附件9“煙草cDNA文庫構建及重要基因表達譜研究”項目評標情況一、招標要求1．項目意義建立煙草cDNA文庫，獲得大量的EST和全長cDNA序列是開展煙草功能基因研究的重要前提，是實施煙草基因組計劃重大專項的基礎性工作，將為煙草分子育種奠定基礎。今年針對“煙草cDNA文庫構建及重要基因表達譜研究”項目進行招標攻關，一是先期開展相關技術研究，為全面啟動煙草基因組計劃重大專項積累必要的技術、人才基礎，二是通過項目招標，引導行業(yè)內(nèi)外科研院所加大煙草遺傳育種基礎研究力度，推動煙草育種工程的順利實施。目前美國、歐盟等先后開展了不同煙草品種的EST測序，并已獲得了一定數(shù)量的煙草EST數(shù)據(jù)，但我國在煙草重要功能基因表達調(diào)控、代謝網(wǎng)絡等分子水平的基礎還相當薄弱。因此，充分利用我國的種質(zhì)資源，建立不同種質(zhì)在逆境誘導、不同發(fā)育時期以及不同組織器官的cDNA文庫，分離克隆與煙草生長、發(fā)育、抗逆、抗病、品質(zhì)等有關基因的全長序列、調(diào)控因子以及特異啟動子，研究其表達模式，進行基因表達產(chǎn)物分析、轉(zhuǎn)基因功能驗證及生理遺傳學分析，對于確定基因功能，進而分析這些基因在煙草遺傳改良中的利用價值和途徑具有重要意義。2．研究內(nèi)容（1）煙草cDNA文庫的構建及測序。構建普通煙草不同組織、不同時期的全長cDNA文庫；構建逆境誘導的特異組織的全長cDNA文庫；構建特定煙草品種（品系）特定組織的全長cDNA文庫；挑選克隆并進行測序。（2）基因挖掘與生物信息學分析。對測序數(shù)據(jù)進行拼接，對非重復全長cDNA序列進行功能注釋和功能分類及代謝網(wǎng)絡分析；建立煙草不同時期的基因表達譜以及全長cDNA序列的檢索和比對數(shù)據(jù)庫。（3）重要功能基因研究。利用生物信息學分析得到的相關基因的表達譜信息，鑒定重要的功能基因并開展關鍵基因的詳細表達譜研究和功能分析。3．經(jīng)濟技術指標（1）完成覆蓋煙草重要發(fā)育時期根、莖、葉、花等不同組織器官和特殊煙草種質(zhì)特異組織的全長cDNA文庫30個左右。通過全長文庫構建、全長克隆完全測序和數(shù)據(jù)拼接等，分離鑒定煙草的全長cDNA序列2萬條左右。（2）建立煙草基因表達、檢索及分析的基礎數(shù)據(jù)庫。（3）分離與煙草香氣、煙堿和有害物質(zhì)代謝作用網(wǎng)絡以及氮磷鉀營養(yǎng)高效、抗病、抗旱、耐鹽堿等性狀相關的基因及調(diào)控因子300個以上，其中鑒定關鍵基因5個以上，同時進一步分析表達譜并驗證其功能，獲得5個以上重要基因功能驗證的煙草材料。本項目的創(chuàng)新點在于，一是建立一批覆蓋煙草重要發(fā)育時期、不同組織器官和特殊煙草種質(zhì)的全長cDNA文庫，建成國際上規(guī)模最大、種類最多的煙草cDNA文庫，并測序獲得基因全長序列；二是分析基因表達特征譜，探索在特定材料、特定時期、特定組織活躍表達且起重要作用的基因，以確定重點研究分析并具有應用前景的煙草功能基因，將使我國在煙草功能基因組研究領域在國際上占有一席之地。本項目的關鍵技術在于，一是通過全長cDNA文庫的構建及均一化，獲得高質(zhì)量的全長cDNA；二是通過煙草表達基因數(shù)據(jù)庫的開發(fā)，建成比較完善的煙草基因相關信息的檢索平臺；三是分離與煙草品質(zhì)、營養(yǎng)性狀相關的基因，并進行功能驗證。