關于溶血性鏈球菌第1頁，課件共51頁，創作于2023年2月

溶血性鏈球菌又稱沙培林對熱和化學清毒劑均敏感,常引起扁桃體、咽部、中耳等感染。亦為腎盂腎炎、產褥熱、猩紅熱的病原體。第2頁，課件共51頁，創作于2023年2月一、生物學特性

二、流行病學

三、致病性

五、檢驗和控制溶血性鏈球菌四、抵抗力第3頁，課件共51頁，創作于2023年2月1、形態與染色

鏈球菌呈球形或橢圓形，直徑0.6-1.0μm，呈鏈狀排列，長短不一，從4-8個至20-30個菌細胞組成不等，鏈的長短與細菌的種類及生長環境有關。在液體培養基中易呈長鏈，固體培養基中常呈短鏈，由于鏈球菌能產生脫鏈酶，所以正常情況下鏈球菌的鏈不能無限制的延長。多數菌株在血清肉湯中培養2-4h易形成透明質酸的莢膜，繼續培養后消失。該菌不形成芽胞，無鞭毛，易被普通的堿性染料著色，革蘭氏陽性，老齡培養或被中性粒細胞吞噬后，轉為革蘭氏陰性。

第4頁，課件共51頁，創作于2023年2月2、培養特征

需氧或兼性厭氧菌，營養要求較高，普通培養基上生長不良，需補充血清、血液、腹水，大多數菌株需核黃素、維生素B6、煙酸等生長因子。最適生長溫度為37℃，在20-42℃能生長，最適pH為7.4-7.6。在血清肉湯中易成長鏈，管底呈絮狀或顆粒狀沉淀生長。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、邊緣整齊、直徑0.5-0.75mm的細小菌落，不同菌株溶血不一。

第5頁，課件共51頁，創作于2023年2月3、生化反應

分解葡萄糖，產酸不產氣，對乳糖、甘露醇、水楊苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七葉苷的分解能力因不同菌株而異。一般不分解菊糖，不被膽汁溶解，觸酶陰性。

第6頁，課件共51頁，創作于2023年2月4、抗原結構

鏈球菌的抗原構造較復雜，主要有三種：

（1）核蛋白抗原或稱P抗原，無特異性，各種鏈球菌均相同。

（2）多糖抗原或稱C抗原，系群特異性抗原，是細胞壁的多糖組分，可用稀鹽酸等提取。

（3）蛋白質抗原或稱表面抗原，具有型特異性，位于C抗原外層，其中可分為M、T、R、S四種不同性質的抗原成分，與致病性有關的是M抗原。

第7頁，課件共51頁，創作于2023年2月5、分類

根據鏈球菌在血液培養基上生長繁殖后是否溶血及其溶血性質分為三類。

（1）α-溶血性鏈球菌：菌落周圍有1-2mm寬的草綠色溶血環，也稱甲型溶血，這類鏈球菌多為條件致病菌。

（2）β-溶血性鏈球菌：菌落周圍形成一個2-4mm寬、界限分明、完全透明的無色溶血環，也稱乙型溶血，因而這類菌亦稱為溶血性鏈球菌，該菌的致病力強，常引起人類和動物的多種疾病。（3）γ-鏈球菌：不產生溶血素，菌落周圍無溶血環，也稱為丙型或不溶血性鏈球菌，該菌無致病性，常存在于乳類和糞便中，偶爾也引起感染。第8頁，課件共51頁，創作于2023年2月溶血性鏈球菌在自然界中分布較廣，存在于水、空氣、塵埃、糞便及健康人和動物的口腔、鼻腔、咽喉中，可通過直接接觸、空氣飛沫傳播或通過皮膚、粘膜傷口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也會對人類進行感染。上呼吸道感染患者、人畜化膿性感染部位常成為食品污染的污染源。一般來說，溶血性鏈球菌常通過以下途徑污染食品：

