢浮竣胚z傳性、快、遺傳信息；（2）微生物；（3）下生根、細胞分裂素、2,4-D；（4）逐漸減小先增加后下降、不能；（5）降低第26頁，課件共33頁，創作于2023年2月2012年40.[生物——選修3現代生物科技專題]（15分）根據基因工程的有關知識，回答下列問題：（1）限制性內切酶切割DNA分子后產生的片段，其末端類型有

和

。（2）質粒運載體用EcoRⅠ切割后產生的片段如下：為使運載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內切酶切割，該酶必須具有的特點是

。（3）按其來源不同，基因工程所使用的DNA連接酶有兩類，即

DNA連接酶和

DNA連接酶。（4）反轉錄作用的模板是

，產物是

。若要在體外獲得大量反轉錄產物，常采用

技術。（5）基因工程中除質粒外，

和

也可作為運載體。（6）若用重組質粒轉化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞，原因是

。40.（1）黏性末端；平末端（2）切割產生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產生的相同。（3）大腸桿菌；T4（4）mRNA（或RNA）；cDNA（或DNA）；PCR（5）噬菌體；動植物病毒（6）未處理的大腸桿菌吸收質粒（外源DNA）的功能極弱。第27頁，課件共33頁，創作于2023年2月第28頁，課件共33頁，創作于2023年2月第29頁，課件共33頁，創作于2023年2月資料乙：T4溶菌酶在翁度較高時易失去活性，科學家對編碼T4溶菌酶的基因進行了改造，使其表達的T4溶菌酶的第3位的異亮氨酸變為半胱氨酸，在該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成了一個二硫鍵，提高了T4溶菌酶的耐熱性。第30頁，課件共33頁，創作于2023年2月40．(2013·課標全國Ⅱ，40)[生物——選修3：現代生物科技專題](15分)甲、乙是染色體數目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時含有A和B的新型藥用植物?；卮鹣铝袉栴}：(1)為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用________酶和________酶去除細胞壁，獲得具有活力的________，再用化學誘導劑誘導二者融合，形成的融合細胞進一步培養形成________組織，然后經過________形成完整的雜種植株。這種培育技術稱為________。(2)上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指_________________________假設甲與乙有性雜