關于甾體類化合物第1頁，課件共50頁，創作于2023年2月含義：以環戊烷并多氫菲——甾核衍生的一類化合物的總稱。第2頁，課件共50頁，創作于2023年2月甾體類化合物依-17位取代基團的不同，可分為：

類型C17側鏈A/BB/CC/D

C21甾類C2H5衍生物反反順強心苷類不飽和內酯環順\反反順甾體皂苷類含氧螺雜環順\反反反植物甾醇8~10個碳原子烴類順\反反反昆蟲變態激素8~10個碳原子含氧烴類順反反膽汁酸類戊酸順反反第3頁，課件共50頁，創作于2023年2月強心苷類

含義:是指存在于植物體內的一類對心臟具有顯著生物活性的甾體苷類化合物。一．結構與分類（一）苷元部分：依C17-位上連接內酯環大小的不同

第4頁，課件共50頁，創作于2023年2月強心甾烯

海蔥甾烯（蟾蜍甾二烯）3β-OH14β-OH3β-OH14β-OH甲型強心苷元乙型強心苷元甲型強心苷乙型強心苷3-位連接糖3-位連接糖第5頁，課件共50頁，創作于2023年2月（二）糖部分

糖的類型a-OH糖a-去氧糖五碳醛糖2、6-二去氧糖六碳醛糖2、6-二去氧糖甲醚

6-去氧糖

6-去氧糖甲醚依直接與苷元相連的糖的種類I型苷元-（2、6-二去氧糖）Χ-（D-葡萄糖）УII型苷元-（6-去氧糖）Χ-（D-葡萄糖）УIII型苷元-（D-葡萄糖）第6頁，課件共50頁，創作于2023年2月二．強心苷的理化性質1．性狀大多為無色結晶或無定形粉末。具有旋光性。味苦，對粘膜有刺激性。

2．溶解性水甲醇、乙醇醋酸乙酯、含水氯仿、氯仿-甲醇乙醚、苯、石油醚原生苷次生苷+S水++微溶可溶-難溶--第7頁，課件共50頁，創作于2023年2月3．脫水反應強心苷用混合強酸（3~5%鹽酸）水解時，苷元上羥基（C14-OH，C5-OH更容易）與鄰位上的氫脫去水分子的反應。屬于水解反應的副反應，應注意避免。

4．水解反應反應類型反應條件水解特點用途酸水解溫和酸水解0.02~0.05mol/LHCI含水醇短時加熱苷元與a-去氧糖及a-去氧糖與a-去氧糖之間的苷鍵開裂I型強心苷的水解苷元、a-去氧糖雙糖、三糖I型R—O—a-去氧糖—a-去氧糖—glc第8頁，課件共50頁，創作于2023年2月強烈酸水解3~5%HCI所有苷鍵斷裂(I)、II、III型強心苷的水解延長加熱時間苷元和各種單糖或加壓但易產生脫水苷元

I型苷元-（2、6-二去氧糖）Χ-（D-葡萄糖）УII型苷元-（6-去氧糖）Χ-（D-葡萄糖）УIII型苷元-（D-葡萄糖）Χ

氯化氫-丙酮法II型強心苷的水解

1%HCI丙酮溶液原生苷元和糖衍生物

20℃兩周第9頁，課件共50頁，創作于2023年2月條件溫和（水、36℃左右、24hr）、專屬性強I、II型次生苷和葡萄糖植物體內只有水解葡萄糖的酶、III型苷元、葡萄糖

I型苷元-（2、6-二去氧糖）Χ-（D-葡萄糖）УII型苷元-（6-去氧糖）Χ-（D-葡萄糖）УIII型苷元-（D-葡萄糖）Χ酶水解第10頁，課件共50頁，創作于2023年2月堿水解

酰基內酯環a-去氧糖苷元a-羥基糖

NaHCO3+---Ca(OH)2+++-NaOH++++

（反應產物與條件有關）水溶液中,內酯環開環，加酸后環和。醇溶液中第11頁，課件共50頁，創作于2023年2月電子轉移、雙鍵移位加成反應皂化開環甲型強心苷C22活性亞甲基內酯型異構化苷開鏈型異構化苷與活性亞甲基試劑反應（用于甲型和乙型強心苷鑒別）第12頁，課件共50頁，創作于2023年2月5.顯色反應