1、食品加工或銷售人員口腔、鼻腔、手、面部有化膿性炎癥時造成食品的污染；

2、食品在加工前就已帶菌、奶牛患化膿性乳腺炎或畜禽局部化膿時，其奶和肉尸某些部位污染；

3、熟食制品因包裝不善而使食品受到污染。

流行病學第9頁，課件共51頁，創作于2023年2月

溶血性鏈球菌常可引起皮膚、皮下組織的化膿性炎癥、呼吸道感染、流行性咽炎的爆發性流行以及新生兒敗血癥、細菌性心內膜炎、猩紅熱、腎小球腎炎。溶血性鏈球菌的致病性與其產生的毒素及其侵襲性酶有關，主要有以下幾種：

1、鏈球菌溶血素：溶血素有O和S兩種，O為含有-SH的蛋白質，具有抗原性，S為小分子多肽，分子量較小，故無抗原性。

2、致熱外毒素：曾稱紅疹毒素或猩紅熱毒素，是人類猩紅熱的主要毒性物質，會引起局部或全身紅疹、發熱、疼痛、惡心、嘔吐、周身不適。

致病性

第10頁，課件共51頁，創作于2023年2月3、透明質酸酶：又稱擴散因子，能分解細胞間質的透明質酸，故能增加細菌的侵襲力，使病菌易在組織中擴散。

4、鏈激酶：又稱鏈球菌纖維蛋白溶酶，能使血液中纖維蛋白酶原變成纖維蛋白酶，具有增強細菌在組織中的擴散作用，該酶耐熱，100℃50分鐘仍可保持活性。

5、鏈道酶：又稱鏈球菌DNA酶，能使膿液稀薄，促進病菌擴散。

6、殺白細胞素：能使白細胞失去動力，變成球形，最后膨脹破裂。

第11頁，課件共51頁，創作于2023年2月抵抗力該菌抵抗力一般不強，60℃30min即被殺死，對常用消毒劑敏感，在干燥塵埃中生存數月。乙型鏈球菌對青霉素、紅霉素、氯霉素、四環素、磺胺均敏感。青霉素是鏈球菌感染的首選藥物，很少有耐藥性。

第12頁，課件共51頁，創作于2023年2月第13頁，課件共51頁，創作于2023年2月設備和材料

1冰箱：O℃——4℃。

2恒溫培養箱：36℃士1℃。

3恒溫水浴鍋：36℃土1℃。

4顯微鏡：10*～l00*。

5均質器或滅菌乳缽。

6離心機：4000r/min。

7架盤藥物天平：0g——5009，精確至0.5g。

8滅菌試管：10mm*100mm、l6mm*160mm。

9滅菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、5mL、10mL（具1mL刻度）。

10滅菌錐形瓶：100mL。

11滅菌培養皿：直徑90mm。

12滅菌棉簽、鑷子等。

第14頁，課件共51頁，創作于2023年2月培養基和試劑

1葡萄糖肉浸液肉湯：按GB/T4789.28一2003中4.1規定。在肉浸液肉湯內加人1％葡萄糖。

2肉浸液肉湯：按GB/T4789.28一2003中4.1規定。

3匹克氏肉湯：按GB/T4789.28一2003中4.62規定。

4血瓊脂平板：按GB/T4789.28一2003中4.6規定。

5人血漿。6

0.25%氯化鈣。

7

0.85％滅菌生理鹽水。

8桿菌膚藥敏紙片（含0.04單位）。

第15頁，課件共51頁，創作于2023年2月第16頁，課件共51頁，創作于2023年2月

第17頁，課件共51頁，創作于2023年2月

匹克氏肉湯

含1%胰蛋白胨的牛心浸液200mL1：25000結晶紫鹽水溶液10mL1：800三氮化鈉溶液10mL脫纖維兔血(或羊血)10mL制法：將上述已滅菌的各種成分，用無菌手續依次混合，分裝于無菌試管內，每管約2mL，保存于冰箱內備用第18頁，課件共51頁，創作于2023年2月血平板：菌落為灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有乳光，直徑約0.5—0.75mm，為圓形突起的細小菌落，乙型溶血性鏈球菌周圍有2—4mm界限分明、無色透明的溶血圈。

第19頁，課件共51頁，創作于2023年2月制法：取營養瓊脂（PH7．6），加熱使其溶解待冷至45-50℃，以滅菌操作于每100毫升營養瓊脂加滅菌脫纖維羊血或兔血5-10毫升,輕輕搖勻，立即傾注于平板或分裝試管，制成斜面備用。

