第十六章真菌第一節(jié)真菌的分類及生物學(xué)特性第二節(jié)真菌的致病性第三節(jié)真菌病的診斷與防治第四節(jié)病原真菌病內(nèi)容提要第一節(jié)真菌的分類及生物學(xué)特性真菌概述特性：真菌是一類真核微生物，不含葉綠素，無(wú)根、莖、葉，營(yíng)腐生或寄生 生活。少數(shù)為單細(xì)胞，多數(shù)為多細(xì)胞，呈分支或不分支的絲狀體， 能進(jìn)行有性和無(wú)性繁殖。從形態(tài)上分為酵母菌、霉菌和擔(dān)子菌。利害：真菌種類多、數(shù)量大、分布廣泛，與人類生產(chǎn)與生活密切相關(guān)。絕大 多數(shù)對(duì)人和動(dòng)物有益，利用某些真菌及代謝產(chǎn)物生產(chǎn)化工、醫(yī)藥、 食品等產(chǎn)品。某些可感染人或動(dòng)物致病，有的可引致食品、谷物、 農(nóng)副產(chǎn)品發(fā)霉變質(zhì)，甚至產(chǎn)生毒素危害人和動(dòng)物的健康。

目前將真菌界分為5個(gè)門。壺菌門：無(wú)隔菌絲，無(wú)性游動(dòng)孢子或有性卵孢子。能寄生于植物。接合菌門：多為無(wú)隔菌絲，無(wú)性子囊孢子或有性接合孢子。多數(shù)腐生，極 少數(shù)致動(dòng)物疾病。子囊菌門：多為有隔菌絲。無(wú)性出芽或分生孢子，有性子囊孢子。多數(shù)腐 生，少數(shù)致動(dòng)物疾病。擔(dān)子菌門：由有隔菌絲組成各種子實(shí)體，多有性繁殖產(chǎn)生擔(dān)孢子。半知菌門：有隔菌絲，只知無(wú)性分生孢子，有的能引起人和動(dòng)物病害。一、真菌的分類二、真菌生物學(xué)特性（一）酵母菌(Yeasts)酵母菌單細(xì)胞微生物，一般為球形、卵形、橢圓形、臘腸形，少數(shù)為瓶形、假絲狀等。酵母菌個(gè)體較大（l-5um×5-30um）。在400倍鏡下清楚觀察到。1.形態(tài)及大小酵母菌光鏡照片酵母菌電鏡照片酵母菌假菌絲3.酵母菌的菌落特征

酵母菌的菌落與細(xì)菌菌落相似，但比細(xì)菌菌落大而厚。菌落表面光滑（有些呈干燥粉狀），濕潤(rùn)和粘稠，多數(shù)是乳白色少數(shù)是黃色或紅色（酵母菌單個(gè)細(xì)胞是無(wú)色的）容易挑起。酵母菌的菌落紅酵母菌的菌落4.酵母菌的繁殖生長(zhǎng)繁殖規(guī)律與細(xì)菌相似。無(wú)性繁殖有性繁殖無(wú)性繁殖為主主要為芽殖在細(xì)胞生出的小梗上形成無(wú)性孢子成熟后通過(guò)噴射機(jī)制將孢子射出。1.芽殖：假菌絲2.裂殖：3.擲孢子：有性子囊孢子:兩個(gè)性別不同的細(xì)胞接近、結(jié)合、 胞質(zhì)融合、分裂，形成子囊孢子。啤酒酵母子囊孢子的形成酵母有性子囊孢子的形成

（二）霉菌(Molds)

在營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)上，能形成絨毛狀、蛛網(wǎng)狀或絮狀菌絲體的真菌稱為霉菌。1.霉菌菌絲形態(tài)構(gòu)造霉菌在基質(zhì)上生長(zhǎng)時(shí)，首先由孢子生出嫩芽，稱為芽管，芽管逐漸延長(zhǎng)呈長(zhǎng)的絲狀物，稱菌絲。菌絲（hypha)菌絲繼續(xù)生長(zhǎng)延長(zhǎng)、分支、交錯(cuò)成團(tuán)，好似棉花絮狀稱菌絲體。菌絲體：菌絲的種類：無(wú)隔菌絲：菌絲內(nèi)無(wú)橫隔，是一個(gè)細(xì)胞，內(nèi)含多個(gè)核，細(xì)胞 數(shù)目不增多。如毛霉、根霉等。有隔菌絲：菌絲生長(zhǎng)過(guò)程中，于一定距離形成橫隔，將菌絲 分成許多細(xì)胞，每個(gè)細(xì)胞內(nèi)有1-幾個(gè)核。 如青霉、曲霉、木霉等。按結(jié)構(gòu)分為；營(yíng)養(yǎng)菌絲（基質(zhì)菌絲）：菌絲深入到被寄生的物體中（或培養(yǎng) 基），專門吸收營(yíng)養(yǎng)，排泄廢物等作用的菌絲。氣生菌絲：伸向空氣中的菌絲。繁殖菌絲：氣生菌絲中，能生出各種孢子進(jìn)行繁殖的菌絲。按功能可分為：孢子菌絲無(wú)隔菌絲有隔菌絲孢子萌發(fā)和菌絲的生長(zhǎng)過(guò)程

