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文檔簡介
第六章微生物的生長及其控制個體生長個體繁殖群體生長群體生長個體生長+個體繁殖由于微生物的個體極小,所以常用群體生長來反映個體生長的狀況第一節微生物純培養的生長一、獲得微生物純培養的方法純培養的概念:微生物學中將從一個細胞得到的后代稱為純培養獲得微生物純培養的方法:稀釋倒平板法劃線法單細胞挑取法利用選擇培養基培養法1.平板劃線分離法
用接種環以無菌操作沾取少許待分離的材料,在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線,如果劃線適宜的話,微生物能一一分散,經培養后,可在平板表面得到單菌落。2.稀釋倒平板法3.單孢子或單細胞分離法采取顯微分離法從混雜群體中直接分離單個細胞或單個個體進行培養以獲得純培養。在顯微鏡下使用單孢子分離器進行機械操作,挑取單孢子或單細胞進行培養。也可以采用特制的毛細管在載玻片的瓊脂涂層上選取單孢子并切割下來,然后移到合適的培養基進行培養。4.選擇性培養基分離法各種微生物對不同的化學試劑、染料、抗生素等具有不同的抵抗能力,利用這些特性可配制合適某種微生物而限制其它微生物生長的選擇培養基,用它來培養微生物以獲得純培養。微生物純培養分離方法的比較分離方法應用范圍平皿劃線法方法簡便,多用于分離細菌稀釋倒平皿法即可定性,又可定量,用途廣泛單細胞挑取法局限于高度專業化的科學研究利用選擇培養基法適用于分離某些生理類型較特殊的第二節微生物的生長規律㏒細胞數
延滯期指數期穩定期衰亡期單細胞微生物的典型生長曲線延滯期的特點生長速度常數為零細胞體積急劇增大細胞內的蛋白質和RNA尤其是rRNA含量增高,細胞呈嗜堿性合成代謝活躍,易產生誘導酶對外界不良環境條件敏感影響延滯期長短的因素接種齡接種量培養基成分
發酵工業上需盡量縮短該期,以降低生產成本.豐富培養基的營養成分,采用對數菌齡,加大接種量。在食品工業上,盡量在此期進行消毒或滅菌指數期的特點生長速度常數R最大細胞進行平衡生長酶系活躍,代謝旺盛影響指數期微生物增代時間的因素菌種營養成分營養物的濃度
發酵工業上盡量延長該期,以達到較高的菌體密度食品工業上盡量使有害微生物不能進入此期細菌研究中常用的三個參數繁殖代數(n)指數生長方式:1248……2n
設接種時細胞數為x1,時間為t1,到時間t2后,繁殖n代,細胞數為x2,它們之間的相互關系為:x2=x1*2n以對數表示:㏒x2=㏒x1+n㏒2㏒x2-㏒x1∴n==3.322(㏒x2-㏒x1)㏒2生長速度常數(R)
n㏒x2-㏒x1
R==t2–t1t2–t1代時(G)1t2–t1G==R3.322(㏒x2-㏒x1)穩定期特點:
1生長速率常數R等于0,菌體產量達到了最高值。2細菌分裂速率降低,細胞代謝活力降低,開始出現形態和生理特征的改變。3合成次生代謝產物。4細胞內出現儲藏物質,芽孢菌開始產生芽孢。5發酵代謝產物達到高峰。產生原因:
營養物尤其是生長限制因子的耗盡營養物的比例失調,如碳氮比不合適有害代謝廢物的積累(酸、醇、毒素等)理化條件(pH、氧化還原勢等)不合適衰亡期特點:
1R為負值2細胞的形態發生變化,出現不規則的衰退形3釋放次生代謝產物,芽孢桿菌釋放芽孢4菌體開始自溶產生原因:
生長條件的進一步惡化,使細胞內的分解代謝大大超過合成代謝,繼而導致菌體的死亡二、同步培養
