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文檔簡介
高、超速離心技術及離心過程中應留意的事項在生物科學和醫學領域中離心機主要用于分別細胞和細菌;純化和收集病毒、RNADNA質粒和蛋白質等生物大分子。—.離心機的組成離心機主要有驅動電機、制冷系統、真空系統〔超離有〕、顯示系統、.離心轉頭的選用在離心中最常使用的轉頭是角度頭和水平頭。角度頭常用于差速離心來分別s〔沉降系數〕值相差較大〔1:10〕的樣品。水平頭常用于密度梯度或等密度離心。另有一種垂直轉頭使用較少,此轉頭主要用于等密度離心,以縮短離心時間。三.離心管的選用玻璃離心管不能在高速或者超速離心機上使用。PP〔polypropyiene,聚丙烯〕半透亮。化學及溫度性能穩定,但低4C以下離心。PA〔polyallomer〕半透亮。化學性質最穩定,但高溫易變軟。CAB^celluloseacetobutyrate,醋酸丁酯纖維素〕LH為015C下使用,HT20-40C下使用。透亮。可用于較稀的酸、堿、鹽。但當pH=8以上,有機溶劑,重鹽如CsCI時僅有限條件下可用。適用于酒精及蔗糖梯度。PC〔polycarbonate,聚碳酸酯〕:透亮度好,硬度大,能耐高溫消毒。但不耐強酸強堿及某些有機溶劑如酒精、油、 主要用于5萬rpm以上離心。PCR〔polyclear,超透亮〕PCPC更硬PE〔polyethylene,聚乙烯〕不透亮。對丙酮、醋酸、鹽酸等穩定。高溫易變軟,必需裝滿。PS〔polystyrol,聚苯乙烯〕透亮堅硬。對大多數水溶液穩定,但不能沾很多有機物,一次性使用。多用于低速離心。PF〔polyflor,聚氟〕-100C140C下使用,半透亮。不銹鋼能抗熱,抗化學腐蝕,能高壓消毒,但較重,也較貴。適合于蔗糖、甘油等密度梯度離心。透亮,利于收集。四.留意事項1—5萬〔轉/分〕1克,轉頭5厘米,則F=mxRCF查表得:1萬〔轉/分〕—RCF=6000 —代入公式-F*1x6000=6〔公斤〕5萬〔轉/分〕RCF=150000代入公式—F=1X150000=150〔公斤〕此時引起兩邊不平衡可達6-150〔公斤〕 ,這對離心機的損傷是很大的,至少將縮短離心機的使用壽命。如離心管蓋子密封性差液體就不能加滿〔針對高速離心且使用角度頭〕,以防外溢。p失去平衡外溢后果一?污染轉頭和離心腔—影響感應器正常工作超速離心時,液體肯定要加滿離心管,因超離時需抽真空,只有加滿才能避開離心管變形。使用角度頭時別忘蓋轉頭蓋,如未蓋,離心腔內會產生很大的渦流阻力和摩擦升溫,這等于給離心機的電機和制冷機增加了額外負擔, 影響離心機的使用壽命。參數參數公式常數單位名稱VcoV=oro=2N/60厘米/秒弧度/秒線速度角速度r厘米半徑N轉/分轉速RCFRCFRCF=o2r/g=CXMrg相對離心場CC=1.118X105-gg=980厘米/秒2厘米/秒2重力加速度FFF=RCFXm克m克離心力質量PP1=1.FiF2FPFi=mprO勺6克浮力F2=3刃d?(dr/dt)F=RCFXm克摩擦力克離心力克/2液體密度NN=((350.4/st)Xlog(rmax/rmin))0.5轉/分轉速COO=((2.303/St)Xlog(r05弧度/分角速度ma/ minr))6克/厘米2樣品顆粒密度d厘米顆粒直徑?介質粘度dr
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