菌絲的結(jié)構(gòu)霉菌的繁殖方式多樣，主要以產(chǎn)生各種無(wú)性和有性孢子繁殖，而以無(wú)性孢子繁殖為主。孢子的形態(tài)特征也是分類的重要依據(jù)。無(wú)性繁殖

無(wú)性繁殖是指不經(jīng)過(guò)兩性細(xì)胞的結(jié)合而形成個(gè)體的過(guò)程。以無(wú)性繁殖所產(chǎn)生的孢子稱無(wú)性孢子。大多數(shù)霉菌是通過(guò)無(wú)性孢子來(lái)進(jìn)行繁殖的，如芽孢子、關(guān)節(jié)孢子（節(jié)孢子）、厚膜孢子（厚垣孢子）、孢子囊孢子、分生孢子等。孢子囊孢子孢子囊孢子囊梗關(guān)節(jié)孢子厚膜孢子芽孢子小分生孢子大分生孢子分生孢子梗3.霉菌的繁殖方式2.有性繁殖

有性繁殖是經(jīng)兩性細(xì)胞的質(zhì)配與核配后，產(chǎn)生有性孢子來(lái)實(shí)現(xiàn)的。有性孢子包括卵孢子、接合孢子、子囊孢子和擔(dān)孢子等。常見(jiàn)的霉菌1.根霉(Rhizopus)根霉是霉菌中的一個(gè)屬（約20個(gè)種），菌絲體分枝不分隔，屬于單細(xì)胞。菌絲的頂端形成孢子囊孢子，成熟后囊壁破裂而釋放孢子。2.青霉(Penicillium)青霉也是霉菌中的一個(gè)屬（約幾百個(gè)種），是青霉素的重要生產(chǎn)菌。菌體是分枝分隔的多細(xì)胞。形成分生孢子一般呈藍(lán)綠色。3.曲霉(Aspergillus)曲霉屬（約100多個(gè)種），菌體是分枝分隔的多細(xì)胞，形成分生孢子，其顏色隨種類不同也不一樣，有黃、青、藍(lán)、黑、綠、棕等顏色。三.真菌的培養(yǎng)1.真菌生長(zhǎng)繁殖的條件真菌大多數(shù)為異養(yǎng)菌，但它們的碳素利用能力強(qiáng)，真菌對(duì)氮素營(yíng)養(yǎng)要求不嚴(yán)，除氨基酸、蛋白質(zhì)外，還可利用尿素、銨鹽，亞硝酸鹽、硝酸鹽作為氮源。多數(shù)真菌能合成生長(zhǎng)因素，利用環(huán)境中的微量元素。（1）營(yíng)養(yǎng)需要（2）溫度：最適溫度為25-35℃，動(dòng)物病原真菌最適溫度為37℃。（3）pH：真菌在pH1.5-11可生長(zhǎng)，最適pH為5-10。多數(shù)真菌喜歡微酸性環(huán)境。（4）濕度：喜濕耐干。在高濕（多數(shù)在濕度95％-100％）條件下生長(zhǎng)良好。（5）光線：可見(jiàn)光對(duì)孢子的形成和釋放有重要作用，紫外光可使真菌發(fā)生 變異和損傷。（6）氣體：多數(shù)真菌為需氧菌，少數(shù)為兼性或嚴(yán)格厭氧。3.真菌的培養(yǎng)固體培養(yǎng)進(jìn)行菌種分離繁殖，用瓊脂斜面、平板作固體培養(yǎng)，形成菌落，觀察和分離。（1）固體培養(yǎng)真菌生產(chǎn)程序：包括斜面菌種培養(yǎng)--種子擴(kuò)大培養(yǎng)—生產(chǎn)發(fā)酵和產(chǎn)品檢驗(yàn)等四個(gè)階段。（2）液體培養(yǎng)：液體培養(yǎng)一般有淺層培養(yǎng)和深層培養(yǎng)兩類。

