ICS6502001

CCSB.16.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T40141—2021

榆韌皮部壞死植原體檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofCandidatusPhytoplasmaulmi

2021-05-21發(fā)布2021-12-01實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T40141—2021

前言

本文件按照標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任

。。

本文件由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本文件起草單位中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)青島海關(guān)技術(shù)中心上海市農(nóng)業(yè)技術(shù)

:、、、

推廣服務(wù)中心

。

本文件主要起草人趙文軍田茜李正男張紅梅牟海清張京宣羅金燕

:、、、、、、。

Ⅰ

GB/T40141—2021

榆韌皮部壞死植原體檢疫鑒定方法

1范圍

本文件描述了榆韌皮部壞死植原體的檢疫和鑒定方法

。

本文件適用于進(jìn)出境榆樹(shù)苗木及接穗中榆韌皮部壞死植原體的檢疫和鑒定

。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒(méi)有規(guī)范性引用文件

。

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

。

31

.

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)polymerasechainreactionPCR

;

以耐熱聚合酶和一對(duì)引物與待測(cè)目標(biāo)核酸分子序列同源的片段通過(guò)高溫分

DNA(DNA)(DNA

子變性和低溫引物和目標(biāo)核酸分子復(fù)性并被耐熱聚合酶延伸交替循環(huán)擴(kuò)增待測(cè)目標(biāo)核酸分

)(DNA)

子的方法

。

32

.

植原體phytoplasma

一類無(wú)細(xì)胞壁尚不能人工培養(yǎng)主要分布于植物韌皮部篩管細(xì)胞刺吸式介體昆蟲(chóng)的腸道淋巴

,,、、、

唾液腺等組織

。

4榆韌皮部壞死植原體基本信息

學(xué)名Candidatus

:Phytoplasmaulmi

傳播途徑依靠帶病苗木進(jìn)行遠(yuǎn)距離傳播

:。

榆韌皮部壞死植原體的其他信息見(jiàn)附錄

A。

5方法原理

該病害主要危害榆樹(shù)依靠帶病苗木進(jìn)行遠(yuǎn)距離傳播其生物學(xué)特性和基因序列等分子生物

,。16S

學(xué)信息是該檢疫鑒定方法的依據(jù)相對(duì)保守通過(guò)植原體通用引物即可擴(kuò)增

。16SrDNA,R16F2/R16R2

獲得植原體序列

16SrDNA。

6儀器設(shè)備和主要試劑

61儀器設(shè)備

.

儀超凈工作臺(tái)滅菌鍋高速冷凍離心機(jī)臺(tái)式小型離心機(jī)超低溫冰箱常規(guī)冰箱旋渦振蕩