第五章蛋白質的合成，轉運和加工第一節氨基酰-tRNA的形成及核糖體的作用位點一.氨基酰tRNA分子的形成氨基酸的活化活化：

aa+ATP+E*氨基酰-AMP-E+PPi

轉移：氨基酰-AMP-E+tRNAaa-tRNA+AMP+E當前1頁，總共60頁。當前2頁，總共60頁。當前3頁，總共60頁。當前4頁，總共60頁。二．氨酰tRNA合成酶的鑒別功能動力學校對（Kineticprofreading）化學校對（Chemicalproofreading）當前5頁，總共60頁。當前6頁，總共60頁。當前7頁，總共60頁。當前8頁，總共60頁。當前9頁，總共60頁。三核糖體的作用位點⑴A位點（或稱acceptorsite）可以進入氨基酰-tRNA(aminoacyl-tRNA)。⑵P位點(或稱供位，donorsite)是被肽基酰-tRNA(peptidyl-tRNA)所占據。(3)E位點(Exitsite)脫酰tRNA(deacylated-tRNA)短暫地占據。當前10頁，總共60頁。當前11頁，總共60頁。當前12頁，總共60頁。第二節肽鏈的合成一.在細菌中翻譯的起始⑴IF-3是30S亞基與mRNA起始位點的特異結合所必須的。⑵IF-2是特異地和起始tRNA結合并把它帶到起始復合體中。⑶IF-1僅作為完整的起始復合物的一部分,與30S亞基結合。它結合在A位能阻止氨酰tRNA的進入。它的定位還阻止30S和50S的結合。當前13頁，總共60頁。當前14頁，總共60頁。當前15頁，總共60頁。2.起始復合物的形成(1)IF-3和核糖體30SrRNA結合使16SRNA和mRNA的S-D順序結合a.使30S保持游離b.形成起始復合體I(2)IF-2+GTP+氨酰甲硫氨酸中間復合體。

(3)50S+30S復合體III，釋放IF-1,IF-2。當前16頁，總共60頁。當前17頁，總共60頁。當前18頁，總共60頁。當前19頁，總共60頁。當前20頁，總共60頁。當前21頁，總共60頁。原核生物翻譯起始因子當前22頁，總共60頁。二.起始tRNA的特點翻譯時的第一個密碼子是怎樣被識別的呢？(一)小亞基上16SrRNA3′端的六核苷酸(3′-UCCUCC-5′）和Shine-Dalgarno順序（5′-AAACAGGAGG-3′）互補，相互結合，使下游的AUG起始密碼子定位在P位上。(二)核糖體結合位點也含有一個信號起始密碼子（initiationcodon）－AUG。當前23頁，總共60頁。起始和延伸Met-tRNAs的區別⑴兩種tRNA本身有差別；⑵氨基酸的狀態不同。當前24頁，總共60頁。當前25頁，總共60頁。fMet-tRNA與Met-tRNA有什么不同？⑴Met-tRNAmMet在受體臂末端的一對堿基是GC，在fMet-tRNAfMet是CA，C可以和起始因子IF-2結合。⑵tRNAfMet在反密碼子環的莖上有3對G-C,若發生突變將會阻止其進入P位點。⑶tRNAfMet的反密碼子環上的是A，tRNAmMet是烷基化腺嘌呤。tRNAfMetTψC環端是A，tRNAmMet的相應位置是G，作用不清。當前26頁，總共60頁。當前27頁，總共60頁。當前28頁，總共60頁。三真核生物蛋白質合成的起始當前29頁，總共60頁。當前30頁，總共60頁。當前31頁，總共60頁。當前32頁，總共60頁。

四.起始時mRNA和rRNA的堿基配對(一)原核30S小亞基和S-D順序的結合在細菌中被核糖體保護的DNA區域長35-40堿基長。有2個共同的特點:⑴含有起始密碼子AUG；⑵有一個順序和16SrRNA近3端的順序互補。當前33頁，總共60頁。當前34頁，總共60頁。當前35頁，總共60頁。當前36頁，總共60頁。當前37頁，總共60頁。(二)真核合成起始時小亞基和

起始位點的結合真核細胞質中的核糖體并不在編碼區開始處直接和起始位點相結合。首先識別5端甲基化的帽子結構。內部核糖體進入位點(internalribosomeentrysite,IERS)A最適合的鄰接順序是GCCCCAUGGG稱為Kozak順序當前38頁，總共60頁。當前39頁，總共60頁。第二節肽鏈合成的延伸和終止一肽鏈合成的延伸肽鏈的延伸可分為三個階段：⑴進位反應：主要是密碼子-反密碼子的識別；⑵轉位反應：涉及肽鏈的形成；⑶移位反應：tRNA和mRNA相對核糖體的移動。當前40頁，總共60頁。(一)進位反應1.延伸因子（elongationfactor）(1)當GTP存在時，EF-Tu呈活性狀態。(2)當GTP水解成GDP時，EF-Tu便失活。(3)GDP被GTP取代后，它又恢復活性。當前41頁，總共60頁。

翻譯的延伸當前42頁，總共60頁。當前43頁，總共60頁。當前44頁，總共60頁。當前45頁，總共60頁。當前46頁，總共60頁。表15-4原核生物蛋白質合成的延伸因子

因子基因功能抑制劑EF-TutufA,tufB與氨基酰tRNA黃色霉素及GTP結合EF-Tstsr結合EF-Tu，取代GDPEF-G結合核糖體梭鏈孢酸

和GTP

當前47頁，總共60頁。當前48頁，總共60頁。當前49頁，總共60頁。當前50頁，總共60頁。

真核生物翻譯的延伸當前51頁，總共60頁。當前52頁，總共60頁。當前53頁，總共60頁。當前54頁，總共60頁。當前55頁，總共60頁。二．肽鏈合成的終止終止密碼UAA,UGA,UAG；在E.coli中釋放因子（releasefactors（RF））;RF1識別UAA；RF2識別UGA和UAG。這兩種因子作用于A位點,且需要P位點的肽酰-tRNA存在。終止反應是釋放因子識別終止位點并與之結合，激活肽基轉移酶，水解了P位點上多肽與tRNA之間的鍵，然后釋放了多肽和tRNA。在真核系統中只有一種釋放因子——eEF可識別3種終止密碼子。當前56頁，總共60頁。當前57頁，總共60頁。當前58頁，總共60頁。當前5