淺層培養(yǎng)：液體培養(yǎng)基放置在淺層容器內(nèi)，盡量擴(kuò)大液體與空氣的接觸面，

使真菌能得到充分的氧氣供應(yīng)。常為靜置培養(yǎng)，真菌多在液體表面成膜狀生長(zhǎng)，故稱表面培養(yǎng)。深層培養(yǎng)：大量的液體培養(yǎng)（生產(chǎn)培養(yǎng)）時(shí)，培養(yǎng)基放置在深層容器內(nèi)，采用攪拌、通氣等方法，使真菌得到足夠的氧氣，促進(jìn)真菌生長(zhǎng)。真菌在全部培養(yǎng)液中均勻生長(zhǎng)。注意防止污染。第二節(jié)真菌的致病性有些真菌呈寄生性致病作用，有些則產(chǎn)生毒素使動(dòng)物中毒。6.真菌的免疫原性：大部分動(dòng)物對(duì)真菌感染有一定的抵抗力。真菌感染的康復(fù)主要靠細(xì)胞免疫，血清中抗真菌抗體滴度雖然很高，可用于血清學(xué)診斷，但不能抑制真菌的生長(zhǎng)。在真菌的細(xì)胞免疫中，T細(xì)胞起主導(dǎo)作用，如T細(xì)胞受損，機(jī)體易發(fā)生念珠菌病、曲霉菌病。3.真菌性中毒：在飼料、食品中生長(zhǎng)的真菌，可產(chǎn)生真菌毒素，動(dòng)物或人食后可導(dǎo)致急性或慢性中毒。如黃曲霉毒素1.致病性霉菌感染：主要是一些外源性真菌感染，可造成皮膚和全身性感染。2.真菌變態(tài)反應(yīng)性疾病：一部分真菌能引起變態(tài)反應(yīng)陽(yáng)性，引起接觸性皮炎等疾病。5.致腫瘤：某些真菌毒素與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)，如黃曲霉毒素毒性很強(qiáng)，小 劑量即有致癌作用。除黃曲霉外，煙曲霉、黑曲霉、赤曲霉等也 可以產(chǎn)生黃曲霉毒素。1.顯微鏡檢查：可作抹片或濕標(biāo)本片檢查。

抹片檢查：組織、體液、膿汁以及離心沉淀材料等，均可做成抹片，以姬 姆薩染色法等染色，檢查真菌細(xì)胞、菌絲、孢子等結(jié)構(gòu)。

濕標(biāo)本片檢查：于材料上滴加10％-20％氫氧化鉀溶液處理使其透明清晰， 加蓋玻片，微熱處理后檢查。第三節(jié)真菌病的診斷與防治一、真菌病的診斷

真菌病的診斷，主要檢查菌絲或孢子以作出診斷。4.真菌毒素檢測(cè)：在真菌毒素中毒性疾病，應(yīng)對(duì)可疑飼料進(jìn)行真菌毒素檢 查。可用免疫學(xué)檢測(cè)或提取后用薄層層析、氣相液相色譜 分析等。2.分離培養(yǎng)及特性觀察：將病料接種于沙堡葡萄糖瓊脂或血液瓊脂，分別培 養(yǎng)于室溫及37℃，培養(yǎng)后逐日觀察。真菌一般生長(zhǎng)較慢，往 往需培養(yǎng)數(shù)日甚至數(shù)周。可于培養(yǎng)基中加入適量抗生素，一 般每毫升培養(yǎng)基加20-1001U青霉素和40-200ug鏈霉素。3.變態(tài)反應(yīng)診斷：有些真菌病，例如假皮疽組織胞菌引致的馬流行性淋巴 管炎，可用變態(tài)反應(yīng)進(jìn)行診斷。第四節(jié)病原真菌病一.感染性病原真菌1.組織胞漿菌屬

本屬為典型的雙相型真菌，在組織中呈酵母樣細(xì)胞，室溫培養(yǎng)時(shí)形成菌絲體。重要的有莢膜組織胞漿菌及假皮疽組織胞漿菌。根據(jù)真菌致病性，分為兩大類：以感染為主的真菌；以中毒為主的真菌。

某些腐生性或寄生性真菌可感染動(dòng)物機(jī)體，并在感染部位生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物，而對(duì)機(jī)體致病。重要的有：莢膜組織胞漿菌、曲霉菌等。（一）感染性病原真菌（1）莢膜組織胞漿菌：該菌引致犬、貓和人常發(fā)的高度接觸性傳染性組織胞漿菌病。寄生在網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞的胞漿內(nèi)，使感染組織形成肉芽腫。奶牛、馬、羊、豬及嚙齒類動(dòng)物也可自然感染，小鼠易感染。通常呈地方性、良性無(wú)癥狀的原發(fā)性感染。

