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文檔簡介

關于實驗二溫度和對酶活性的影響第1頁，共9頁，2023年，2月20日，星期三

實驗目的1、了解溫度對酶活性的影響；2、了解酶活性的最適pH及掌握一種檢測最適pH的方法第2頁，共9頁，2023年，2月20日，星期三

實驗原理

酶的催化作用受溫度的影響，在最適溫度下，酶的反應速度最高。大多數動物酶的最適溫度為37～40℃，植物酶的最適溫度為50～60℃。酶對溫度的穩定性與其存在形式有關。有些酶的干燥制劑，雖加熱到100℃，其活性并無明顯改變，但在100℃的溶液中卻很快地完全失去活性。低溫能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。淀粉和可溶性淀粉遇碘呈藍色。糊精按其分子的大小，遇碘可呈藍色、紫色、暗褐色或紅色。最簡單的糊精遇碘不顯顏色，麥芽糖遇碘也不顯色。在不同溫度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈現的顏色來判斷。酶的活力受環境pH的影響極為顯著。不同酶的最適pH值不同。本實驗觀察pH對唾液淀粉酶活性的影響，唾液淀粉酶的最適pH約為6.8。第3頁，共9頁，2023年，2月20日，星期三實驗試劑1、0.2%淀粉的0.3%氯化鈉溶液

2、淀粉酶或稀釋50～100倍的唾液

用蒸餾水漱口，以清除食物殘渣，再含一口蒸餾水，半分鐘后使其流入量筒并稀釋50-100倍，(稀釋倍數可根據各人唾液淀粉酶活性調整)混勻備用。3、碘化鉀-碘溶液

第4頁，共9頁，2023年，2月20日，星期三實驗器材

1、試管及試管架2、恒溫水浴

3、冰浴4、沸水浴第5頁，共9頁，2023年，2月20日，星期三

取3支試管，編號后按下表加入試劑:1、溫度對酶活性的影響管號淀粉溶液（ml）淀粉酶（ml）煮沸的淀粉酶（ml）11.5121.5131.51第6頁，共9頁，2023年，2月20日，星期三

各取不同pH的緩沖液3ml，分注入4支帶有編號碼的試管中，隨后于每個試管中添加0.5%淀粉溶液2ml和淀粉酶2ml。將各試管內容物混勻，并依次置于37℃恒溫水浴中保溫。每隔1分鐘由第3管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1小滴碘化鉀－碘溶液，檢驗淀粉的水解程度。待混合液變為棕黃色時，向所有試管依次添加1－2滴碘化鉀－碘溶液。觀察各試管中物質呈現的顏色，分析pH對唾液淀粉酶活性的影響。錐形瓶號0.2mol/L磷酸氫二鈉（ml）0.1mol/L檸檬酸（ml）pH15.154.855.026.053.955.837.722.286.849.720.288.0

取4個50ml錐形瓶，并編號。用移液管按下表添加0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液和0.1mol/L檸檬酸溶液制備pH5.0～8.0的四種緩沖液。2、pH對酶活性的影響第7頁，共9頁，2023年，2月20日，星期三

注意事項

1．加入酶液后，要充分搖勻，保證酶液與全部淀粉液接觸反應，得到理想的顏色梯度變化。

2．取混合液前，應

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