藥本免疫球蛋白

1890Behring和北里在德國Koch實驗室從豚鼠體內發現了第一種抗體：白喉抗毒素，從而挽救了成千上萬的白喉患兒，使死亡率從60%降到26%。獲1901年的第一屆諾貝爾獎。抗體的發現免疫球蛋白的發現ImmuneseraNormalsera***免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)即抗體(Antibody，Ab)：是由B細胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細胞所產生的一類的糖蛋白。主要存在于血液和組織液中，是體液免疫的重要效應分子。有分泌型（SIg）和膜型（mIg）概述

免疫球蛋白的分子結構——***基本結構

Ig的基本結構是“Y”形四肽鏈

兩條相同輕鏈二硫鍵連接兩條相同重鏈

即Ig單體（一）重鏈和輕鏈重鏈（heavychain,H）：450～550個氨基酸殘基***分為：γ、α、μ、δ和ε鏈，對應的五類Ig分別為IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。輕鏈（lightchain,L）：210個氨基酸殘基***分為κ、λ鏈，將Ig分為兩型：κ、λ型

一個天然Ig的L鏈型別總是相同的，同一個體存在

L鏈是κ或λ鏈的抗體分子。免疫球蛋白的基本結構（二）**可變區和恒定區可變區（Variableregion，V）

VH：H鏈近N端1/4～1/5

VL：L鏈近N端1/2恒定區（constantregions，C）CH：H鏈C端3/4～4/5包括CH1～CH4CL：L鏈C端1/2

高變區（hypervaribleregion，HVR）或互補決定區(complementarydeterminingregion,CDR)：即VH和VL各含有3個氨基酸組成和排列順序高度可變的區域。組成Ig的抗原結合位點，識別并結合抗原。骨架區（Frameworkregion，FR)CDR以外的區域，維持高變區的空間構型。

FR1CDR1FR2CDR2FR3CDR3FR4V區**高變區和骨架區HypervariableandFrameworkRegionsinL-&H-Chains高變區抗原

抗體CDR表位AbAg抗體與抗原結合抗體的特異性（Theantibody,amoleculewithmanyfaces）（三）*鉸鏈區（Hingeregion）位置：CH1和CH2之間特點：富含脯氨酸，易伸展彎曲，改變兩臂間距離

存在于IgD、IgG、IgA功能：①有利于Ab與Ag的結合；②有利于Ab與補體的結合（四）***結構域（domain）或功能區概念：Ig分子的H鏈和L鏈通過鏈內二硫鍵折疊成的環形結構。每個結構域一般具有相應的功能。VH+VL結合抗原CH1+CL同種異型的遺傳標記(IgG)CH2(IgM)CH3補體的結合位點(IgG)CH3結合FcR(M、中性粒細胞、NK)(IgE)CH2+CH3結合FcR(肥大細胞，嗜堿性粒細胞)與抗原結合的部位同種異型遺傳標記補體結合位點結合FcRIgG、IgA和IgD有四個功能區；IgM和IgE有五個功能區VH、CH1、CH2、CH3CH4二、其他成分——J鏈和分泌片1.*J鏈（joiningchain）化學本質：富含半胱氨酸的多肽鏈，漿細胞合成功能：將單體Ig分子連接成多聚體存在：（二聚體）sIgA、（五聚體）IgM2.*分泌片（SecretoryPiece，SP)來源：黏膜上皮細胞合成分泌化學組成：糖肽鏈。作用：只存在于sIgA中a.幫助sIgA穿越黏膜b.保護sIgA免受蛋白酶的水解作用JchainSPSIgA二、其他成分——J鏈和分泌片三、***水解片段1.木瓜蛋白酶（papain）水解部位：重鏈鏈間二硫鍵近N端水解片段：2個Fab片段（抗原結合片段）1個Fc片段（可結晶片段）木瓜蛋白酶FcFabFab：抗原結合片段Fc：可結晶片段1價2.胃蛋白酶（pepsin）水解片段水解部位：重鏈鏈間二硫鍵近C端水解片段：1個F(ab’)2片段：結合Ag（雙價）pFc’片段：無生物學活性胃蛋白酶pFc’F(ab′)22價三、***水解片段一、外源因素性因素所致的異質性免疫球蛋白的異質性二、內源因素所致的異質性免疫球蛋白既可結合抗原，又可作為抗原，激發機體的免疫應答，因而也是一類抗原物質。利用血清學方法測定和分析免疫球蛋白抗原性予以分類，稱為免疫球蛋白的血清型。Ag1Ab1（Ag2）Ab21.同種型（isotype）同一種屬所有個體的Ig分子共有的抗原表位，為非遺傳性標志。表位存在于Ig的C區，表現在Ig的類、亞類，型和亞型上。類：在同一種屬所有個體內，根據重鏈C區抗原特異性將Ig分為五類。亞類：同一類Ig中，根據重鏈抗原特異性及二硫鍵數目和位置不同分為亞類；IgA有2個；IgG有4個；IgM有2個。型：在同一種屬所有個體內，根據IgL鏈C區抗原特異性不同，分為兩型：κ型、λ型。亞型：同一型Ig中，根據輕鏈C區N端氨基酸排列的差異又分為亞型。免疫球蛋白的分類2.同種異型（allotype）指同一種屬不同個體間Ig分子所具有的不同抗原表位，為個體性標志。表位存在于Ig的C區和V區。3.獨特型（idiotype，Id）指每個Ig分子所特有的抗原特異性標志，其表位又稱為獨特位。表位存在于V區。