二、應標情況論本招棋標項柏目及罪內(nèi)容歷在行邊業(yè)內(nèi)砍外產(chǎn)掩生了怪巨大偶反響因，行掉業(yè)內(nèi)定外科黨研院策所對管標書君響應神非常配踴躍趕，通絨過煙竊草險全長造cD樂NA鎮(zhèn)文庫揉的構伴建、剛基因厚表達料數(shù)據(jù)努庫的潑建立滑和重呢要性沃狀功攔能基蕉因的娃鑒定閉，有媽助于將從分肅子水考平解蠅析煙宅草生插長發(fā)勤育、員品質(zhì)袍形成叨、抗瓣逆、為抗病濱及物穩(wěn)質(zhì)代院謝的甘機制棵，為羨煙草框品種訴遺傳扇改良收鑒定游堅實窩的理丙論基睡礎。江因此棟共有玉10殊家單貧位主室標應旁標，眨行業(yè)峽內(nèi)4匆家、健行業(yè)享外6舞家，宮加上可參標貌單位輪，共即有2鑰3家征單位悶參加井了這焦次投非標活酸動。婆三、看評標們標準渣鑒于鴿本項渾目是歲全面渡啟動配煙草峰基因餅組計痛劃重波大專娘項的階基礎遍研究葉工作背，攻些關任揪務要年求較貢高，疑投標寬單位遺必須臨具有月較好僚的研伍發(fā)能猜力、視切實維可行哄的技盲術路澇線和巾較好逐的組膠織運踏作模遣式。捕評標驢標準乎是基稍于以史上考霜慮彎制定躬的斬。栗評標續(xù)標準屑（附駕后）純由三孔部分芳內(nèi)容開組成音：惕1．費研發(fā)鉤能力送。踐包括伐工作跟基礎罩、技刷術力污量和今設備哲條件詳。嗽2．研技術乎方案螺。包靜括軌現(xiàn)狀熟分析漸、研獄究內(nèi)惹容、拆技術邁路線策、技男術指羞標和螺創(chuàng)新鏡程度智。凡3．虎組織能運作崇。包悉括白運行涼機制購、進饑度安惹排和帳經(jīng)費擔預算晶。幻三部旁分的返權重倦設定鵲為3妄0案∶丙4別0拒∶插3忘0兩。燦四、墳評標局意見丘第一偉名：寸中國健農(nóng)業(yè)跨科學比院煙修草研材究所萄，綜啊合評柜分：巧89愈.7燕分。示第二牛名：百河南瞧農(nóng)業(yè)桶大學漆國家粗煙草跑栽培夫生理庸生化梯研究牧基地推，綜勝合評皇分：孟86料.7姐分。木第三害名：革北京依華大決煙草角基因風研究客開發(fā)河中心子，綜特合評番分：密82鎖.2建分。舒3家灘中標善候選輕人均毯對項桐目提哥出的貫主要能研究業(yè)內(nèi)容腹和經(jīng)恒濟技忘術指騎標進彎行了殖較好竊的響螞應蠶，課技術思方案微較好愁的把腸握了畏招標暮項目制的技盾術要殺求移，邪提出捉的技固術路彎線基甩本合皺理，僻并有令一定沿創(chuàng)新水性。圓3家枝中標到候選框人均柔采用惰行業(yè)煌內(nèi)外獨聯(lián)合洽攻關謊的模槐式，洲充分斤利用丟各方島的技榜術力洲量和賞設備絡條件搶，倡優(yōu)勢訪互補揭。古中國行農(nóng)業(yè)察科學篩院煙疤草研引究所作（青消州煙菌草研緞究所襲）汪有良消好的銀煙草抬育種套工作擱經(jīng)歷肉，有捷豐富嬸的煙少草遺著傳資橋源拴和較釋好的宰技術隆儲備釋，錄但還私需加稈強輪cD弟NA深序列附分析滿、尋cD耽NA異文庫廈構建斥及生把物信諒息學返方面先研究脾力量排。占國家羞煙草遮栽培籠生理皺生化薄基地偉在煙疏草側腺毛擊cD夸NA飾文庫符構建屢、煙賢草遺跟傳轉(zhuǎn)鳴化、孕煙堿塌合成記、品杯質(zhì)改雄良等嘴方面送有較鉤好的棚研究浴基礎模，錯參標皮單位煙在c恭DN壩A序爬列分啊析及壯生物層信息倚學方炭面具觀有享一定號優(yōu)勢甩。睬北京您華大功煙草燃基因赴研究億開發(fā)穴中心椅曾參模與過毫其他升作物雙的基域因組循計劃杏，基茄因測幼序方多面實陡力雄膜厚，覽但投漂標搬內(nèi)容要相對副簡單泛，對巖cD壁NA當文庫牙利用根等后吸續(xù)工劑作需削要加最強隱。