按作用部位分：

作用于五元不飽和內酯環1、Legal反應2、Kedde反應、Raymond反應、Baljet反應用于甲型與乙型強心苷的鑒別作用于甾核1、醋酐-濃硫酸（L-B）反應2、Salkowski（氯仿-濃硫酸）反應3、三氯醋酸-氯胺T(Rosenheim)反應4.三氯化銻（五氯化銻）反應作用于a-去氧糖Keller-Kiliani（K-K）反應2.對二甲氨基苯甲醛反應3.噸氫醇反應4.過碘酸-對硝基苯胺反應用于I型與II、III型強心苷的鑒別第13頁，課件共50頁，創作于2023年2月三．強心苷的提取分離原料強心苷提取分離比較困難：1.含強心苷成分比較復雜，含量較低，2.強心苷為多糖苷,常與多糖、皂苷、色素、鞣質等性質相近成分共存，3.共存酶的存在及酸、堿等，易造成強心苷的水解，使成分復雜化。第14頁，課件共50頁，創作于2023年2月提取

溶劑法（相似者相溶原則）：原生苷甲醇、乙醇次生苷乙醚、氯仿、氯仿-甲醇混合溶劑常用提取溶劑:甲醇、70%乙醇（提取效率高；能使酶破壞失活）第15頁，課件共50頁，創作于2023年2月

純化溶劑法:油脂類雜質（種子類藥材）：壓榨法或石油醚脫脂（原料/醇提濃縮液）葉綠素（地上部分藥材）：靜置析膠法（醇提液濃縮至適當醇濃度靜置）鉛鹽法:沉淀酚酸類雜質（鞣質等），應注意調整含醇量，減少強心苷的損失注意某些強心苷的脫酰基反應吸附法:活性炭吸附除去葉綠素等脂溶性雜質氧化鋁吸附除去糖類、水溶性色素、皂苷等，注意調整醇濃度第16頁，課件共50頁，創作于2023年2月

分離

兩相溶劑萃取法：依分配系數差異（K）逆流分流法：依分配系數差異（K）液滴逆流分溶法（DCCC）:依分配系數差異（K）色譜分離法：對親脂性苷（單糖苷、次生苷、苷元）：吸附原理對弱親脂性苷（原生苷）：分配原理第17頁，課件共50頁，創作于2023年2月四．強心苷的波譜特征（一）紫外光譜aβ甲型強心苷乙型強心苷五元不飽和內酯環六元不飽和內酯環△aβ-γ內酯△aβ、γδ-δ內酯λmax220nm(lg4.34)λmax295~300nm(lg3.93)用于甲型與乙型強心苷及苷元的鑒別第18頁，課件共50頁，創作于2023年2月(二)紅外光譜強心苷在1800~1700cm-1

產生特征性兩個羰基吸收峰,

甲型乙型高波數區向低波數移動（多一個雙鍵，分子的共振結構使得-C+-O–

比較穩定，依據虎克定律）第19頁，課件共50頁，創作于2023年2月例如：3-乙酰毛花洋地黃毒苷元1738cm-1（乙酰羰基）嚏根草苷元1756cm-1（內酯環正常羰基吸收峰）1718cm-11783cm-1（內酯環非正常羰基吸收）1740cm-1極性溶劑中減弱或消失△40cm-1第20頁，課件共50頁，創作于2023年2月aβ甲型強心苷乙型強心苷五元不飽和內酯環六元不飽和內酯環△aβ-γ內酯△aβ、γδ-δ內酯UVλmax220nm(lg4.34)295~300nm(lg3.93)IR高波數區低波數區△40cm-1用于甲型與乙型強心苷的區別第21頁，課件共50頁，創作于2023年2月aβ飽和內酯環羰基吸收峰1786cm-1aβ不飽和內酯環羰基吸收峰1756cm-1aβγδ-不飽和內酯環羰基吸收峰1718cm-1羰基共軛程度增大，第22頁，課件共50頁，創作于2023年2月皂苷類

經典含義----存在于植物體內一類比較復雜的苷類化合物。他的水溶液易引起肥皂樣泡沫，且多數具有溶血等特性，皂苷的這些物理及生物學性質構成了皂苷的經典含義。現代含義----由螺甾烷及其生源途徑相似的甾族化合物的低聚糖苷或三萜類化合物的低聚糖苷。因此，皂苷可以分為甾體皂苷和三萜皂苷兩大類。第23頁，課件共50頁，創作于2023年2月皂苷的分類及結構特點：

