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文檔簡介
細菌鑒定中常用的生理生化反應(yīng)第一頁,共十頁,2022年,8月28日一.實驗?zāi)康?.了解幾種細菌鑒定中常用的生化反應(yīng)及其原理。2.掌握細菌生化反應(yīng)試驗的基本方法。第二頁,共十頁,2022年,8月28日
二、實驗原理
1.淀粉水解試驗?zāi)承┘毦墚a(chǎn)生淀粉酶將淀粉水解為麥芽糖和葡萄糖,再吸收利用。淀粉水解后遇碘不再顯藍色。
2.明膠液化試驗?zāi)承┘毦芊置诿髂z酶分解明膠產(chǎn)生小分子物質(zhì),使培養(yǎng)基由凝固狀態(tài)變成液態(tài)。第三頁,共十頁,2022年,8月28日三、主要器材1.菌種:大腸桿菌(E.
coli)、變形桿菌、枯草桿菌
2.培養(yǎng)基:淀粉培養(yǎng)基、明膠培養(yǎng)基3.試劑
:碘液、甲基紅試劑。4.器材:試管、小套管、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、酒精燈、恒溫培養(yǎng)箱第四頁,共十頁,2022年,8月28日四、操作步驟(一)淀粉水解試驗1.
標記
:取淀粉培養(yǎng)基平板1塊,在其左右兩邊分加標記大腸桿菌、枯草桿菌。
2.
接種:以無菌操作分別接種大腸桿菌、枯草桿菌于以上平板的各相應(yīng)部位。3.培養(yǎng):倒置于37℃培養(yǎng)48h后觀察結(jié)果。第五頁,共十頁,2022年,8月28日淀粉水解試驗示意圖第六頁,共十頁,2022年,8月28日(二)明膠液化試驗1.
標記
:取明膠培養(yǎng)基試管3支,分別標記大腸桿菌、枯草桿菌。
2.
接種:以無菌操作分別穿剌接種大腸桿菌、枯草桿菌至以上各相應(yīng)試管中。3.培養(yǎng):置28℃培養(yǎng)48~120h后觀察結(jié)果。第七頁,共十頁,2022年,8月28日五、實驗結(jié)果1.淀粉水解試驗結(jié)果觀察打開皿蓋,滴加少量碘液于平板上,鋪勻,若菌苔周圍出無色透明圈說明淀粉已被水解。透明圈的大小可說明該菌水解淀粉能力的強弱。2.明膠液化試驗結(jié)果觀察觀察試管明膠培養(yǎng)基是否液化及液化的形態(tài)。第八頁,共十頁,2022年,8月28日明膠液化試驗結(jié)果第九頁,共十頁,2022年,8月28日
六.注意事項
1.培養(yǎng)基滅菌時要盡量排盡鍋內(nèi)冷空氣,滅菌后要等鍋內(nèi)壓力降到零再打開排氣閥。
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