***免疫球蛋白的生物學功能V區特異性識別、結合抗原（中和作用；阻止細菌黏附）

C區激活補體經典途徑和旁路途徑細胞親嗜性：調理作用；介導ADCC；介導Ⅰ型超敏反應介導穿越胎盤和黏膜：IgG；SIgAIgV區的功能：特異性識別、結合抗原中和作用IgC區的功能——激活補體細胞親嗜性調理作用：指抗體促進吞噬細胞吞噬細菌等顆粒性抗原的作用。抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用（antibodyDependentcell-mediatedcytotoxicity，ADCC）

是指表達FcR的細胞通過與抗體的Fc段結合直接殺傷被抗體包被的靶細胞。介導Ⅰ型超敏反應：參與抗體為IgEIgG含量最高，半衰期最長是抗菌、抗病毒、抗毒素的主要抗體是再次體液免疫應答產生的主要抗體。唯一能通過胎盤的抗體。激活補體、調理作用、ADCC作用***各類Ig的主要特性和作用IgM

分泌型為五聚體，分子量最大。是個體發育中最早合成的抗體。是體液免疫應答中最早產生的抗體經典途徑激活補體的能力最強天然血型抗體為IgM

單體IgM是BCR之一IgA血清型：單體，主要存在于血清中分泌型（SIgA）：二聚體，主要存在于乳汁、唾液、淚液以及呼吸道、消化道和泌尿生殖道黏膜表面。是粘膜局部抗感染的主要抗體。嬰兒可從母乳中獲得sIgA，是重要的自然被動免疫IgD膜型IgD（

mIgD）是B細胞成熟的標志mIgMmIgD成熟B細胞活化B細胞未成熟B細胞IgE血清中含量最低，半衰期最短參與Ⅰ型超敏反應參與抗寄生蟲免疫**人工制備抗體1.多克隆抗體（polyclonalantibody）天然抗原具有多種表位，每一種表位都可激活一個B細胞克隆，由其產生針對該表位的抗體。因而天然抗原進入機體，刺激機體產生的抗體是針對不同表位的混合抗體。優點：來源廣泛，制備簡單缺點：特異性不高，常出現交叉反應；同時不易大量制備。

帶有多個表位抗原針對不同表位的B細胞克隆增殖多種抗體的混合物（多克隆抗體）刺激小鼠2.單克隆抗體（monoclonalantibody，mAb）

Kohler和Milstein于1975年建立體外細胞融合技術，獲得針對單一抗原表位的高特異性抗體。GeoregesKohler(1946-1995)CesarMilstein(1927-2002)

2.單克隆抗體概念：由單一B細胞克隆所產生的，只作用于某一特定抗原表位的均一抗體。優點：結構和組成高度均一；抗原特異性及同種型一致；易于大量制備和純化；純度高，特異性強，效價高，少或無交叉反應。缺點：需要一定技術，雜交瘤技術和單克隆抗體技術；均為鼠源性抗體。應用：