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文檔簡介
概述念珠菌屬(Candida)屬于子囊菌亞門-子囊菌綱-酵母菌目-酵母菌科-念珠菌屬共同特征為細胞呈球形、橢圓形、圓桶形、長條形,有時為不規則形芽殖,除光滑念珠菌外,所有菌種及變種的全部或多數可形成假菌絲,少數可形成厚膜孢子及真菌絲無關節孢子、子囊孢子、冬孢子或擲孢子當前1頁,總共53頁。概述Lodder于1970年把念珠菌分成81種及7個變種,此后又陸續發現許多新種,目前至少已達270余種臨床上常見的致病念珠菌有10余種,其中以白念珠菌最為多見,致病力也最強,但其他念珠菌引起深部感染的比例在上升該屬能引起從皮膚黏膜甲板到系統內臟血液的廣譜病變,是迄今最重要的人類病原真菌當前2頁,總共53頁。念珠菌病-廣譜病變最多見的深部真菌感染從皮膚粘膜到內臟血液的廣譜病變口腔念珠菌病常是HIV感染的首發癥狀當前3頁,總共53頁。念珠菌病-來龍去脈內源性感染:消化道30-50%陰道20%咽部1-4%皮膚2%外源性感染:寄生于水果、奶制品等性伴傳染,母嬰傳染院內爆發性傳染當前4頁,總共53頁。念珠菌感染的流行病學易感因素:
醫源性:廣譜抗生素、皮質類固醇激素、免疫抑制劑的普遍應用,放療、化療、透析技術的廣泛開展,器官移植、導管插管、高營養支持、大型手術等新方法推廣普及惡性病:惡性腫瘤、惡性血液病、艾滋病、燒傷、吸毒、糖尿病等老齡化:人口老齡化的速度在加快當前5頁,總共53頁。念珠菌感染的流行病學病原菌和分離率:
過去20年間大量文獻報道引起醫院真菌感染的主要致病菌為念珠菌屬、曲霉屬、毛霉屬和酵母屬在美國,由念珠菌引起的院內血行感染的發病率1980-1992上升了500%美國CDC發現醫院里最具威脅性的病菌是念珠菌,占醫院真菌感染的80%;國內報告為74.5%,亦有報道為96.09%在念珠菌中,白念所占的比重逐漸下降,近平滑、熱帶、光滑和克柔的感染率在較快上升當前6頁,總共53頁。當前7頁,總共53頁。當前8頁,總共53頁。當前9頁,總共53頁。當前10頁,總共53頁。當前11頁,總共53頁。念珠菌病的臨床表現淺部念珠菌病
皮膚念珠菌病粘膜念珠菌病甲念珠菌病慢性皮膚粘膜念珠菌病特殊宿主淺部念珠菌病深部念珠菌病
內臟念珠菌病中樞念珠菌病播散性念珠菌病當前12頁,總共53頁。皮膚念珠菌病當前13頁,總共53頁。皮膚念珠菌病當前14頁,總共53頁。粘膜念珠菌病當前15頁,總共53頁。甲念珠菌病當前16頁,總共53頁。慢性皮膚粘膜念珠菌病當前17頁,總共53頁。特殊宿主的淺部念珠菌病80%以上HIV陽性的患者在整個疾病過程中的某個階段會出現口腔念珠菌病,念珠菌感染是機會真菌病中最常見的一種在AIDS中顯得優為突出,除了合并皮膚、口腔淺部念珠菌感染外,還可引起食道念珠菌病可出現體重減少,倦怠感,非特異的消化系統癥狀主要有咽下困難,胸骨后疼痛診斷可進行白念珠菌分離。AIDS早期診斷依據中,本癥占很重要的位置當前18頁,總共53頁。特殊宿主的淺部念珠菌病據國際研究和臨床經驗,在艾滋病發病前1—4年內,大多數艾滋病患者都會單獨出現口腔癥狀與HIV感染密切相關的口腔病變有以下幾種:發生于上腭及舌背,在紅色區域上有時可見白色斑點或斑塊或者發生在口腔的任何部位,表現為白色或黃色斑點或斑塊,斑塊可以擦去,留下紅色區域并伴有出血有人認為口腔念珠菌感染和毛狀白斑可作為艾滋病的預測性指標當前19頁,總共53頁。內臟念珠菌病念珠菌性腸炎念珠菌性支氣管炎念珠菌性肺炎念珠菌性泌尿道炎其他食道炎、心內膜炎、腦膜炎、敗血癥等亦可侵犯肝、脾等其它內臟當前20頁,總共53頁。中樞念珠菌病——念珠菌腦膜炎兒童比較多見,常繼消化道或呼吸道感染經血循環或通過靜脈插管引起臨床有腦膜刺激癥,但視乳頭水腫及顱壓增高現象不明顯,腦脊液細胞計數不高,糖稍低或正常,但蛋白升高除白念珠菌外,熱帶、克柔和近平滑念珠菌也可引起當前21頁,總共53頁。播散性念珠菌病念珠菌血癥急性播散性念珠菌病慢性播散性念珠菌病當前22頁,總共53頁。念珠菌敗血癥在重癥患者中,腸道念珠菌可進入血循環引起血行播散,最常引起肺或腎念珠菌病。患者可有畏寒發熱,血培養陽性,特別在感染后24~48小時,但數日后轉為陰性;如持續陽性,預后不佳患者可并發內眼炎,兩眼疼痛,視力模糊,眼底顯示棉球狀改變。致病菌多為白念珠菌,少數(25%)為熱帶念珠菌臨床上有時表現多系統病變,但血培養陰性(陽性期已過),尿陽性,可借以診斷為播散性念珠菌病當前23頁,總共53頁。念珠菌菌血癥和其他由于長時間靜脈補液,尤其是超過20天者易引起念珠菌菌血癥,血培養可以陽性,但24小時后轉陰,癥狀較輕,可自愈,亦可惡化,視機體抵抗力而定其他:如局灶性肝念珠菌病、骨和關節念珠菌病、念珠菌甲狀腺炎、腹膜炎、前列腺炎等都有報告當前24頁,總共53頁。播散性念珠菌病的皮膚表現當前25頁,總共53頁。播散性念珠菌病內眼炎當前26頁,總共53頁。當前27頁,總共53頁。當前28頁,總共53頁。