自身抗體的檢測

及應用

鄂爾多斯市中心醫院檢驗科

曹青鳳

2012.9.19抗核抗體（ANA）的檢測與臨床應用

抗核抗體的定義傳統定義：針對細胞核成分抗原總稱。廣義定義：針對細胞內所有抗原成分的自身抗體的總稱。對ANA的理解不再局限于核成份，而是指核質和核蛋白的總稱。ANA測定原理和方法：間接免疫熒光法（IIF):現多以Hep-2細胞（人喉癌上皮細胞）為底物（Ag)，其以核質豐富而極大地提高了ANA檢測的陽性率和滴度。是系統性紅斑狼瘡（SLE）的標準篩選試驗。我們實驗室采用歐蒙熒光檢測系統，將1:100作為血清起始稀釋度，所以如果是低滴度的1:100陽性，只能視為一個臨界可疑值，臨床意義不大。ANA作為自身免疫性結締組織病的篩選試驗必須強調高滴度。ANA的靶抗原分布

整個細胞，包括細胞核、細胞漿、細胞骨架、細胞分裂周期蛋白等。ANA檢測的臨床意義

ANA可見于多種自身免疫性疾病，特別是結締組織疾病，常作為結締組織疾病的診斷，病情判斷和療效觀察的指標已證實ANA對很多自身免疫性疾病有診斷價值。ANA的靶抗原為細胞核內的不同生化成份，包括核酸、細胞核蛋白和核糖體蛋白。在不同疾病中，特別是風濕性疾病，其抗體譜有一定的特意性。在炎癥性風濕病中ANA陽性率在20%-100%之間，其中類風濕性關節炎中ANA陽性率最低，為20%-40%。所以，檢測ANA對于不同類型風濕病意義重大。⑴SLE活動性：占95%-100%，非活動性：占80%-100%。（2）藥物誘導的SLE：占100%。（3）混合性結締組織疾病：占100%。（4）其它風濕性疾病：占20%-50%

（5）進行性系統硬化癥：占85%-95%。（6）多肌炎和皮肌炎：占30%-50%。（7）干燥綜合征：占70%-80%。（8）慢性活動性肝炎：占30%-40%。（9）潰瘍性結腸炎：占26%。常見疾病其它還可見于：非結締組織疾病中也可出現陽性；正常人（特別是老年人）也可出現陽性，但滴度低，并且常表現為IgM型；高滴度ANA則高度提示自身免疫性疾病。ANA（＋）的原因風濕性疾病SLE多發性肌炎干燥綜合征硬皮病血管炎RA正常的健康人女性＞男性，出現率隨年齡而增加風濕性疾病患者親屬？孕婦藥物誘導慢性肝臟疾病慢性肺部疾病慢性感染血液系統異常惡性腫瘤SLE患者使用IIF法測定ANA陰性的一些解釋

技術方面臨床方面經皮質激素或免疫抑制劑治療。終末期腎病。隱蔽ANA：與循環中免疫復合物結合，沉積于組織。由于大量蛋白尿而從腎臟丟失。ANA的熒光染色型別細胞核：核均質型（DNA、組蛋白和核小體等）核顆粒型（Sm、uRNP、SS-A、SS-B、Ku、I和Ⅱ型周期蛋白）核膜型（板層素、gp120等）核仁型（SCL-70、PM-SCL、RNA多聚酶、原纖維蛋白等）核漿點型（著絲點、核多點及核少點型）細胞漿：胞漿顆粒型（線粒體、Jo-1、核糖體等）胞漿纖維型：波形蛋白、原肌球蛋白和肌動蛋白等分裂期細胞陽性：紡垂體、中間體、中心體等根據產生的熒光模型、靶抗原的分布部位分類如下：ANA篩查的方法間接免疫熒光法（IIF）基質組合為：HEP-2細胞+靈長類肝（猴）

核顆粒型：核粗顆粒型抗核抗體染色類型核仁型（nucleolar）均質性（homogeneous）AN伐A的冷熒光紋類型AN壩A試驗估的結慣果中冶一般擠會報閘告其恒分型籠，這宏些分宮型可唉能與抵某一幕特定勸的抗道原反悲應活茅性相疤關。分型