生物學(xué)特性：在巨噬細(xì)胞和網(wǎng)狀細(xì)胞內(nèi)寄生時(shí)呈細(xì)小的、包有莢膜的圓球樣細(xì)胞，直徑1-3um。22-25℃培養(yǎng)時(shí)，在培養(yǎng)基上緩慢形成絲狀菌落，開(kāi)始白色，漸變棕黃，菌絲分支分隔，先產(chǎn)生小分生孢子，后大分生孢子。微生物學(xué)檢查：鏡檢如發(fā)現(xiàn)特征性的棘厚壁大孢子，可作出診斷。活體病組 織末梢血觸片瑞氏染色，在單核巨噬細(xì)胞或多形核細(xì)胞中可 發(fā)現(xiàn)呈洋蔥切面樣卵圓形孢子，亦可診斷。

防制：目前尚沒(méi)有有效預(yù)防和治療方法，靜脈注射含0.1％兩性霉素B的葡萄 糖液有一定效果。我國(guó)尚未有本病的報(bào)道。

凡能產(chǎn)生毒素、導(dǎo)致人和動(dòng)物發(fā)生急性或慢性中毒癥的真菌，稱為中毒性病原真菌。

同一種真菌，例如黃曲霉，也不是所有菌株均能產(chǎn)生毒素，只有產(chǎn)毒的菌株才有病原性。二.中毒性病原真菌1.毒素的種類：中毒性病原真菌產(chǎn)生的真菌毒素是一類次生代謝產(chǎn)物，種類 較多，根據(jù)其主要中毒作用可分為肝臟毒、腎臟毒、神經(jīng)毒 等幾類。肝臟毒：主要致肝細(xì)胞變性、壞死、肝硬化、肝癌，如黃曲毒素等。腎臟毒：主要致急慢性腎臟病變，可使腎功能喪失，如桔青霉素等。神經(jīng)毒：主要致大腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害，引起出血和神經(jīng)組織變性，如 黃綠霉素。

造血組織毒：主要損害造血系統(tǒng)，發(fā)生造血組織壞死或造血機(jī)能障礙，白 血球減少癥等，如鐮刀菌毒素。

許多真菌毒素往往作用兩種以上的器官或系統(tǒng)，表現(xiàn)出致畸、致癌和致突變作用。還包括抑制細(xì)胞的分裂或蛋白質(zhì)的合成、影響核酸的復(fù)制、降低免疫應(yīng)答作用等。2.毒素的產(chǎn)生：真菌毒素的產(chǎn)生，首先取決于菌株，其次依賴于外界環(huán)境， 如基質(zhì)、溫度和濕度。基質(zhì)對(duì)霉菌的生長(zhǎng)和產(chǎn)毒有一定的影響。

曲霉菌在自然界分布廣泛，也是實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常污染的真菌之一。可感染動(dòng)物，也可在寄生的飼料、糧食中產(chǎn)生毒素，污染動(dòng)物食物引致中毒。常見(jiàn)的有煙曲霉、黃曲霉、寄生曲霉、棕曲霉、雜色曲霉、構(gòu)巢曲霉、白曲霉、黑曲霉等，其中煙曲霉以感染致病為主，同時(shí)也產(chǎn)生毒素。黃曲霉、寄生曲霉、棕曲霉、雜色曲霉等主要以所產(chǎn)毒素致病。形態(tài)

菌絲分支分隔，繁殖菌絲頂端膨大為頂囊，頂囊上著生許多小梗，小梗單層或雙層，小梗上著生分生孢子，分生孢子呈鏈狀，并分為黃、綠、黑、灰等顏色(圖28-4-404)。三.曲霉菌屬4.致病類型：根據(jù)黃曲霉毒素的毒性作用，可將中毒分為3類，即急性或亞急性、慢性、致癌性。致癌性：人和動(dòng)物長(zhǎng)期攝人較低水平的黃曲霉毒素，或在短期攝人一定數(shù)量的黃曲霉毒素，經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)時(shí)間后發(fā)生肝癌。黃曲霉毒素是目前已知最強(qiáng)烈的致癌物質(zhì)之一，其致癌強(qiáng)度，比二甲基偶氮苯大約900倍以上。除致發(fā)肝癌外，還能誘變胃腺癌、腎癌、直腸癌等其他腫瘤。

在各種黃曲霉毒素中，B1的毒性和致癌性最強(qiáng)，其次是G1。黃曲霉毒素Bl最常見(jiàn)，含量最高。Ml是B1的代謝產(chǎn)物，奶牛可分泌入牛奶，危害人類健康。美國(guó)食品藥品管理局對(duì)牛奶中的M1檢測(cè)含量控制在0.5mg/kg以下，歐盟為0.05mg/kg以下。慢性中毒：人或動(dòng)物持續(xù)地?cái)z人一定量的黃曲霉毒素，引起中毒，主要呈現(xiàn) 旰臟的慢性損傷。急性或亞急性中毒：雛鴨對(duì)B