本身抗體應(yīng)用及研究進(jìn)展

-04-13自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第1頁2酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）

1間接免疫熒光法（IFAIndirectFluorescentAssay

）3免疫印跡法（IB）WesternblotLIA4其它：IDA、RIA等自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第2頁全自動(dòng)本身抗體分析儀自動(dòng)化檢測檢測定量化單個(gè)項(xiàng)目隨時(shí)檢測多個(gè)項(xiàng)目同時(shí)檢測45-90分鐘匯報(bào)結(jié)果原廠質(zhì)控和校正血清準(zhǔn)確溫度調(diào)控系統(tǒng)五點(diǎn)定標(biāo)、三重檢測自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第3頁自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第4頁風(fēng)濕病試驗(yàn)室診療血清學(xué)檢驗(yàn)

本身抗體——特異性非特異免疫相關(guān)指標(biāo)滑液分析普通試驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第5頁項(xiàng)目檢驗(yàn)方法SLE四項(xiàng)

ANA間接免疫熒光抗DS－DNA抗體間接免疫熒光抗組蛋白抗體ELISA抗核小體抗體ELISAENA系列

抗RNP免疫印跡、ELISA抗SM免疫印跡、ELISA抗SSA免疫印跡、ELISA抗SSB免疫印跡、ELISA抗JO-1免疫印跡、ELISA抗SCL-70免疫印跡、ELISA抗核糖體P蛋白免疫印跡、ELISARA三項(xiàng)

AKA（抗角質(zhì)蛋白抗體）間接免疫熒光抗RA33ELISA抗CCP（抗環(huán)瓜氨酸肽抗體）ELISAANCA四項(xiàng)

P-ANCA（熒光模型為核周模型）間接免疫熒光C-ANCA（熒光模型為細(xì)胞質(zhì)模型）間接免疫熒光MPO-ANCA（髓過氧化酶抗體）ELISAPR3-ANCA（抗蛋白酶3抗體）ELISA常見本身抗體及其檢測方法(1)自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第6頁(2)本身免疫肝炎七項(xiàng)

ANA間接免疫熒光抗LMA抗（肝細(xì)胞膜抗體）間接免疫熒光ASMA（抗平滑肌抗體）間接免疫熒光抗LKM（抗肝腎微粒體抗體）間接免疫熒光抗SLA（抗可溶性肝抗原抗體）間接免疫熒光AMA（線粒體抗體）間接免疫熒光抗LSP（抗肝臟特異性蛋白抗體）間接免疫熒光RF三項(xiàng)

RF-IgGELISARF-IgAELISARF-IgMELISA抗磷脂綜合征三項(xiàng)（ASP）ELISAPT-IgG（凝血素抗體）ELISAPT-IgMELISA抗β2-糖蛋白1抗體ELISA常見本身抗體及其檢測方法自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第7頁抗Ku抗體（Ku)抗Mi抗體（Mi-2）抗PM-Scl抗體抗JO-1抗體（JO-1）多發(fā)性肌炎、皮肌炎抗線粒體抗體M2型（AMA-M2）原發(fā)性膽汁性肝硬化抗nRNP抗體（U1-snRNP）混合性結(jié)締組織病（MCTD）抗Scl-70抗體（Scl-70）抗著絲點(diǎn)B抗體（CENP-B）系統(tǒng)性硬化抗SSB/La抗體抗SSA/R052抗體抗SS-A/R060抗體干燥綜合征/系統(tǒng)性紅斑狼瘡抗核糖體P蛋白（PO）抗增殖細(xì)胞核抗原抗體（PCNA)抗Sm抗體抗組蛋白抗體抗核小體抗體抗雙鏈DNA抗體IgG抗體系統(tǒng)性紅斑狼瘡項(xiàng)目名稱疾病

ANA譜17項(xiàng)（免疫印跡法）(3)常見本身抗體及其檢測方法自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第8頁(一)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）

類風(fēng)濕因子（RF）早期診療系列指標(biāo)抗RA33/36抗體 抗核周因子（APF）抗角蛋白抗體（AKA）抗Sa抗體抗環(huán)瓜氨酸抗體（抗CCP）

自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第9頁類風(fēng)濕因子（RF）抗人IgG分子Fc片段上抗原決定簇特異性抗體,分為IgM、G、A、E型RF在RA中陽性率為70%~８０％，是診療RA主要標(biāo)準(zhǔn)之一RF含量與病情活動(dòng)性和嚴(yán)重性成正比，連續(xù)高滴度RF常提醒RA病情活動(dòng)，骨侵蝕發(fā)生率高，常可伴有皮下結(jié)節(jié)或血管炎等關(guān)節(jié)外表現(xiàn)，提醒預(yù)后不良自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第10頁類風(fēng)濕因子（RF）RF并非RA獨(dú)有特異性抗體，對RA診療不具特異性SLE30%SS70%~90%SSc20%~30%MCTD50%~60%非風(fēng)濕性疾病5%以下正常人RF陽性不等于一定就是RARF陰性也不等于一定就不是RA自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第11頁自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第12頁RF慣用檢測方法RF 1：40陽性乳膠凝集法（測IgM-RF）RF256Iu/ml雙抗夾心ElISA法(測總RF）RF-IgG 110IU/ml -IgA 18IU/ml ELISA法