相關疾病

核仁型硬皮病著絲點型CREST綜合征周邊型SLE斑點型/彌散型混合性結締組織病（MCTD）抗雙界鏈DN醫A抗體坡（ds-D余NA）滔的檢展測與趴臨床游應用檢測脫：測將定抗ds-D裹NA以血拆鞭毛弊蟲屬憶的綠豎螢短毅膜蟲長為靶奔抗原鴨基質奶，可夢聯合幟使用HE糠p-攝2細胞箏及靈硬長類饅肝組株織檢稅測。自身燈抗原找：位旺于DN廈A脫氧截核糖瞧磷酸綿框架驅上。抗ds場DN叔A抗體熒光師模式社：綠蠅望短膜姜蟲：動表基體嬌均質起的或眾邊緣街亮度善增強磁的熒督光。He脂p-背2細胞：細邊胞核雨的均蠶質型孝熒光秤。臨床晌應用抗雙全鏈DN抱A抗體幻玉（ds-D損NA）是靠系統怖性紅貸斑狼瞞瘡的肌特異會性抗型體，娘其陽草性率私因檢凳測方寨法而睜異，料在40聰-9謊0%。但謎抗ds-D暑NA陰性鬧并不洽能排貧除患誕有SL組E的可給能性浸。抗ds-D秀NA抗體扯具有軟預測復價值刃，85演%的出晌現抗ds-D例NA抗體出的健北康人境在五游年內絕發展菠為SL叔E。已四證實夫抗ds-D玻NA抗體摘參與SL剃E的病宣理過餓程，疼在疾蛾病形脖成過歸程中則，抗ds-D疫NA和其鉛抗體加形成嗽的免新疫復雜合物甚沉積綁在皮殲下毛橋細血秤管、悔腎和辯其他傳器官懂內，宜激活債補體從系統或，從擾而導卡致組棵織損宰傷。抗體歐水平京與疾臨病活乏動度婦相關柏，隨壁著疾遭病活獻動的霞控制臂，抗ds-D番NA抗體擦滴度鋤可以父下降濤或消石失。AN趨A譜3檢測惜及臨歷床應罵用抗RN拘P/Sm抗體熒光所模式術：He劃p-蓋2片：細雙胞核混粗顆蜓粒，角核仁猶陰性翅。肝組舅織切擴片：同華上。熒光孫法不蜓能區帆分抗RN茫P和抗執體Sm。抗RN攤P/Sm抗體自身鞋抗原瓣：抗注原RN爭P和Sm屬于溜一組隙小核襲糖核從蛋白伸（sn閘RN捆P），由低學分子扭量的RN慕A和多結種蛋團白質筐組成斤，RN肯A中尿去苷（U-漏RN禁A）含量場較高灘。臨床幼意義群：高去滴度憂的抗RN鐵P抗體猾為送混合尺結締鈴組織波病（MC潛TD）的曬特征冷，發奇生率擱為9羨5~嫁10戀0%優。也晶可出慕現于SL材E，但總忌是與悼抗Sm抗體暖同時丟出現吉。抗Sm抗體誤對SL左E具有檔高度獅特異尋性，諸發生明率為累20慘~4筐0%矩。抗SS泥A／疑SS詠B抗體熒光饑模式He它p-手2片：細死胞核淹呈細幼顆粒裝熒光黑，核叫仁不康發光分。肝組辦織片：細兆顆粒螺熒光燈。抗SS吊A／付SS絲式B抗體自身救抗原據：SS疊A抗原霧是一末個小車核糖遵核蛋加白，剝由一陡個RN柿A分子此和兩件種不桌同的翅蛋白帆質組找成。括蛋白粱質的驢分子破量為告52KD和6尺0KD。抗滔體直杯接針先對蛋錄白質頂的抗衛原決桃定簇憑。SS抱B抗原子是分貪子量孔為4影8kD的磷據酸化總蛋白抬。臨床千意義典；最余常見曲于干額燥綜駛合征議（SS）,也見池于SL該E、原發彈性膽濟汁性乏肝硬步化（PB鴨C），先偶見里于慢區活肝個。抗SS蓬A抗體連在新姓生兒相紅斑互狼瘡跑的發庸生率剩幾乎辨為1迷00押%。核仁扯陽性(Nu儉cl刑eo孩la冠r)核仁環熒光市增強輔，核聲漿均禁質型棍--壇-Sc梳l-透70抗體命。核仁待均質籠型-食--PM青-Sc臨l及其柿他抗贊原抗洋體。核仁例細顆釋粒型險--壁-原峽纖維紙蛋白已抗體砍。核仁材粗顆病粒型思--憐-RN想A多聚鞏酶-災1抗他體。抗Sc效l-饒70抗體熒光鴨模式把：He砌p-葉2片：細鋸胞核桿幾乎孩均質盼的熒武光，亞核仁竟熒光帶加強串而且蹦也為味均質閉型，傷胞漿逗無熒爸光。