經典word整理文檔，僅參考，雙擊此處可刪除頁眉頁腳。本資料屬于網絡整理，如有侵權，請聯系刪除，謝謝！福建師范大學福清分校本科畢業論文(設計)開題報告生物與化學工程系生物技術專業高級實驗師，碩士姓名O3NN咖啡因NON1，3，7-三甲基-2，6-二氧嘌呤3許多的藥品和飲料中。但是，大劑量或長期使用也會對人體造成損害，特別是它也有成癮性，一旦停用會出現精神萎頓、渾身困乏疲軟等各種戒斷癥狀，雖然其成癮性較弱，戒斷癥狀也不十分嚴重．但由于藥物的耐受性而導致用藥量不斷增加時，咖啡因就不僅作用于大腦皮層，還能直接興奮延髓，引起陣發性驚厥和骨骼震顫，損害肝、胃、腎等重要內臟器官，誘發呼吸道炎癥、婦女乳腺瘤等疾病，甚至導致吸食者下一代智能低下，肢體畸形。因此也被列入受國家管制的精神藥品范圍。咖啡因既被作為飲品，也被作為藥品，其作用都是提神及解除疲勞。每個人所需要的能夠產生效果的咖啡因精確劑量并不相同，主要取決于體型和咖啡因耐受度。隨著快速消費品、飲料等行業的快速發展，咖啡因目前已成為人們日常生活中消費較多的具有藥理活性的物質。例如可樂，最初就是由可樂果制得。一瓶軟飲料中一般含有10毫克至50毫克的咖啡因。能量飲料，例如紅牛，每瓶含有80毫克咖啡因。這些飲料中的咖啡因來源于它們所用的原始成分或由脫咖啡因咖啡所得的添加劑，也有是通過化學合成的。茶葉是常見的飲品，不同品種的茶葉含有的咖啡因含量也不同，反應在口感上也不同，所以對茶葉中含有的咖啡因進行測定是非常必要的。茶的咖啡因含量決定于制茶的強度。特定品種的茶，例如紅茶和烏龍茶，比其他茶的咖啡因含量高。茶的制作對于茶有很大影響，但是茶的顏色幾乎不能指示咖啡因的含量。日本綠茶的咖啡因含量就遠遠低于許多紅茶，例如正山小種茶，幾乎不含咖啡因。咖啡因的測定方法已經有較多報道，經典的分析方法有重量法、碘量法、比色法等。這些方法雖然簡便，但因其操作較煩瑣、測定周期相對較長，在應用上受到一定的限制。目前測定咖啡因的方法主要有色譜法和紫外分光光度法，其中色譜法以高效液相色譜法較為常用。紫外分光光度法是利用咖啡因結構上的嘌呤環具有共軛雙鍵體系，在272～274nm波長范圍內有最大吸收，從而可進行定量分析。另外還有導數紫外分光光度法，它是利用導數技術進行光度法分析，解決混合組分測定時的相互干擾，同時更有效地消除混濁液的散射影響和背景吸收，也提高光譜分辨率。隨著茶葉質量安全準入制度的實施，對茶葉的品質質量要求越來越高，這對我國茶葉品質鑒定和檢測提出更高的要求。紅外光譜分析技術是近年來發展起來的一種定性和定量分析技術，因其快速、不破壞樣品、操作簡單等特點，已廣泛應用于石化、食品、醫藥、農業等領域。除此之外，近紅外光譜技術也已逐步應用于茶葉加工中品質檢測、品種識別等領域，在定性和定量檢測方面表現出巨大的潛力，因此應用快速、簡便、準確的現代分析方法定性和定量分析茶葉的種類和品質是目前一項重要的研究課題，就是我們開展這個課題的主要目的。本課題首先對市售綠茶，紅茶，烏龍茶三種茶葉進行咖啡因的提取，繼而準確稱取定量咖啡因對照品，以鐵氰化鉀作為內標物，使咖啡因對照品與鐵氰化鉀的量成一定比例，加入等量的溴化鉀，充分研磨并混合均勻，配制成標準系列，選擇咖啡因中不受干擾的特征吸收峰羰基峰和鐵氰化鉀中的特征吸收峰氰基峰，通過咖啡因特征峰吸光度與鐵氰化鉀特征峰的吸光度的峰高之比與咖啡因的質量與鐵氰化鉀的質量的之比進行線性回歸分析，從而獲得標準工作曲線。用相同方法對三種待測咖啡因樣品進行測定，通過標準曲線獲得待測咖啡因的濃度，并分析其茶葉品質。實驗方案儀器：脂肪提取器、電熱套、、蒸餾儀器（套）、燒杯、蒸發皿、漏斗、棉花、石棉網、濾紙、研缽、傅立葉變換紅外光譜儀：FT—IR，NEXUS一870、電子天平：FA100，上海精密儀器儀表有限公司；試劑：茶葉、95%乙醇、生石灰、鐵氰化鉀(AR)、溴化鉀(AR)、咖啡因標樣(純度大于99．9％，國藥集團上海化學試劑公司)，測試條件：掃描次數：32，分辨率：4cm-1二、實驗方法b、連續萃取：稱取10g茶葉，研細，用濾紙包好，放入脂肪提取器的套筒中，用120mL95%乙醇水浴加熱連續萃取2-3h。