-IgM200IU/ml自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第13頁RA早期診療系列指標(biāo)

敏感性特異性抗RA33/36抗體35.8%99.6%APF40%-80%70%-90%AKA40%-55%85%-95%抗Sa抗體40%-60%98.6%抗CCP46%-70%96%自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第14頁抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP）瓜氨酸是RA血清抗聚角蛋白微絲蛋白相關(guān)抗體主要抗原決定簇對RA診療含有高度特異性（98%）可在RA早期出現(xiàn)預(yù)測早期關(guān)節(jié)炎發(fā)展為RARA關(guān)節(jié)侵蝕破壞早期識別及預(yù)測自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第15頁(二)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一個(gè)臨床表現(xiàn)有多系統(tǒng)損害癥狀慢性系統(tǒng)性本身免疫性疾病，其血清有以抗核抗體為主大量不一樣本身抗體本身抗體（1）抗核抗體譜——ANA、抗ds-DNA、抗ENA抗體（2）抗磷脂抗體（3）抗組織細(xì)胞抗體——抗RBC抗體抗血小板相關(guān)抗體抗神經(jīng)元抗體（4）其它——RF、p-ANCA自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第16頁抗核抗體（ANA）定義——以細(xì)胞核內(nèi)物質(zhì)為抗原抗體臨床意義①SLE篩查抗體:

95%陽性，但滴度與SLE活動(dòng)性無相關(guān)陰性基本可排除SLE②陽性并非SLE特異陽性并非風(fēng)濕病特異:——風(fēng)濕病（SLE、SSc、SS、RA)非風(fēng)濕性疾病（感染、慢肝、肺纖維化、腫瘤）服用一些藥品（INH、苯妥英鈉、肼苯達(dá)嗪、普魯卡因酰胺）

自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第17頁抗核抗體（ANA）方法——間接免疫熒光法結(jié)果判斷:①滴度〉1：100為陽性②常見核型——5種不一樣核型臨床意義不一樣

自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第18頁

核膜型與抗ds-DNA相關(guān)，多見于SLE，尤其是有腎炎者

均質(zhì)型與AHA（抗組蛋白抗體）、抗DNA相關(guān)，引發(fā)LE形成主要見于SLE、藥品性狼瘡自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第19頁

斑點(diǎn)型與抗ENA相關(guān)，應(yīng)深入查特異性抗體核仁型多見于硬皮病自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第20頁

著絲點(diǎn)型多見于CREST綜合征自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第21頁ANA常見五種核型及臨床意義核膜型——與抗ds-DNA相關(guān)，多見于SLE，尤其是有腎炎者均質(zhì)型——與AHA、抗DNA相關(guān)，引發(fā)LE形成主要見于SLE、藥品性狼瘡斑點(diǎn)型——與抗ENA相關(guān)，應(yīng)深入查特異性抗體核仁型——多見于硬皮病著絲點(diǎn)型——多見于CREST綜合征自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第22頁ANA檢測方法間接免疫熒光法印跡法ELISA法自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第23頁

抗核抗體譜（ANAs）定義：以細(xì)胞核內(nèi)物質(zhì)為抗原抗體

抗DNA抗體——抗ss-DNA抗ds-DNA抗組蛋白抗體——H1，H2A，H2B，H3，H4抗非組蛋白抗體——抗ENA抗體抗著絲點(diǎn)抗體抗核仁抗體其它——線粒體、溶酶體、高爾基體等

自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第24頁抗ds-DNA抗體臨床意義①對SLE診療有較高特異性②滴度與SLE活動(dòng)相關(guān)，可作為病情監(jiān)測及療效觀察指標(biāo)③與SLE腎損害相關(guān)檢測方法①放免法（Farr)——敏感，有利于早期預(yù)測檢測高親協(xié)力抗ds-DNA②間接免疫熒光法(IF)——特異③ELISA——可檢測低親協(xié)力抗ds-DNA有利于中樞狼瘡病情監(jiān)測④金標(biāo)免疫斑點(diǎn)法自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第25頁抗ENA抗體抗RNPMCTD100%陽性，且滴度高 雙手腫脹，雷諾現(xiàn)象，肌炎，指（趾）端硬化 腎臟保護(hù)性抗體？抗SmSLE標(biāo)識性抗體，陽性率30% 有利于早期、不經(jīng)典及治療緩解后SLE回顧性診療 抗Sm陽性一定伴抗RNP陽性，但抗RNP陽性可單獨(dú)存在抗SSA①原發(fā)性SS：60-75%SLE:40-50% ②與皮損、光過敏、白細(xì)胞降低、淋巴結(jié)腫大、血管炎、紫癜相關(guān)③可造成新生兒狼瘡、嬰兒心臟傳導(dǎo)阻滯抗SSB ①原發(fā)性SS：40%，較抗SSA更特異 ②其它CTD伴抗SSB者常伴繼發(fā)性SS自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第26頁抗ENA抗體抗Scl-70硬皮病標(biāo)識性抗體抗Jo-1多肌炎/皮肌炎標(biāo)識性抗體抗Rib 胞漿抗原——核糖體位于胞漿內(nèi)抗Rib陽性+其它本身抗體陰性=ANA陰性

