微生物檢驗第六章球菌第1頁，課件共21頁，創作于2023年2月腦膜炎奈瑟菌臨床意義致病物質脂多糖、莢膜、菌毛、內毒素所致疾病普通型

暴發型慢性敗血癥型2.三種臨床類型1.流行性腦脊髓膜炎我國A群為主第2頁，課件共21頁，創作于2023年2月菌毛、外膜蛋白、蛋白水解酶、脂多糖、鐵調節蛋白淋病人類是淋病奈瑟菌的唯一宿主。主要通過性接觸引起泌尿道和生殖系統炎癥

新生兒淋菌性結膜炎新生兒由產道感染，1%硝酸銀滴眼。致病物質淋病奈瑟菌臨床意義第3頁，課件共21頁，創作于2023年2月1.形態染色革蘭陰性雙球菌直徑0.6~1.5μm形似雙腎或咖啡豆樣，凹面相對無動力，無芽胞，某些菌種形成莢膜三、生物學特性第4頁，課件共21頁，創作于2023年2月2．培養特性需在培養基中添加羊血、兔血或血清。需氧生長，初次分離需5~7%CO2和高濕度。最適生長溫度為35~37℃，低于30℃不生長，血瓊脂平板或巧克力瓊脂平板上呈光滑、濕潤、透明或半透明、直徑1~2mm的不溶血、圓形、灰蘭色菌落。第5頁，課件共21頁，創作于2023年2月3．生化特性氧化酶陽性，觸酶陽性（除延長奈瑟菌外）。對糖分解能力、硝酸鹽還原能力和DNA合成酶不同，常作為菌種間的鑒別依據。第6頁，課件共21頁，創作于2023年2月4．抵抗力對寒冷、干燥和熱的抵抗力弱，對化學消毒劑敏感。對青霉素敏感但近年來由質粒介導的β內酰胺酶所致的耐藥在淋病奈瑟菌中產生較多。第7頁，課件共21頁，創作于2023年2月第8頁，課件共21頁，創作于2023年2月標本采集無菌方法抽取腦脊液、關節液、血液、瘀點穿刺液等標本。采集后立即送往實驗室。用血平板進行床邊接種后置35℃孵育。血液標本接種在血液培養瓶中置35℃孵育。標本運送時需要35℃保溫。第9頁，課件共21頁，創作于2023年2月標本直接檢查直接涂片檢查腦脊液直接或經離心后取沉淀涂片。皮膚瘀點滲出液涂片。革蘭染色后顯微鏡下見白細胞內外的革蘭陰性雙球菌，可報告“檢出革蘭陰性雙球菌，疑似腦膜炎奈瑟菌”。有助于流行性腦脊髓膜炎早期診斷。第10頁，課件共21頁，創作于2023年2月分離培養鑒定

腦脊液標本：接種在巧克力瓊脂或羊血瓊脂平板。咽拭子或鼻咽拭子：接種在選擇性培養基上如改良的MTM、NCY等培養基。血液標本：經增菌培養基增菌培養后，移種至巧克力瓊脂或羊血瓊脂平板上。置5~7%CO235℃孵育，每隔24h觀察平板。第11頁，課件共21頁，創作于2023年2月鑒定初步確定為奈瑟菌屬直徑1~2mm，灰褐色、光滑、半透明、稍扁的菌落涂片革蘭染色見陰性雙球菌氧化酶試驗陽性葡萄糖和麥芽糖發酵試驗陽性、其他糖類發酵陰性。用分型血清確定血清型別。平板上沒有發現菌落需繼續觀察72h后無菌生長可報告為陰性。第12頁，課件共21頁，創作于2023年2月1．檢驗程序第13頁，課件共21頁，創作于2023年2月2．標本采集

陰道和宮頸分泌物：用無菌塑料棒滌綸拭子，伸入陰道后穹隆或宮頸內1cm處停留10~15秒時間，蘸取。采集尿道分泌物：棄去前段膿性分泌物，留取后段作為標本。新生兒結膜炎時應采取眼結膜表面分泌物。第14頁，課件共21頁，創作于2023年2月3．標本直接檢查標本采集后涂片、革蘭染色、顯微鏡檢查第15頁，課件共21頁，創作于2023年2月4．分離培養與鑒定選擇培養基如MTM，Martin-Lewis（ML），或NYC。置于5%CO2氣體條件下35~37℃孵育。每隔24h觀察平板。第16頁，課件共21頁，創作于2023年2月（1）形態和生化鑒定可疑菌落直徑0.5~1mm，灰褐色、光滑、半透明呈露滴狀凸起的菌落。確認將菌落涂片，革蘭染色見革蘭陰性雙球菌氧化酶和觸酶試驗陽性葡萄糖發酵試驗陽性，其它糖類陰性培養需觀察72h后無菌生長可報告為陰性。第17頁，課件共21頁，創作于2023年2月（2）免疫學鑒定直接熒光染色。凝集試驗或免疫滲濾技術。（3）分子生物學鑒定檢測靶片段的基因隱蔽性質粒、染色體基因探針、抗淋病奈瑟菌胞嘧啶DNA甲基轉移酶基因、透明蛋白(opa)基因、菌毛DNA探針、rRNA基因探針和porA假基因。基因探針雜交、核酸擴增。第18頁，課件共21頁，創作于2023年2月卡他莫拉菌（M.catarrhalis）可存在于健康人群的上呼吸道近十年來報道導致中耳炎、鼻竇炎、慢性阻塞性肺炎在免疫抑制和ICU的患者可導致菌血癥是社區呼吸道感染的主要病原體之一。

第二節卡他莫拉菌第19頁，課件共21頁，創作于2023年2月臨床分離從中耳炎或鼻竇炎患者穿刺抽取標本呼吸道感染患者應采取合格痰標本或支氣管灌洗液口咽部位存在卡他莫拉菌可污染痰液標本痰液標本直接涂片革蘭染色如出現多個中性粒細胞、柱狀上皮細胞以及大量的直徑為0.5~1.5μm革蘭陰性雙球菌可懷疑卡他莫拉菌感染。

第20頁，課件共21頁，創作于2023年2月培養及鑒定在血液瓊脂