念珠菌病的實驗室診斷直接鏡檢培養鑒定免疫學技術分子生物學技術當前29頁,總共53頁。直接鏡檢當前30頁,總共53頁。培養鑒定培養基:沙氏培養基溫度:25-30℃24-48小時顯色培養基:CHROMagar當前31頁,總共53頁。培養鑒定1.白念珠菌菌落SDA25℃中等速度生長酵母樣菌落奶油樣、光滑、閃光,老后有皺褶顯微鏡真菌絲和假菌絲芽生孢子假菌絲連接處:簇狀、葡萄狀小分生孢子頂端或側枝:厚壁孢子顯色培養基:藍綠色、翠綠色當前32頁,總共53頁。培養鑒定2.熱帶念珠菌菌落SDA25℃中等速度生長光滑、乳白色奶油樣菌落陳舊菌落有皺褶顯微鏡假菌絲孢子稍長假菌絲連接處:小分生孢子顯色培養基:藍灰色、暗藍色當前33頁,總共53頁。培養鑒定3.近平滑念珠菌菌落SDA25℃中等速度生長光滑、柔軟陳舊菌落奶油樣、白色、閃光、有時黃色、平滑或有皺褶顯微鏡假菌絲孢子卵圓形或長倒卵形假菌絲連接處:小分生孢子顯色培養基:淡粉色、白色當前34頁,總共53頁。培養鑒定4.克柔念珠菌菌落SDA25℃中等速度生長扁平、柔軟、光滑陳舊菌落污黃色,可有皺褶顯微鏡假菌絲孢子卵圓形,有的較長假菌絲連接處:小分生孢子顯色培養基:淡粉色、紫色當前35頁,總共53頁。培養鑒定5.光滑念珠菌菌落SDA25℃中等速度生長光滑、柔軟、閃光、奶油樣菌落顯微鏡CMA25℃無假菌絲孢子卵圓形顯色培養基:白色、粉紫色當前36頁,總共53頁。快速鑒定工具當前37頁,總共53頁。免疫學技術念珠菌抗體的檢測對診斷深部念珠菌病有一定作用所有懷疑念珠菌深部感染的病例均應做血清學檢查,但對結果要有合理解釋單獨一次沉淀試驗陽性結果并不能建立診斷,因為用表面抗原和菌體抗原不能區分是深部感染產生的抗體還是黏膜寄生或感染產生的抗體;一次沉淀試驗陰性結果并不能除外免疫低下患者念珠菌感染的診斷,因為這種患者常不能產生可檢出的免疫學應答因此,血清學檢測在定期、間隔、連續進行時最有價值當前38頁,總共53頁。免疫學技術
——β-(1-3)-D-葡聚糖檢測(G試驗)真菌細胞壁成分,占50%以上;具真菌特異性只能用于檢測有無真菌成分而不能確定是哪種真菌除隱球菌和某些接合菌外大多數真菌共有成分,主要用于念珠菌和曲霉感染的診斷敏感性及特異性在78~100%之間,陽性預測值較低,陰性預測值高與GM試驗聯合應用可提高陽性率連續2次陽性才能作為診斷依據,具體的判定界值尚不統一(50pg/ml?)尚需要進一步的多中心前瞻性研究當前39頁,總共53頁。免疫學技術
——β-(1-3)-D-葡聚糖檢測(G試驗)G試驗的假陽性問題以下情況可出現假陽性:使用纖維素膜進行血透,標本或患者暴露于紗布或其他含有葡聚糖的材料靜脈輸注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品鏈球菌血癥操作者處理標本時存在污染另外,使用多糖類抗癌藥物、放化療造成的粘膜損傷導致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經胃腸道進入血液等也可能造成假陽性當前40頁,總共53頁。免疫學技術
——半乳甘露聚糖(GM)檢測GM試驗檢測的是半乳甘露聚糖,主要適于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷,也可用于念珠菌等感染的輔助診斷GM釋放量與菌量成正比,可以反映感染程度。連續檢測GM可作為治療療效的監測在造血干細胞移植患者中的診斷敏感性高以下情況可出現假陽性:使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦;新生兒和兒童;血液透析;自身免疫性肝炎等;食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等以下情況可出現假陰性:釋放入血循環中的曲霉GM(包括甘露聚糖)并不持續存在而是會很快清除;以前使用了抗真菌藥物;病情不嚴重;非粒細胞缺乏的患者連續2次>0.5或單次>0.7判為陽性當前41頁,總共53頁。分子生物學技術當前42頁,總共53頁。分子生物學技術當前43頁,總共53頁。分子生物學技術DNA序列數據處理序列片段聯接和正反鏈校正常用軟件Lasergene(DNAStar)(/)DNASIS(/uk/dnasis.html)Sequencher(/)BioEdit(免費軟件,/BioEdit/bioedit.html)從國際核酸序列數據庫(GenBank/DDBJ/EMBL)中搜索(BLAST)和下裁同源序列多序列比對(align)常用軟件ClustalW或ClustalX(免費軟件)(http://www-igbmc.u-strasbg.fr/BioInfo/ClustalX/Top.html)當前44頁,總共53頁。當前45頁,總共53頁。當前46頁,總共53頁
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