c、蒸餾濃縮：待剛好發生虹吸后，把裝置改為蒸餾裝置，蒸出大部分乙醇。d、加堿中和：趁熱將殘余物傾入蒸發皿中，拌入3～4g生石灰，使成糊狀。蒸氣浴加熱，不斷攪拌下蒸干。a、儀器安裝：安裝升華裝置。用濾紙罩在蒸發皿上，并在濾紙上扎一些小孔，再罩上口徑合適的玻璃漏斗。（1）樣品的前處理：咖啡因標樣、溴化鉀和鐵氰化鉀在進行測定前要進行干燥處理（25份KBr0.3900g0.0080g0.0060g、0.0050g0.0040g0.0020g0.0030g0.0040g0.0050g0.0060g(準確到±00001g)置于瑪瑙研缽中，充分研磨，注意研磨過程中不要讓樣品損失。充分混合均勻后控制一定的壓力進行制樣，繪制混合樣品的紅外光譜吸收譜圖，對每一個混合樣品均進行3次測定，測定其平均值。以咖啡因中不受干擾的特征吸收峰羰基峰和鐵氰化鉀中的特征吸收峰氰基峰，通過咖啡因特征峰吸光度與鐵氰化鉀特征峰的吸光度的峰高之比為縱坐標，咖啡因的質量與鐵氰化鉀的質量的之比為橫坐標進行線性回歸分析，從而獲得標準工作曲線。（3）將茶葉提取物平均分成10份，與已知量的內標物進行充分研磨，在同樣條件下用紅外光譜法側得出咖啡因特征峰吸光度與鐵氰化鉀特征峰的吸光度的峰高之比，帶入標準曲線中計算出茶葉提取物中咖啡因的含量。與資料文獻【】中三種茶葉的咖啡因含量進行對比（紅茶含咖啡因約3.2﹪，綠茶含咖啡因約2.5﹪，烏龍茶含咖啡因約**）。將已處理好的咖啡因用內標物和溴化鉀稀釋成濃度不同的3份樣品，每份分別平行測定5次，分別計算出相對標準偏差(RSD)。按該實驗方法測定待測樣品中咖啡因的含量并加標準的咖啡因對照品進行了驗證，測定實驗的回收率。準確稱取咖啡因的標樣以乙醇作溶劑配制標準系列，以溶液濃度對色譜峰面積作圖，得到標準曲線，以紅外光譜法測定的咖啡因的濃度C。配制溶液用HPLC法測定．得測定結果C，相對誤差為(C。一C)／C，與標準方法進行比較，說明測定結果的準確度。10.07.17-10.08.25查閱有關資料，對咖啡因的提取工藝及測定咖啡因的方法進行充分的了解10.08.26-10..08.30充分了解掌握實驗內容，計算所需茶葉、藥品的量10.09.0210.09.25-10.10.20參考文獻資料，不斷改變咖啡因對照品、內標物鐵氰化鉀及溴化鉀的含量，制作出不同的標準系列，并分別以峰高和峰面積兩種方法做比較，取線性關系最好的為本實驗的標準曲線。10.10.21-10.10.30測定茶葉提取物中咖啡因的含量:將待測咖啡因樣品平均分成10份，用相同方法對待測咖啡因樣品進行測定，通過標準曲線獲得待測咖啡因的濃度。10.11.04-10.11.05將已處理好的咖啡因用內標物和溴化鉀稀釋成濃度不同的樣品，每份分別平行測定5次,計算相對標準偏差(RSD)，說明該方法的精密度是好是壞。10.11.06-10.11.07方法回收率的測定。10.11.08-10.11.30實驗總結，完成畢業論文。1.根據不斷改變咖啡因對照品、內標物鐵氰化鉀及溴化鉀的含量，獲得了線性關系較好的標準曲線，并作出樣品的定量分析。2.用HPLC法進行對照實驗結果，計算相對誤差，且相對誤差較小，與標準方法進行比較，說明測定結果的準確度較高。3.對方法的重現性的研究，計算得的相對標準偏差較小，說明該方法的精密度較好。方法回收率的測定，獲得的回收率較高，說明結果較好。參考文獻HorieH，NesumiA，ujiharaT，eta1．Rapiddeterminationofcaffeineintealeaves[J]．JournalofChromatographyA，2002，942(2)：271—273．ParadkarMMlrudayarajJRapiddeterminationofcaffeinecontentinsoftdrinksusingFTIR—ATRspectroscopy[J]．FoodChemistry，2002，78(2)：261—266．[1][2][3][J]．哈爾濱師范大學學報：自然科學版，23(1)：[4]戴軍