1.概念同步培養(synchronousculture):是一種培養方法,它能使群體中不同步的細胞轉變成能同時進行生長或分裂的群體細胞。同步生長:以同步培養方法使群體細胞能處于同一生長階段,并同時進行分裂的生長方式同步培養物常被用來研究在單個細胞上難以研究的生理與遺傳特性和作為工業發酵的種子,它是一種理想的材料。同步威培養挖方法機械脅方法環境虜條件扛控制多技術離心潑方法過濾它分離堡法硝酸趙纖維鉗素濾器膜法溫度培養窯基成洪份控侄制光照浩和黑船暗交散替培鑰養硝酸妖纖維形素濾測膜法離心跳法三、筐連續滅培養連續獎培養(co催nt駐in驢ou放scu震lt蜓ur規e妻of寒m血ic持ro柏or半ga何ni伏sm養s)是在螞微生午物的額整個襲培養執期間購,通蓄過一拾定的胳方式鑄使微謝生物隨能以掠恒定棕的比爭生長遷速率盟生長揚并能訓持續福生長寶下去歸的一亞種培斜養方導法。連續諷培養區的基周本原朋則:目微生偽物培飄養過摩程中勾不斷棚的補衡充營昆養物壯質和增以同蓮樣的媽速率躁移出獎培養恩物連續茫培養苗類型恒濁慢連續涼培養恒化炭連續淋培養(一)恒化播連續項培養在整耀個培朵養過宵程中過通過蠅控制南培養娃基中偏某種魂營養樓物質猜的濃面度基陡本恒察定的妨方式以,保添持細壯菌的含比生旗長速慕率恒僵定,范使生唱長“模不斷鐘”進椒行。生長鞋速率申的控濫制因偽子:控一般圓是氨君基酸午、氨博和銨魂鹽等阻氮源迅,或帆是葡碎萄糖屠、麥眾芽糖券等碳犁源或杠者是補無機秀鹽,禾生長斃因子顧等物端質恒化驗器連忌續培臣養通德常用川于微膛生物勺學的息研究戒,篩偏選不皂同的炸變種氏。(二)恒濁歌連續儲培養通過滋連續垮培養亂裝置孫中的顆光電塊系統衰控制謝培養義液中口菌體舅濃度剪恒定墳、使喉細菌械生長鄰連續見進行興的一術種培桶養方頂式。用于菌體以及先與菌體塵生長勒平行的代燒謝產指物生逼產的承發酵棟工業(三)連續坡發酵犬與單悠批發湖酵相章比優點秋:縮短求發酵裁周期朗,提核高設附備利太用率農;便于李自動隨控制億;降低齊動力疲消耗炎及體線力勞蝴動強誦度;產品社質量既較穩碌定;缺點效:雜夾菌污件染和縫菌種座退化第三錦節儀影洽響微貞生物偶生長叨的主倦要因責素溫度氧氣輻射物理勾因素干燥滲透見壓超聲皮波與胖微波酸、隆堿與pH重金認屬及掙其化捏合物表面獵消毒勁劑有機屢化合啟物(進酚類備、醇借類、甩醛類店)鹵族底元素川及其委化合棒物表面呈活性倍劑(映新潔綱爾滅廁、杜脾滅芬友)化學卵因素染料抗代米謝藥棗物:供磺胺裕類等化學勒治療戲劑獸抗生搬素中草好藥有福效成慢分溫度不同外的微益生物呢生長倚的溫頌度范撫圍不悼同,獎根據壟生長氣與溫埋度的北關系灘,微絞生物怖的生芽長有然三個牙溫度譜基點芹,即最適勒、最細高、最低生長界溫度店,根丟據微肚生物縣的最棒適生犧長溫炸度的曾不同腐,可屬將微建生物屯分為忙:低溫割微生怕物、勺中溫濃微生份物和高溫碑微生閉物,它獲們的耕生長泳溫度咬如下辯表低溫菌中溫菌高溫菌最適生長溫度10-2025-30,37-4050-55最低生長溫度-10-510-2025-45最高生長溫度25-3040-4570-80高溫繡對微偵生物壯生長鐵的影傍響嗜熱刷微生價物的鈴生長初特性高溫泊菌在洪高溫拴下生港長的秒原因:見本書17善4頁抗熱炸的酶形,膜館中的擴高飽碧和脂打肪酸高溫指菌的劈燕生長遇特性慎:生長伙曲線帖的各摘個時淋期均未短暫神,因貌此常互會在于腐敗駱食品府中檢摩測不胸到,潔這在嫁食品體檢驗欠中要殃特別令注意影響蜂微生移物對抽熱抵婦抗力掛的因秋素:菌種調的遺臭傳特陣性菌齡微生童物的填數量基質揚的特咱性(駛組成陪、濃曲度、驅理化牲條件勵)加熱嚷的時蹲間與倒溫度(1假78頁)滅菌蛇與消泛毒的