A實驗植物光合與呼吸速率的測走一、實驗目的光合作用是地球上最重要的生命現象，它是唯一能把太陽能轉化為穂定的化學能貯藏在有機物中的過程，是維持地球上物質循環的關鍵環節，也是農作物產量形成的決定性因素。在植物科學研究中，經常需要測定光合作用。在光合作用(及呼吸作用)測定方法的發展過程中，曾經有過多次革新，其中包括測定干物質積累的稱重法，測定C02吸收(和釋放)的滴定法,測氯氣釋放的檢壓法和氧電極塗等。與這些方法相比，紅外線氣體分析儀堪稱較先進的方法。它不但快速、準確，而且可將測定信號變為電信號輸出，便于儀器的自動化和智能化。分子時，其輻射能量減少，被吸收的紅外線輻射能量的多少與該氣體的吸收系數(K)、氣體濃式中：E。：入射紅外線的輻射能量；E：透過的紅外線的輻射能量。ECO度。測定。常用的氣路系統有密閉式和開放式兩種(本實驗采用密閉式)。1、密閉式氣路系統：被測植物或葉片密閉在同化室中，不與同化室外發生任何的氣體交換，同化室內的CO2濃度因光合作用而下降，或由呼吸作用而上升，可用IRGA測定同化室內二、儀器AA閉路光合的工作原理為：由兩根氣路管在葉室和紅外線g分析儀之間連通形成回胳進行出植物光合作用速率等數據。A顯示顯示與闊P氣體輸出A氣體輸入紅紅外氏分應圉閉路光合的工作原理圖開路光合的工作原理為，由單根導氣管在紅外線C0?分析儀與葉室之間連通，形成開路。在開路光合測量時，通入的氣體濃度必須是巳知的(如P^OOppm),當數據采集完成后，讀出的P那么由儀器讀數在光合作用前后的變化值就是植物光合作用所吸收的C02的量 開路光合的光合速率測定公式為：式中各字母代表的參數與閉路光合時一樣，F代表氣體流量。工作原理圖如下穩定氣源輸入氣體輸出圏開路光合測呈工作原理圖三、實驗材料AA甜菜和丁香等植物的葉片(活體)。四、實驗步驟度值。預熱過程中氣泵開關應處在關閉的位置上。值趨向零點附近，調節紅外儀前面板“調零”旋鈕，顯示在“零點”位置。后，旋下跨度電位器上的保護蓋，調節跨度換鈕使顯示C02濃度與標氣濃度一致。5、將待測葉片放入同化室(氣室)，密閉后當CO?濃度穩定下降時，開始測定，讀取開始的At(或確定從測定開始到結束所需時間)，測定結束后測量葉片的面積(氣室面積)。uLLAtSS積(單位mO；V-同化室(包括氣略系統)體積(單系統容積是閉路光合中很重要的一項參數。它的值包括了葉室體積、氣路管容積和紅外線分析儀里氣室容積的總合，即V葉賽殊積+V分祈優7■實積AA植物材植物材料呼吸速率同化室體積同化室溫CO?濃度落差葉片面積測定時間五、注意事項1、密閉系統的最基本要求是嚴格密閉，不能漏氣，否則無法測定。2、紅外儀的濾光效果并不十分理想，水蒸氣是干擾測定的主要因素，因此，取樣器干燥管內的CaCb要經常更換，避免吸水溶解進入紅外儀，污染分析氣室，以保證測量精度，延長儀3、實驗期間，儀器使用后請立即充電，以確保后續實驗正常進行。AA實驗四植物體過氧化物酶的測定一、實驗目的：掌握用愈創木酚法測定過氯化物酶活性的方法。二、實驗原理：過氧化物酶廣泛頒布于植物的各個組織器官中。在有過氧化氫存在下,過氧化物酶能使愈創木酚氧化，生成茶褐色物質，可用分光光度計測量生成物的含量。uLAA零對照.另一只中加入反應混合液3mL,上述酶液ImL(如酶活性過高可適當稀釋)，立即開啟五、結果計算以每分鐘吸光度變化值表示酶活性大小，