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文檔簡介

過氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)簡介:過氧化物酶(Peroxidase,簡稱POX或MPO)是由微生物或植物所產生的一類能催化很多反應的以過氧化氫為電子受體催化底物氧化的酶氧化還原酶,主要存在于細胞的過氧化物酶體中,以鐵卟琳為輔基,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。Leagene過氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)是Leagene經改良后的PereiraPOX染色法,該染液可用于血液、骨髓或細胞涂片過氧化物酶染色,POX活性部位呈棕紅色至藍黑色顆粒,定位于細胞質中。組成:編號名稱DE00832x10mlDE00832x20mlStorage試劑(A):WG-KI固定液10ml20mlRT避光試劑(B):氧化WG-KI染色液B1:WG染色液1.9ml3.8mlRT避光B2:KI染色液0.75ml1.5mlRT避光B3:WG-KIbuffer7.5ml15mlRT臨用刖,B1:B2:B3混合,即氧化WG-KI染色液,即配即用。使用說明書1份自備材料:1、 載玻片2、 顯微鏡操作步驟(僅供參考):1、 血液、骨髓涂片干燥后,滴加WG-KI固定液布滿血膜,固定。2、 稍水洗,晾干或濾紙吸干。3、 滴加配制好的POX孵育液,室溫(20~25°C)避光孵育,水洗。4、 滴加氧化WG-KI染色液,染色。5、 棄染色液,濾紙吸干。6、 鏡檢。染色結果:陽性反應棕紅色全監黑色顆粒

陰性反應胞質呈藍色細胞核淡藍色或淡紫紅色粒細胞系除早期原粒細胞陰性外,分化好的原粒細胞以下階段細胞隨細胞成熟而陽性反應增強,衰老中性粒細胞反應程度減弱單核細胞系弱陽性,淋巴細胞系為陰性。漿細胞及巨核細胞均為陰性。嗜酸性粒細胞和Auer小體呈強陽性反應。陽性反應強度的判斷:陰性無顆粒弱陽性顆粒小,分布稀疏陽性顆粒略粗,分布密集強陽性顆粒粗大,呈監黑色,充滿胞漿臨床意義:1、 急性粒細胞白血病晚期的原粒細胞呈陽性,顆粒較少且大。2、 急性單核白血病細胞呈陰性或弱陽性,顆粒小且稀疏。3、 單核急性白血病呈陰性或弱陽性。4、 急性早幼粒白血病呈強陽性,某些早幼粒細胞呈陽性,惡性組織細胞呈陰性。5、 急性淋巴細胞白血病呈陰性。注意*項:1、 血液或骨髓涂片應新鮮,薄厚適宜,及時固定,否則會影響酶的活性。2、 POX孵育液易失效或降低陽性強度,即配即用,不宜久置。3、 細胞較多或陽性反應較弱時,可適當延長染色時間,但一般不宜超過3min。AML-M3細胞染色時,應適當縮短染色時間。4、 每次染色時,應采取健康人末梢血或骨髓涂片作為陰性對照。5、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手

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