皂苷甾體皂苷三萜皂苷螺甾烷醇型:25L、25S（C25-甲基直立a鍵、為β型）異螺甾烷醇型:25D25R(C25-甲基平伏e鍵、為a型)變形螺甾烷醇型：F環變形為呋喃甾烷（五元含氧環）呋甾烷型：F環裂環,C26-OH多與葡萄糖相連成苷五環三萜皂苷四環三萜皂苷β-香樹脂醇型()a-香樹脂醇型（）羽扇豆醇型達瑪烷型羊毛脂甾烷型第24頁，課件共50頁，創作于2023年2月甾體皂苷的結構特點：甾體皂苷=甾體皂苷元+糖（a-羥基糖）1．由A、B、C、D環（甾核）與E、F環以縮酮形式相連接組成的螺甾烷結構2．A/B/C/D環稠和方式：順（反）、反、反3．C25的絕對構型依其上甲基的取向不同有兩種第25頁，課件共50頁，創作于2023年2月C25-甲基直立a鍵、為β型

L型(25S25L25βF)平伏e鍵、為a型

D型（25R25D25aF)螺甾烷型異螺甾烷型第26頁，課件共50頁，創作于2023年2月

4．取代基團：OH多在C3-位或其他位置羰基多在C12-位雙鍵多在△5△9（11）甾體皂苷不含羧基，呈中性，故稱為中性皂苷。異螺甾烷醇型螺甾烷醇型第27頁，課件共50頁，創作于2023年2月呋甾烷型變形螺甾烷醇型第28頁，課件共50頁，創作于2023年2月β-香樹脂醇型a-香樹脂醇型羽扇豆醇型第29頁，課件共50頁，創作于2023年2月羊毛脂甾烷型達瑪烷第30頁，課件共50頁，創作于2023年2月二．皂苷的性質

1、性狀皂苷大多為無色或乳白色無定形粉末（低聚糖苷，極性大，分子量大）皂苷元（極性小）大多有完好結晶。皂苷多數具有苦而辛辣味，對粘膜有強烈刺激性，尤其鼻粘膜，易引起噴嚏。皂苷大多具引濕性。2、溶解性皂苷（低聚糖苷，極性大）易于水、熱甲醇、乙醇、含水丁醇，難于丙酮、乙醚次生皂苷（極性降低）易于醇、丙酮、乙酸乙酯皂苷元（極性小）易于石油醚、乙醚、苯、氯仿，難于水皂苷的助溶作用（表面活性劑作用），可以增加其他成分在水中的溶解度。第31頁，課件共50頁，創作于2023年2月3．與膽甾醇的沉淀反應皂苷與甾醇（多為膽甾醇）形成的分子復合物沉淀反應。生成的分子復合物沉淀用乙醚回流提取時，膽甾醇可溶于乙醚，皂苷不溶。甾體皂苷與膽甾醇形成沉淀的溶度積小，因此，可用于甾體皂苷的分離純化。4．發泡性皂苷的表面活性劑作用，其水溶液在劇烈振搖時，可以產生大量、持久的泡沫，而且不因加熱而消失。第32頁，課件共50頁，創作于2023年2月5．溶血性皂苷有使紅細胞破裂的作用。溶血能力的大小用溶血指數表示。溶血指數是指皂苷對同一動物來源的紅細胞稀懸浮液，在同一等滲條件、緩沖條件及恒溫下造成完全溶血的最低濃度。原因在于皂苷對膽甾醇有強的親和力，可形成分子復合物，作用于紅細胞表面的類脂質而破壞血細胞，表現強的溶血作用。同時，與膽甾醇的沉淀作用可用于解除皂苷的溶血作用。6．與金屬鹽類的沉淀反應三萜皂苷可被中性鹽如醋酸鉛沉淀，甾體皂苷可被堿式鹽或堿，如堿式醋酸鉛、氫氧化鋇等沉淀。第33頁，課件共50頁，創作于2023年2月三．皂苷及皂苷元的提取、分離（一）皂苷的提取分離原料以醇提較好，回收乙醇，加適量水稀釋提取水溶液（1）正丁醇萃取法：必要時石油醚脫脂，正丁醇萃取，減壓回收正丁醇（2）大孔樹脂純化法：水溶液過柱，少量水洗（糖分等），稀醇洗脫，蒸干純化第34頁，課件共50頁，創作于2023年2月粗總皂苷乙醚（丙酮）、乙醚-丙酮沉淀法：粗品溶于少量甲醇，滴加乙醚等，混勻，皂苷及可析出，反復幾次，可提高皂苷的純度膽甾醇沉淀法：主要用于甾體皂苷的分離純化精制較純的皂苷第35頁，課件共50頁，創作于2023年2月分配原理為佳（皂苷極性大）硅膠分配柱色譜：氯仿-甲醇-水等梯度洗脫或水飽和正丁醇洗脫制備薄層色譜分離：反相色譜分離：反相鍵合相硅膠RP18、RP-8、RP-2,甲醇-水、乙氫-水

SephadexLH-20：甲醇洗脫液滴逆流色譜法：難分離皂苷，制備成衍生物（乙酰化或甲酯），硅膠柱色譜分離鉛鹽沉淀法：中性和酸性皂苷的分離分離皂苷單體（實際中，需要多種方法配合應用）第36頁，課件共50頁，創作于2023年2月（二）皂苷元的提取、分離

方法1.