凡概念(18律6頁)滅菌慚是指屑采用拘強烈偷的理爹化因唇素使警任何斃物體孤內外襯部的味一切族微生勤物永靜遠喪鋒失其詠生長振繁殖拋能力伶的措霉施;絞消毒掃是一州種采團用較攤溫和哄的理糊化因棒素,練僅殺句死物億體中榨病原眨微生像物的鑰措施加熱鉛滅菌蔑和加酒熱消卵毒的軌方法揚:干熱老滅菌減法火焰歷滅菌紀法干燥盼加熱炸空氣延滅菌之法高溫貢滅菌于巴刃氏消敵毒法(2僵)常壓霸下努煮堡沸消諸毒法濕熱裕滅菌為法始間歇蕩滅菌猴法常規杯加壓被滅菌付法加壓旺下(高壓滑蒸汽借滅菌秩法)連續獵加壓祖滅菌畏法影響折加壓柳蒸汽舅滅菌太效果黨的因河素滅菌里物體善的含伐菌量滅菌映鍋內翻空氣砌的排繞除程圖度滅菌融物體頌的pH值滅菌礙對象治的體創積加熱遣與散肚熱的恥速度高溫弄對培截養基耳的影暑響及獻其防押止措寶施高溫杰對培扛養基巾的不焰利影醬響:形成沉淀郵物(逼有機難沉淀攜物如貼多肽親類,迅無機縫沉淀鳳物如模磷酸耳鹽)和;破壞營養卷;提高色澤蛙(褐纏變如指產生崇氨基幟糖等史);改變培養踩基的pH值;降低培養肌基的委濃度消除楚有害兇影響昂的措蜘施采用冶特殊活的加已熱滅賠菌法過濾扣除菌那法加入疫螯合搬劑低溫案對微差生物障生長恨的影修響低溫離微生債物耐課低溫挑的原艷因:胞內踐酶耐斃低溫餐;細脊胞膜脈中不攝飽和順脂肪超酸的具含量坊高。低于狹冰點鈔的溫或度對撲微生繁物的碌影響隙:書夏(17釋5)水分削的喪智失;芝冰晶材對細慣胞膜幼的物豆理損爪傷。速凍香、緩師凍與屬反復癢凍溶天對微依生物野細胞俗的影芹響低溫友的用織途菌種辨保藏液氮須的溫英度(-1古95禽℃)、廊干冰齊溫度夠(-7您0色℃)、-2錫0鈴℃和4頭℃(常醬加大淹分子燃保護昆劑如倦糊精懼、血池清白察蛋白逗等)食品左冷藏冷藏尖(0-爬4向℃)與衣動藏鄭(-1撿8懼℃)氧氣根據神微生霧物生露長與鈔氧氣葵的關強系,效可將跡微生挎物分蜻為以歇下幾渠種(很書12尊4)專性在好氧矛菌:在正爪常大弊氣壓蘭下(0.燦2巴)疼進行攀好氧丘呼吸移產能好氧灰菌劉兼性塞厭氧紫菌:錢以呼攝吸為求主,總兼營報發酵豎或無決氧呼燃吸產克能微好村氧菌斗:只敲能在0.感01蘿-0常.0紹3巴大嫁氣壓衫下生得活厭氧鎖菌遮耐墳氧菌帆:只桂能以艱發酵靠產能吼,但臥分子扯氧無虛毒害(專叉性)占厭氧陵菌:慕只能芬生長騾在無鉆氧或咱基本蒼無氧凳條件蠅下,奶氧劇親毒過氧倉化物勻歧化赤酶、遺過氧楚化氫激酶、揮細胞皆色素也氧化破酶的貞分布次情況氧氣關影響席微生偶物生宗長的武機制厭氧惠菌氧策毒害妄的機窩制:由于撒厭氧歉菌細南胞內慈缺乏SO繞D,無法船消除02.-,后逆者反宋應力誕很強狼,性淡質極熔不穩雞定,駐在細增胞內壁可破有壞各女種重慢要的織生物慘大分扶子和念膜,采也可卵形成阻其他揀活性濤氧化漿物,幅對生癢物非賣常有矛害好氧紹與耐賴氧菌友驅除02.-機制忌:H2O2(好氧姐菌)掛H2O+繩1/君202SO淘D2寒02.-+2黑H+H2O2+驕02好氧脖及耐蝕氧菌過氧池化物天酶(兩耐氧奪菌)2H2O輻射不同狂波長爸的射梳線對違微生貪物的溫作用醉不同,可累見光拘部分上(40粥0-閑80辨0納米耕)往烈往能浴被某周些光盞合微癥生物篇所利劇用,秋而波棋長較桶短的樹紫外昂線(13阿0-彼40穩0納米俗)、X-射線窮(0.敗06珍-1脈3.欲6納米栽)、r-射線速(0.陶01煉-0廚.1國4納米目)均扔可抑喚制甚原至殺奇死微戚生物裂。尤姐其是r-射線欠因作暈用距撥離較決遠、奧穿透袋力較都強而莫用于滲食品音的殺啊菌保僅藏。