肝組散織片；細李胞核碼顆粒菜或均肚質型巖熒光薯，常幼見到通細胞雪核熒顫光。抗Sc玩l-角70抗體自身堆抗原惠：為DN暈A拓撲標異構步酶1雕，分妥子量玻為1帖00KD毀。在DN息A雙鏈次的復施制和癢轉錄擁中起巧作用緩。臨床串意義伸：2好5~矛70班%的婆系統貓性硬荒化癥錯（PS啊S）彌切漫型擦患者討陽性借，局膀限型伴硬皮派病患巡壽者陰俗性。細胞斃漿陽桌性胞漿倘均質池型-臟--抗核再糖體菊抗體細顆浮粒-據--抗Jo捧-1抗體胞漿箏顆粒校型摟粗顆灘粒-距--AM景A抗體滴狀慮點狀菜--映-溶趙酶體甩抗體核周怒顆粒維--尾高爾贏基體辰抗體胞漿質纖維捕型賴細纖幕維-命--錫波形領蛋白唱抗體環狀處纖維西--牲-原禮肌球仆蛋白胃抗體針狀目纖維解--悉-肌塞動蛋闖白抗漿體抗核墾糖體丈抗體熒光習模式勵：He漿p-暢2：胞漿嫁細顆桿粒到炒均質逗狀、掙非常齊致密躺的熒役光餅。肝組鄭織片：島趕狀熒絡光。臨床鄉豐意義進：SL斯E的特會異性喬抗體決，與劈燕精神惑癥狀律有關永。抗Jo滔-1抗體熒光弦模式甜：He律p-酒2：胞漿扭顆粒惠到細狗塊狀樂熒光懼。肝組扯織片：胞慚漿中負弱熒嶺光。自身別抗原倉：組惹氨酰tR微NA合成敗酶。臨床維意義鑰：見政于PM即，發生粥率2礙5~捐35昨%。抗線仗粒體票抗體熒光駛模式呢：He索p-需2：胞漿鑄內粗竭的顆渠粒型踢熒光葬。大鼠譯腎組葬織切片偏：腎富小管僅明顯腹熒光怕，腎促小球呈熒光尚較弱確。抗線囑粒體拾抗體自身絨抗原漫：位款于真某核細澆胞線價粒體者膜的恐內面綠。線誓粒體至自身鳥抗原獵為2階-氧汪酸脫頑氫酶襯復合絹體的襯亞單頌位，揉為一忘組自縫身抗伴原，益其中泰與PB盾C有關嬸的包申括：（1爬）丙照酮酸混脫氫依酶復肅合體尖（PD錢C）（2至）支灘鏈2皇-氧幕酸脫掉氫酶講復合澇體（BC濫OA窮DC返）（3購）a-酮戊恰二酸碗脫氫量酶復愛合體暖（OG傅DC史）抗線妖粒體王抗體臨床珠意義簡：AM錄A-灑M2對PB脅C具有論診斷拐意義療。AM貍A亞型緒與疾齒病的扣相關皮性：AM致A-誕1：梅毒基、干均燥綜尿合征AM幅A-肅2：踢PB豪CAM霜A-違3：藥物松性紅海斑狼味瘡AM零A-悉4：溜PB祝C與AI病H重疊AM扁A-與5：屑SL餐E、自身話免疫鍵性溶動血性黃貧血AM癢A-味6：異煙土肼引方起的巖藥物忌性肝詳炎AM蘆A-網7：溫AI約HAM巾A-捐8：終AI油H、閉塞著性血皺栓性慕血管苗炎AM護A傅-9房誠：藥物共性肝劫炎AM兩A-斬10赴：S猛LE分裂新期細陣胞陽學性染色竟體陽鈴性-真--宗染色流體相糟關抗休體，那相關響疾病名？紡錘結體纖查維陽抄性-府--徒紡錘鉤體纖熄維抗毫體，絡如燕錫麥細巡壽胞型旋支氣土管肺裹癌中間襲體陽俱性-僵--隔中間屯體抗爆體，刊相關侮疾病辯？細胞貍兩極嗽陽性末--肥-中久心粒報抗體葉，相癥關疾各病？著絲敬點陽抽性-姐--抗著盤絲點煉抗體抗著歸絲點蓬抗體(A鑰CA尾)熒光戀模式鏟：He德p-認2：細胞侵核細光的、惡相同聰大小蘇的顆拌粒熒厘光，芹分裂緊期顆曲粒熒掌光帶先狀位僵于細榴胞中銅間。肝組誤織片：分令布于離細胞曲核的斜10請~2條0個牌顆粒督，熒桌光弱胡，易冊被忽貝略。抗著隨絲點摩抗體自身厭抗原捐：著痰絲粒際中的討三種求不同錫的蛋國白質海：著認絲點舌蛋白A、堵B、曬C，主要紹抗原悶為著炮絲點明蛋白B。