爪為確穴保該茄項目講的順鮮利實掩施，患評標干委員叉會建揀議第番一名獨與第柳二、身三名息聯(lián)合齡攻關務。箏《爬煙草島cD屋NA謊文庫姓構建瞞及重甘要基大因表倒達譜置研究作》項村目評險標細核則楊標書熄序號世招標高單位旱研發(fā)誰能力君(愉30號分繁)域技術勇方案剪(論40瑞分賄)幫組織虎運作責(之30字分臣)冶總分摧排名頁工作拌基礎絨（逃10匠分）坑技術毯力量拒（櫻10耽分）講設備虎條件勉（初10視分）說現(xiàn)狀低分析滾（1婦0分危）墻研究拒內(nèi)容唯（齡5繡分）醋技術傘路線淚（蟲10姨分）本技術景指標竭（斜10浮分）容創(chuàng)新播程度挖（率5英分）組運行太機制費（磨10源分）約進度你安排殘（捧10滑分）方經(jīng)費交預算虧（徑10兩分）絨說明讀：拘1、真研發(fā)痛能力旱（3酒0分燥）下（1亡）工陵作基鼠礎（泥10辯分）土。投擔標單咸位（票包括赤聯(lián)合刊投標籌單位頂）以權前應迎完成配過相滑關研聲究工春作；德具備王研究毛所需塵要的瓣材料超基礎關；已釣建立軍起較已完整辜的技亡術平烘臺。眉（2限）技威術力瞧量（盜10籃分）瑞。項庸目負也責人藝須具點有較必高的明專業(yè)紅技術嶺水平睡，業(yè)姻績突田出，晶有較桃強的掛組織作協(xié)調(diào)票能力摩；項書目參遷加人枝員技蘆術研瑞究水昂平高兩，專淚業(yè)配婚置合寬理，喜技術堂力量筑能夠哭保證處項目郵實施橋的需蘆要。技（3漂）設浙備條忌件（蠶10述分）察。投倉標單已位應帶具備露項目雅研究淹開發(fā)青需要啦的儀魯器設亂備，瓶具有擱良好鴉的研半發(fā)條研件和智基礎陳設施把。東2、誕技術易方案欣（4對0分事）檢（1汪）現(xiàn)得狀分籃析（或10避分）賣。勢A.書準確厭、全制面地還了解扇和分絡析國派內(nèi)外余該項腸目技導術領文域的黃研究稈現(xiàn)狀對和發(fā)愛展趨完勢，船對存闖在的擦問題列有較襲深刻曾的了迷解（朵5分功）。泉B.爭項目垂的研婦究內(nèi)千容符滲合行洲業(yè)的斃可持夜續(xù)發(fā)砌展方償向，壺符合中產(chǎn)業(yè)爪發(fā)展媽的需情求重渡點、溝熱點享和難些點，騎利于吹全面齡提升浩產(chǎn)業(yè)蜻技術鞠水平失，有疤非常滴好的偷應用類前景魂或市縮場前條景，唱研究綿結果間對煙閃草基壘因組唇計劃爐后續(xù)茶研究候具有蹈較好這的支找撐作蛇用（龜5分須）。除（2咳）研殿究內(nèi)五容（頃5分白）。汽涵蓋紛攻關蒸內(nèi)容攻，重敵點突奪出，枯關鍵碌問題衣選擇械準確惜。筒（3披）技睬術路爆線（俯10該分）刺。技栽術路淡線具褲有科干學性晴、可佩行性堤，方享案可鑄靠，闊又具游有先秩進性湖和創(chuàng)腐新性商。具（4盒）技溜術指比標（含10璃分）幅。技蠟術指聲標合乘理，璃達到淺國內(nèi)僚或國懼際先做進水艷平。飛符合抄攻關集目標頸，構控建c哄DN僑A文酬庫3境0個電左右蕩，分確離鑒連定全廈長c儉DN玻A序譯列2犁萬條什左右葉，鑒僚定關黑鍵基奮因5蠟個以協(xié)上。委（5亞）創(chuàng)擺新程貸度（再5分躍）。述總體像技術朝水平食填補憶國內(nèi)泉空白明或重業(yè)點突斗破。快3、巖組織帖運作惠（3過0分寧）暑（1宅）運選行機積制（普10米分）坐。投示標單岸位須恰具有圍良好軌的運鑄行機駛制，量明確和項目皮實施蔥的組桶