物理星殺菌:一圍類新指的冷歲殺菌汪技術肝,它寄在克快服熱端殺菌獅不足陸之處才的基肅礎上徐,運鍋用物濱理手唇段如澇電場柳、高椅壓、鞋電子嗚、光驗等的靜單一吊或兩捐種以朝上的晴共同盜作用墨,在甚低溫曾或常藥溫下著達到呆殺菌窮的目聞的。駁這種諸方法鴨不須部向食獲品中洞加入肢化學物物質曉,不首會使如菌體挎產生捎抗性隊,且恒條件剖易于兩控制辦,在宰保持蠶食品派自然寸風味崇的基鉤礎上蹤蝶,殺娃菌效籃果明雙顯。削常用誦的物貓理殺金菌的哀方法金有超棄高壓瞧脈沖塘電場貞殺菌和、脈敏沖強良光殺穿菌、祝半導兇體光框催化昌殺菌后,輻濾射殺璃菌干燥府(濕地度)水分約占套微生騙物細嗎胞組濤成的70洲-8緣瑞5%,環市境中勉缺水揀時(許干燥楚的環廟境)霧引起殲微生衰物細撐胞內狹蛋白做質的匪變性責和鹽講類濃渠度的醫增高跳,抑映制微厘生物虹的生伍長,怖甚至泛造成帳微生也物的廉死亡劍。干燥瓶對微順生物俯的作耗用受環憶境溫荒度、氏失水昂速度濾、菌圣齡、盡微生妄物所滋處基誕質等董條件鋤的影突響。干燥鋼用于遇食品當保藏耐的方些法可分高為兩添類,潮即自憑然干定燥(戰熏干嗎、曬聾干、念冷凍強干燥碗)和快人工優干燥透(常午壓干蘭燥如在熱風刷、噴坡霧、免凍結凱、微廳波等批;真朵空干仔燥如碌真空葛和冷劫凍真膽空干搶燥)滲透凈壓微生枝物生校長與并滲透越壓的逐關系(高宜滲透塞壓、套低滲筋透壓驚對微頃生物蘿生長似的影畜響)根據鄙微生鳳物對完高滲峽透壓毯耐性絡的不露同,獎將其詠分為陪以下董三類:高度味嗜鹽蒙細菌戴(20起-3排0%食鹽房誠溶液刑中生掀長)嗜鹽驕細菌等中等汽嗜鹽降細菌餐(5-得18狐%的食捧鹽溶扭液中惰生長丸)低等汁嗜鹽丑細菌遞(2-臂5%的食懼鹽溶直液中瞞生長向)耐鹽扛細菌惰(可墊在10斑%以下嘩的食竿鹽溶漆液中爪生長愧)耐糖擔細菌解(可數在60站%以下卡的含霸糖高闊滲溶道液中撐生長未)*普通凈微生秒物一精般在0.骨85撒-0港.9腿0的食疫鹽溶月液中踢生長pH袖值根據夜微生抗物生才長的伴最適pH值,俊將微餡生物副分為怎:嗜堿按微生懂物:剪硝化顛細菌眉、尿稠素分賞解菌各、多無數放系線菌耐堿辯微生袋物:蛙許多指鏈霉秋菌中性爪微生管物:即絕大慘多數饒細菌廢,一場部分喊真菌嗜酸東微生秤物:哥硫桿饑菌屬耐酸份微生挖物:從乳酸貓桿菌蒼、醋望酸桿客菌不同否的微怠生物默最適荷生長忌的pH值不嘆同,同一燈種微登生物低在不尊同的把生理大階段覺對pH值的種要求它也不獎同,在發拋酵工濾業中鹿,控敏制pH值尤囑其重紫要,離如黑作曲霉軟在pH顫2-咬2.格5主要黃產檸涌檬酸飯,pH墨2.險5-廢6.黨5以菌滾體生您長為或主,pH研7時以合成屯草酸信為主各類疫微生為物生攀長的嘩最適pH值:細菌野為6.傘5-叫7.初5,放泳線菌鍛為7.猛5-擾8.桃0,霉拘菌和州酵母態菌為4-不6酸堿割添加鄭劑的罪抑菌銜機理無機競酸可增泰加氫嗎離子橋的濃條度,襲引起銅菌體濤表面傷蛋白略的變各性和患核酸漲的水團解,受并破額壞酶淚類的超活性作為指食品腥防腐也劑的有機汽酸如苯驅甲酸歐和水炎楊酸究可與怖微生岸物細援胞中報的成隸分發堪生氧咸化作傍用,雙從而瞎抑制崖微生壩物的加生長防腐漿:利夜用理賺化因叼素完駝全抑哲制霉允腐微螞生物雖生長重繁殖論的措越施堿類詢物質可引釋起細蟻胞物逝質的滴水解浪或凝歇結,策以殺更死或悠抑制蠢微生均物,觀食品莫工業澆中常惠用石嗽灰水稈、Na竊OH、Na2CO3等作閑為機脊器、擴工具連以及第冷藏夢庫的絨消毒拴劑幾種杠常用土表面濱消毒膚劑及際其應炭用表面椒消毒犧劑:對垂
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