臨床意義①是SLE又一特異性抗體，陽性率10-20%②多見于SLE活動(dòng)期與抗ds-DNA抗體消長相平行但不會(huì)隨病情緩解馬上消失可連續(xù)1-2年后才轉(zhuǎn)陰自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第27頁抗核小體抗體（AnuA）核小體是細(xì)胞染色質(zhì)中一個(gè)成份，它是由DNA和組蛋白以特殊方式相連而組成，在SLE誘導(dǎo)和致病中起主要作用對SLE早期診療有主要意義比抗ds-DNA、抗組蛋白抗體更早出現(xiàn)陽性率：50%~90%特異性﹥98%自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第28頁(三)皮肌炎/多發(fā)性肌炎（PM/DM）免疫學(xué)檢驗(yàn)ANAENA——抗Jo-1陽性其它檢驗(yàn)——肌酶譜肌酸磷酸激酶（CPK）:MM-心肌和骨骼肌MB-心肌BB-平滑肌和腦內(nèi)乳酸脫氫酶（LDH）谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）堿性磷酸酶（ALP）自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第29頁(四)干燥綜合征（SS）ANA——陽性率40%~70%ENA——抗SSA抗體陽性率70%~96%抗SSB抗體陽性率50%~87%抗α-Fordrin——對于pSS或sSS診療有一定意義，但特異性和敏感性并不理想。RF——陽性率75%~100%高球蛋白血癥WBC下降自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第30頁(五)系統(tǒng)性硬化病（pSS）ANA——陽性率50%~55%ENA——抗Scl-70陽性率15%~40%抗著絲點(diǎn)抗體(ACA)陽性自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第31頁(六)混合性結(jié)締組織病（MCTD）ANA陽性ENA——抗RNP高滴度陽性自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第32頁（七）血管炎抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）熒光圖譜分型主要抗原成份胞漿型cANCA核周型pANCA蛋白酶3（PR3）髓過氧化物酶（MPO）非經(jīng)典型（cANCA）不清自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第33頁ANCA臨床意義c-ANCA和PR3-ANCA

對韋格納肉芽腫有高度特異性（95%），敏感性80%

與病情活動(dòng)性相關(guān)常作為判斷藥品療效和病情復(fù)發(fā)指標(biāo)p-ANCA和MPO-ANCA

不如c-ANCA含有診療特異性陽性者血管炎程度較高，其滴度也與病情活動(dòng)相關(guān)主要與顯微鏡下多血管炎

壞死性新月體腎小球腎炎

變應(yīng)性肉芽腫性血管炎相關(guān)自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第34頁（八）抗磷脂抗體綜合征（APS）是一個(gè)非炎癥性本身免疫病，臨床上以動(dòng)/靜脈血栓形成、習(xí)慣性流產(chǎn)和血小板降低等癥狀為表現(xiàn)，血清中存在抗磷脂抗體血清學(xué)檢驗(yàn)抗心磷脂抗體（ACA）——IgG、IgM、IgA（ELISA）抗β2糖蛋白1抗體（抗β2-GP1)狼瘡抗凝物（LA）——凝血酶原時(shí)間（PT）激活部分凝血活酶時(shí)間（APTT）白陶土凝集時(shí)間（KCT）蛇毒試驗(yàn)（αRVVT）自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第35頁抗磷脂抗體抗β2-GP1抗體比LA和ACA在APS患者中更含有特異性，是造成APS主要抗體抗β2GP1抗體只出現(xiàn)于本身免疫性疾病,而ACA也可出現(xiàn)于一些感染性疾病,如梅毒、AIDS、肝炎、結(jié)核等自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第36頁（九）本身免疫性肝病我科開展本身免疫肝炎系列抗體包含：抗核抗體（ANA）抗肝細(xì)胞膜抗體(抗LMA)抗平滑肌抗體（ASMA）抗肝腎微粒體抗體（抗LKM抗體）抗肝-胰抗體(抗LP抗體)抗可溶性肝細(xì)胞抗體（抗SLA）抗線粒體抗體（AMA）自身抗體的應(yīng)用和研究進(jìn)展第37頁本身免疫性肝炎（AIH）