臨床運意義賣：對您進行羽性系逮統性撞硬化轉癥亞畜型（CR蠟ES腿T綜合滲征）差有診家斷意延義。滅陽性興率8席0~妙95輩%。傳還可耗見于PB釘C、SS等。器官雁/組框織特疊異性蓄自身晉抗體抗中節性粒職細胞庸胞漿寧抗體勿（AN柱CA鈔）抗平姿滑肌鎮抗體抗角曬蛋白璃抗體抗肝薪腎微僚粒體闖抗體抗肝路細胞沫膜抗億原抗純體抗可弱溶性克肝抗仍原抗距體抗肝兄特異地性蛋橡白抗香體抗中地性粒氧細胞仇胞漿異抗體刺（胞緊漿型令）cA分NC樣A熒光龍模式博：猴肝：肝盾血竇肆區粒粉細胞睬強熒丑光，茂而肝皺細胞君陰性污。甲醛礦固定興的中豆性粒盲細胞：胞裹漿內她粗大圈到細匆的熒逼光顆摔粒。抗中阻性粒掠細胞番胞漿饅抗體雄（胞刪漿型脊）自身活抗原給：為屠絲氨綱酸蛋吧白酶階-蛋湖白酶深3（PR臟3）盛。該靶哥抗原抖為可逗溶性沈蛋白憂，存侍在于少正常篇中性朋粒細晝胞的錫嗜苯祖胺藍緣瑞顆粒籠中。臨床芹意義鴨：cA董NC擦A可見徒于多肯種系椒統性朋血管脹炎。獨主要濁見于We眨ng攏en濾er片’s肉芽蹦腫，提約占AN征CA陽性笑率的鋪80窄~9胳5%身。cA垮NC向A被認博為是善活動仆性We煙ng和en禍er摘’s肉芽洞腫和舌微多母動脈墾炎的乒特異憤和敏姐感的楊標志宴性抗應體。幕還見紹于Ch塑ur辨g-S勵tr蒸au頃ss綜合責征。抗中犧性粒殲細胞籠胞漿綿抗體層（核幣周型別）pA彈NC持A熒光攻模式莊：乙醇滔固定姨的中掘性粒條細胞：細慶胞核理周圍租平滑擺的帶禍狀熒躁光，農細胞嘴核陰迅性。猴肝：肝燥血竇吹區粒月細胞奶強熒時光，憑而肝節細胞釋陰性筍。抗中鄭性粒丑細胞芹胞漿醫抗體澆（核東周型鴉）自身氏抗原媽：主病要抗祝原為豆髓過米氧化澆物酶盈（MP寒O）扣，其他季抗原虹還有疫白細坐胞彈劉性蛋內白酶觸，組煉織蛋村白酶G、溶菌由酶及污乳鐵平蛋白劉等。臨床渡意義位：見龍于多典種系速統性母血管賭炎。江可見崖于We分ng軟en腳er經’s肉芽山腫、泥微多重動脈世炎、Ch巡壽ur乓g-S個tr蓄au堆ss綜合五征、播炎性籠腸病槽、自衡免肝鼠、系層統性下風濕嶄病（RA鄭、S皺LE膚、S繞S、稅PM至/D貍M）辟。抗平欣滑肌裝抗體（SM想A）熒光喪模式龜：大鼠箏胃組陸織，呈膊現肌衰膜、慕黏膜給肌層接和肌銷膜腺災體間坑收縮港纖維譽的明熊顯細株胞漿旱熒光寄。大鼠旦腎組耕織，腎熱小管既細胞多內原鋸纖維稼、腎以小球滲膜細涌胞及聲血管嗓肌層兄的熒些光。抗平古滑肌可抗體貿（SM王A）自身猴抗原達：主努要的朗靶抗崇原為怠肌動誦蛋白降，肌叮動蛋駛白可漏以單易體（G-肌動園蛋白迫）或畢聚合悅體（F-肌動豪蛋白槳）形秒式存碼在于羊微絲柳中，F-肌動懷蛋白鹽自身靈抗原蠅與自超免肝般關系短密切孤，而G-肌動雙蛋白含自身就抗原傍則與從酒精悼性肝歷硬化淘有關妻。臨床率意義桃：見飲于自影身免親疫性源肝炎惑、PB鐮C、酒精累性肝輩硬化諒。抗角杠蛋白你抗體（AK逝A）熒光憶模式問：大鼠娘食管毀，僅巴限于替上皮冊角質枕層的午較強艱的線卻性分秧層的銀均質木熒光企。抗角使蛋白有抗體桿（AK莫A）自身朝抗原率：絲角聚蛋語白（fi水la難gg津ri戚n）為AK迷A的靶如抗原硬。臨床黃意義犬：見炒于RA折，陽性紛率3洲6~嚼59緞%，棟特異筑性9忽5~垂99臟%。摧還是興一個銹潛在鹿的預脈后標圓志，湯高抗遺體滴儉度可襪能預拔示著飽較嚴后重的RA類型弱。抗肝鍬腎微眉粒體雖抗體（LK察M）有三痕種熒光疏模式印：LK蕩M-山1：肝細求胞胞韻漿明恰顯熒