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實驗二蘆薈粗多糖的提取

實驗性質：驗證性實驗學時數：3學時生物制藥實驗課程【實驗目的與要求】

掌握水提醇沉法提取多糖的原理和方法掌握旋轉蒸發器的使用掌握組織勻漿機的使用【實驗原理】水提醇沉法（水醇法）系指在中藥水提濃縮液中，加入乙醇使某些藥物成分在醇溶液中溶解度降低析出沉淀，固液分離后使水提液得以精制的方法。一般操作過程是：將中藥水提液濃縮至1︰2，藥液放冷后，邊攪拌邊緩慢加入乙醇使達規定含醇量，密閉冷藏24～48h，濾過，濾液回收乙醇，得到精制液。操作時應注意以下問題：①適當濃縮，以減少乙醇用量。控制濃縮程度，過濃，有效成分易包裹于沉淀中而造成損失。②濃縮液冷卻后方可加入乙醇，以免乙醇受熱揮發損失。③選擇適宜的醇沉濃度。一般藥液中含醇量達50％～60％可除去淀粉等雜質，含醇量達75％以上大部分雜質均可沉淀除去。④慢加快攪。應快速攪動藥液，緩緩加入乙醇，以避免局部醇濃度過高造成有效成分被包裹損失。⑤密閉冷藏。可防止乙醇揮發，促進析出沉淀的沉降，便于濾過操作。⑥洗滌沉淀。沉淀采用乙醇（濃度與藥液中的乙醇濃度相同）洗滌可減少有效成分在沉淀中的包裹損失。【實驗材料、試劑與儀器】試劑：無水乙醇。燒杯、玻璃棒、小刀、紗布、量筒、電子天平、高速冷凍離心機、旋轉蒸發儀、真空泵、水浴鍋、組織勻漿機。【實驗方法與步驟】①取蘆薈鮮葉50g，洗凈，去掉葉尖和葉底，在自來水（蒸餾水）中浸泡0.5h，以除去由表皮滲出的黃色液汁。然后切去表皮，將內層凝膠置于燒杯中，加入3倍量自來水（蒸餾水），置于55℃恒溫水浴鍋中加熱浸提4h。②浸提液減壓濃縮，用6mol/L的鹽酸調pH值3.2左右，向經過調酸處理的蘆薈凝膠濃縮汁中緩慢加入6倍量的95%乙醇，邊加邊攪拌大約需要15~30min，室溫下靜置2h，離心分離(2500r/min，7min)得多糖沉淀。依次用乙醇、丙酮和乙醚洗滌，然后真空干燥，最終得到的沉淀即為蘆薈多糖粗品。或：減壓濃縮至原來的1/3,向濃縮汁中緩慢加入6倍體積冷的無水乙醇，邊加邊攪拌大約需要15~30min，室溫下靜置2h，得粗多糖沉淀。【注意事項】加入乙醇沉淀多糖時要邊加邊攪拌，時間要長一些;注意儀器的規范使用；實驗結果與記錄:記錄實驗條件、過程和實驗現象。【思

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