原料預發酵水，36℃保溫24~48小時藥渣酸水解3%硫酸加熱水解3~6小時，過濾，水洗，干燥藥渣提取石油醚、汽油或甲苯連續回流4~6小時石油醚提取液回收適量回收，放置析晶，抽濾皂苷元粗品重結晶乙醇或丙酮處理，活性炭脫色皂苷元精品第37頁，課件共50頁，創作于2023年2月

方法2.

原料提取按上述提取皂苷工藝進行皂苷水解常規酸水解水解液萃取苯、氯仿等有機溶劑萃取液（苯、氯仿）回收皂苷元第38頁，課件共50頁，創作于2023年2月皂苷元的分離：（1）吉拉爾試劑法：羰基與非羰基皂苷元的分離（2）柱色譜分離法—吸附原理—硅膠、氧化鋁苯-氯仿、苯-甲醇、氯仿-甲醇不同比例洗脫注：甾體皂苷---主要作為合成激素等的原料，故以提取苷元較為實用。三萜皂苷—為許多中藥的有效活性部位，故以提取皂苷為主。第39頁，課件共50頁，創作于2023年2月四．皂苷的檢識及結構測定（一）皂苷的化學檢識—顏色反應試劑類型鑒別特點鑒別意義醋酐-濃硫酸反應甾體皂苷黃紅紫藍

三萜皂苷最后顯綠色用于兩類皂苷的區別

五氯化銻反應（60~70℃加熱）藍、灰藍、灰紫色可在濾紙上進行第40頁，課件共50頁，創作于2023年2月

三氯醋酸反應甾體皂苷加熱60℃顯色三萜皂苷加熱100℃顯色可在濾紙上進行用于兩類皂苷的區別氯仿濃硫酸反應硫酸層---紅或藍色，氯仿層---綠色熒光第41頁，課件共50頁，創作于2023年2月鹽酸-對二甲氨基苯甲醛（Ehrlich試劑，簡稱E試劑）螺甾烷類不顯色呋甾烷類顯紅色茴香醛-硫酸(Anisaldehyde,簡稱A試劑）螺甾烷類顯黃色呋甾烷類顯黃色（F環裂環）可用于兩類皂苷的區別第42頁，課件共50頁，創作于2023年2月（二）波譜特征1、紫外特征（UV）飽和的甾體皂苷元紫外區無吸收孤立雙鍵205~225nm（ε900）羰基285nm（ε500）

a、β-不飽和酮基240nm（ε11000）飽和的甾體皂苷元與共軛雙鍵235nm

濃硫酸40℃，1hr220~600nm出現最大吸收峰（λmax）依吸收峰的位置（λmax）及吸收系數（ε）與標準圖譜相對照，即可用于不同皂苷元的鑒別第43頁，課件共50頁，創作于2023年2月2．紅外光譜（IR）甾體皂苷的螺縮酮結構在紅外光譜的指紋區表現特征性的四個吸收峰：980cm-1（A）920cm-1（B）900cm-1（C）860cm-1（D）

25SB>CA最強25RB<C

可用于C-25構型的鑒別（兩種皂苷元的鑒別）當△25（27）920cm-1左右出現強峰，另外在1658cm-1、878cm-1出現-C=CH2

特征吸收峰當C25-OH25SB強峰

25RC強峰A峰都很弱當C25-CH2OH25S995cm-1

強峰

25R1010cm-1

強峰當F環開裂無螺縮酮結構，因此，無此特征。第44頁，課件共50頁，創作于2023年2月質譜（MS）甾體皂苷的螺縮酮結構139（基峰）、115（中）、126（弱）若C25-OH或C27-OH+16amu155（基峰）、131（中）、142

（弱）

OH乙酰化OAc+197（基峰）

OH甲基化OMe+169（基峰）若△25（27）

-2amu137（基峰）、113（中）、124（弱）若C17a–OH139減弱、126（基峰）、155、153二個峰推斷F-環的取代情況第45頁，課件共50頁，創作于2023年2月m/z139（基峰）m/z115（中）m/z126輔助離子m/z137m/z113m/z124

在EI-MS中除螺縮酮F環的上述碎片峰外，同時尚伴有c-h的來自甾核或甾核加E環的系列碎片離子用于鑒別是否甾體皂苷元，亦可用于取代基團的性質、數目、位置。第46頁，課件共50頁，創作于