五大類營養物質微生物植物組培動物細胞培養碳源有機碳/CO2蔗糖？葡萄糖氮源有機氮/N2/

NH3/

NH4+/

NO3-含氮礦質離子氨基酸生長因子維生素、氨基酸、堿基等維生素、一些氨基酸維生素、動物血清無機鹽無機鹽礦質離子無機鹽水水水水微生物的營養代謝和生長專家講座第1頁概念起源作用碳源凡是能為微生物提供所需碳元素營養物質無機碳源

CO2NaHCO3等有機碳源

糖類脂肪酸花生粉餅石油等①組成細胞物質和一些代謝產物②異養微生物能源1、微生物碳源

自養型和異養型微生物分別能利用哪類碳源物質？思索微生物的營養代謝和生長專家講座第2頁碳源有機C-貯存化學能

（糖類等有機物）無機C（CO2及碳酸氫鹽）異養型微生物自養型微生物不一樣生物碳源同化類型自養型異養型CO2+H2O能量酶（CH2O）只能利用現成有機物決定微生物的營養代謝和生長專家講座第3頁光能自養型以無機物如H2、H2S、S等作為供氫體或電子供體，使CO2還原為細胞物質；比如，藻類及藍細菌等和植物一樣，以水為電子供體（供氫體），進行產氧型光合作用，合成細胞物質。而紅硫細菌，以H2S為電子供體，產生細胞物質，并伴隨硫元素產生。CO2+2H2S光能光合色素[CH2O]+2S+H2O微生物的營養代謝和生長專家講座第4頁2.氮源氮源：能為微生物提供所需氮元素營養物質種類：無機氮源N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽、尿素有機氮源牛肉膏、蛋白胨慣用氮源：銨鹽、硝酸鹽氮源(1)氨基酸自養型生物---------綠色植物、很多微生物

(尿素、銨鹽、硝酸鹽和氮氣)（2）基酸異養型生物----------動物、大量異養微生物(3)

“N·C·H·O”類營養物常是異養微生物能源、碳源兼氮源

功效：合成蛋白質、核酸以及含氮代謝產物培養自生固氮菌、根瘤菌、硝化細菌時需要哪一類氮源？微生物的營養代謝和生長專家講座第5頁氮源有機N-也可作有機碳源、貯存化學能

（蛋白胨、牛肉膏等）無機NN2NH3NH4+NO3-不一樣生物氮源硝化細菌反硝化細菌固氮微生物各種異養型微生物各種微生物也是能源生物固氮硝化作用反硝化作用氮循環N2→NH3NH3→NO3-NO3-→N2決定微生物的營養代謝和生長專家講座第6頁3.生長因子設計試驗：怎樣證實某種物質是某種微生物生長因子?生長因子：微生物生長不可缺乏微量有機物種類：各種維生素、氨基酸、堿基等起源：酵母膏、蛋白胨動植物組織提取液功效：酶、核酸組成成份微生物生長必需物質微生物的營養代謝和生長專家講座第7頁問題:假如你需要自己培養微生物,應該怎樣利用這些物質？應該怎樣操作？

可設置以下一些問題，加強知識反饋。①不加含碳有機物無碳培養基能夠分離哪類微生物？②若硝化細菌、圓褐固氮菌、不固氮藍藻混合在一起，我們配置什么樣培養即能夠將三種微生物分離？結合微生物代謝類型進行討論。微生物的營養代謝和生長專家講座第8頁碳源氮源能源硝化細菌CO2氨氨圓褐固氮菌糖類等含碳有機物N2有機物不固氮藍藻CO2銨鹽、硝酸鹽光微生物的營養代謝和生長專家講座第9頁①、目標要明確依據所培養微生物種類、培養目標配制②、營養要協調注意各種營養物質濃度和百分比,最主要為碳源和氮源比，如：谷氨酸生產中C:N=4:1，菌體數↑谷氨酸↓。

C:N=3:1，菌體數↓谷氨酸↑。③、pH要適宜

細菌pH6.5~7.5放線菌pH7.5~8.5

真菌pH5.0~6.0培養基配制標準微生物的營養代謝和生長專家講座第10頁培養基種類培養基種類按物理性質分固體培養基（分離、計數等）半固體培養基（觀察運動、保種）液體培養基（工業生產）按化學成份分合成培養基（化學成份明確，慣用于分類、判定等）天然培養基（天然物質配制，成份不明確，慣用于工業生產）按用途分選擇培養基（用于從各種微生物中選出需要種類）判別培養基（用于判定某一微生物存在）微生物的營養代謝和生長專家講座第11頁選擇培養基

加入青霉素培養基

加入高濃度食鹽培養基

不加氮源無氮源培養基

不加含碳有機物無碳源培養基

加入青霉素等抗生素培養基

加入氨基喋呤、次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷培養基

分離酵母菌、霉菌等真菌分離金黃色葡萄球菌分離固氮菌分離自養型微生物分離導入了目標基因受體細胞分離雜交瘤細胞微生物的營養代謝和生長專家講座第12頁關注教材科學試驗方法，怎樣將某種細菌從雜菌中分離出來？

德國著名細菌學家科赫用瓊脂（成份是多聚半乳糖硫酸酯，極難被微生物分解，無營養價值，粘著力強）做凝固劑固體培養基，科赫將微生物樣品稀釋后，用針尖沾取少許稀釋菌液在固體培養基上畫線，因為微生物在固體培養基上生長部位固定，很快培養基表面就長出各種菌落，相同特征菌落來自同一個種，挑選某一個菌落微生物，經過不停稀釋、培養就得到了純種。科赫分離了結核桿菌而獲諾貝爾生理學獎。微生物的營養代謝和生長專家講座第13頁用稀釋劃線法取得不一樣細菌菌落微生物的營養代謝和生長專家講座第14頁固體培養基半固體培養基液體培養基主要用于微生物分離、計數等主要用于觀察微生物運動、判定菌種等主要用于工業生產需加入凝固劑，如瓊脂微生物的營養代謝和生長專家講座第15頁在伊紅美蘭培養基上生長微生物的營養代謝和生長專家講座第16頁

微生物營養（1）微生物需要五大類營養要素物質是：碳源、氮 源、生長因子、水、無機鹽。（2）微生物培養基配制標準：目標要明確、營養要協調、pH要適宜（3）培養基種類：按物理性質分：液體培養基半固體培養基按化學成份分