NES1基因在胃癌中的表達(dá)及甲基化調(diào)控機(jī)制的研究的開(kāi)題報(bào)告一、選題背景和意義胃癌是一種高發(fā)于亞洲地區(qū)的惡性腫瘤，盡管在診療技術(shù)和治療手段方面有所提升，但其病情依然危及患者的生命健康。現(xiàn)有研究表明，胃癌的發(fā)生發(fā)展受到多種因素的影響，其中基因表達(dá)與DNA甲基化調(diào)控機(jī)制的異常與胃癌的關(guān)系備受關(guān)注。NES1基因是人體內(nèi)一種新型的抑癌基因，其能夠控制多種腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡以及癌細(xì)胞的侵襲能力，減緩腫瘤發(fā)展的進(jìn)程。但是，目前關(guān)于NES1基因在胃癌中的表達(dá)及其甲基化調(diào)控機(jī)制的研究還不充分，因此有必要對(duì)其開(kāi)展深入研究，為胃癌的防治提供新的思路和方法。二、研究目的本研究旨在探究NES1基因在胃癌中的表達(dá)及其甲基化調(diào)控機(jī)制，具體研究目的如下：1.研究NES1基因在胃癌組織及癌旁組織中的表達(dá)情況；2.分析NES1基因在胃癌細(xì)胞株中的表達(dá)情況，探討其與胃癌細(xì)胞的侵襲能力的關(guān)系；3.研究NES1基因的啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化狀態(tài)及其對(duì)NES1基因的表達(dá)的調(diào)控作用；4.探究DNA甲基轉(zhuǎn)移酶在NES1基因甲基化過(guò)程中的作用以及對(duì)胃癌細(xì)胞的影響。三、研究?jī)?nèi)容和方法1.研究樣本本研究將采集20例胃癌患者組織及其旁邊正常組織，同時(shí)選取人胃癌細(xì)胞株作為研究樣本。2.實(shí)驗(yàn)方法（1）qPCR：采用qPCR技術(shù)檢測(cè)NES1基因在不同樣本中的表達(dá)情況，分析其在胃癌細(xì)胞中的表達(dá)與侵襲能力之間的關(guān)系。（2）甲基化特異性PCR（MSP）：設(shè)計(jì)甲基化和非甲基化特異性引物，檢測(cè)NES1基因甲基化狀態(tài)并探究其對(duì)NES1基因表達(dá)的影響。（3）DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑處理：采用DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑處理胃癌細(xì)胞，檢測(cè)NES1基因表達(dá)情況的變化及其對(duì)癌細(xì)胞侵襲能力的影響。四、預(yù)期結(jié)果本研究預(yù)計(jì)得到如下結(jié)果：1.NES1基因在胃癌組織及癌旁組織中的表達(dá)情況有所差異。2.NES1基因在胃癌細(xì)胞株中表達(dá)下降與胃癌細(xì)胞的侵襲能力增強(qiáng)有相關(guān)性。3.NES1基因的啟動(dòng)子區(qū)域存在甲基化修飾，并且甲基化較高與NES1基因表達(dá)較低有相關(guān)性。4.DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑處理后，NES1基因表達(dá)增加，胃癌細(xì)胞的侵襲能力減弱。五、研究意義和創(chuàng)新點(diǎn)1.本研究將揭示NES1基因在胃癌中的表達(dá)和甲基化狀態(tài)，為胃癌的防治提供重要的理論研究基礎(chǔ)。2.結(jié)合NES1基因?qū)Π┘?xì)胞增殖和侵襲的抑制作用，本研究的結(jié)果將提供開(kāi)發(fā)新型的治療胃癌的靶向藥物的思路和方法。3.通過(guò)研究NES1基因的甲基化調(diào)控機(jī)制，本研究將為深入探究DNA甲基化在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用提供新的思路和方法。四、研究進(jìn)度安排1.月份：完成選題和開(kāi)題報(bào)告2.月份：完成研究方案設(shè)計(jì)和實(shí)驗(yàn)方法的優(yōu)化3.月份：完成樣本采集和搜集所需實(shí)驗(yàn)材料4.月份：完成qPCR技術(shù)和MSP技術(shù)的優(yōu)化和建立5.月份：完成實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的采集、整理和分析6.月份：完成全面數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析，撰寫(xiě)論文，準(zhǔn)備答辯材料7.月份：完成畢業(yè)論文答辯八、參考文獻(xiàn)[1]SunC.Y.,XuP.X.NE1andNES1/KLK10:uniqueproteinsorjustanotherkallikrein？CritRevOncolHematol,2010,73(1):68-83.[2]Chua,P.M.,Yan,M.,Yang,L.,etal.FrequentmethylationofSPINT2ingastriccanceranditsrelationshiptoclinicalfactors.Clinicalandtranslationaloncology,2014,16(3):266-273.[3]Tan,H.,Yan,F.,Wang,Q.,etal.HypermethylationofCPNE6ingastriccanceranditsrelationshipwithclinicopathologicalfeatures.Digestivediseasesandsciences,2012,57(5):1215-1221.[4]Smith,E.Y.,Jin,L.,Shenoy,A.K.,etal.TGFβreceptorIphosphorylationintherenaldistalconvolutedtubuleepitheliumregulatesbloodpressure.JournaloftheAmericanSocietyofNephrology,2013,24(6):966-973.[5]Xu,S.B.,Wang,Y.,Tai,Y.H.,etal.LossofAngiopoietin-like7diminishestheregenerativecapacityofrenal