配方：pH7.4-7.6豆粉瓊脂

100ml

脫纖維羊血

5—10ml

血瓊脂平板（BA）亦可用其它營養豐富的基礎培養基配制血瓊脂。

第20頁，課件共51頁，創作于2023年2月1、樣品處理：取25g固體（或25mL液體）檢樣加入225mL滅菌生理鹽水，制成混懸液。

2、吸取5mL混懸液接種至50mL葡萄糖肉浸液肉湯，或直接劃線于血平板（如檢樣污染嚴重，可同時接種5mL至匹克氏肉湯），36℃培養24h，接種血平板，36℃培養24h,挑起乙型溶血圓形突起的細小菌落，在血平板上分純，觀察在液體和固體中的培養特征、溶血情況及革蘭氏染色、形態，并進行鏈激酶試驗和桿菌肽敏感試驗。

（一）檢驗

第21頁，課件共51頁，創作于2023年2月葡萄糖肉浸液肉湯原

理：

蛋白胨、牛肉浸出粉提供氮源、維生素和生長因子；氯化鈉維持均衡的滲透壓；磷酸氫二鉀為緩沖劑；葡萄糖提供碳源。配方（每升）：

牛肉(提取浸出粉)500g氯化鈉5g蛋白胨

10g磷酸氫二鉀2g葡萄糖10g

最終pH7.5±0.2將絞碎之去筋膜無油脂牛肉500g加蒸餾水1000mL，混合后放冰箱過夜，除去液面之浮油，隔水煮沸半小時，使肉渣完全凝結成塊，用絨布過濾，并擠壓收集全部濾液，加水補足原量。加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽，溶解后校正pH7.4～7.6煮沸并過濾，分裝燒瓶，121℃高壓滅菌30min。第22頁，課件共51頁，創作于2023年2月4、桿菌肽敏感試驗：取典型菌落的菌液涂布于血平板上，用滅菌鑷子夾取每片含有0.04單位的桿菌肽紙片置于上述平板上，36℃培養18-24h，如有抑菌圈出現即為陽性。用已知的陽性菌株做對照。

第23頁，課件共51頁，創作于2023年2月3、鏈激酶試驗：吸取草酸鉀血漿0.2mL，加0.8mL滅菌生理鹽水，混勻，再加入鏈球菌18-24h36℃肉浸液肉湯培養物0.5mL及0.25%氯化鈣0.25mL，混勻，置于36℃水浴10min,血漿混合物自行凝固，觀察凝塊重新完全溶解的時間，完全溶解為陽性，如24h后不溶解即為陰性。同時用肉浸液肉湯做陰性對照，用已知的鏈激酶陽性的菌株做陽性對照。

第24頁，課件共51頁，創作于2023年2月（二）控制

1、防止帶菌人群對各種食物的污染，患局部化膿性感染、上呼吸道感染的人員要暫停與食品接觸的工作。

2、防止對奶及其制品的污染，牛奶場要定期對生產中的奶牛進行體檢，堅持擠奶前消毒，一旦發現患化膿性乳腺炎的奶牛要立即隔離，奶制品要用消毒過的原料，并注意低溫保存。

3、在動物屠宰過程中，應嚴格執行檢驗法規，割除病灶并以流水沖洗；在肉制品加工過程中發現化膿性病灶應整塊剔除。

第25頁，課件共51頁，創作于2023年2月第26頁，課件共51頁，創作于2023年2月第27頁，課件共51頁，創作于2023年2月第28頁，課件共51頁，創作于2023年2月第29頁，課件共51頁，創作于2023年2月報告第30頁，課件共51頁，創作于2023年2月第31頁，課件共51頁，創作于2023年2月第32頁，課件共51頁，創作于2023年2月第33頁，課件共51頁，創作于2023年2月第34頁，課件共51頁，創作于2023年2月第35頁，課件共51頁，創作于2023年2月第36頁，課件共51頁，創作于2023年2月第37頁，課件共51頁，創作于2023年2月第38頁，課件共51頁，創作于2023年2月第39頁，課件共51頁，創作于2023年2月第40頁，課件共51頁，創作于2023年2月第41