分光光度法測鐵化學(xué)實驗教學(xué)中心一、實驗?zāi)康恼莆沼没腔畻钏犸@色法測鐵的原理和方法。掌握分光光度計的使用方法。二、實驗原理

在pH=9～11.5的NH3.H2O-NH4Cl溶液中，F(xiàn)e3+與磺基水楊酸反應(yīng)生成組成比1:3的黃色穩(wěn)定配合物。該配合物在堿性溶液中的最大吸收波長為420nm，可在此波長下測量吸光度，由朗伯-比耳定律計算鐵含量。（1）分光光度計儀器結(jié)構(gòu)功能顯示器樣品室波長刻度窗

三、分光光度計的使用方法波長調(diào)節(jié)旋鈕操作鍵

（2）分光光度計使用方法通電---儀器自檢----預(yù)熱20min；用<MODE>鍵設(shè)置測試模式為透射比（T）MODE鍵透射比（T）波長選擇：用波長調(diào)節(jié)旋鈕設(shè)置所需的波長調(diào)零

打開樣品室蓋，在T方式下按“0%”鍵，此時儀器自動校正后顯示“0.000”。“0%”鍵T模式調(diào)滿

在比色皿槽中，依次放入?yún)⒈纫海瑯悠芬?和樣品液2等，蓋上樣品室蓋(注意透光截面垂直于光路方向)。參比液樣品液1樣品液2樣品液3

將參比液拉入光路中，按“100%T”鍵調(diào)T為100%，此時儀器顯示“BLA”，表示儀器正在自動校正，校正完畢后顯示“100.0”。“100%T”鍵樣品測定：

將MODE轉(zhuǎn)換為“ABSORBANCE”，顯色屏讀數(shù)為0.000，然后將樣品液分別拉入光路中，此時顯示測得的樣品吸光度。分光光度計的使用注意事項：

(1)比色皿的清潔程度，直接影響實驗結(jié)果。因此，特別要將比色皿清洗干凈。裝樣前處理：自來水反復(fù)沖洗→蒸餾水漂洗2次→待裝溶液漂洗2次。必要時，需用濃硝酸或鉻酸洗液短時間浸泡。用完后用自來水和蒸餾水洗凈并用檫鏡紙檫干放回比色皿盒中。(2)拿放比色皿時，應(yīng)持其“毛面”，不要接觸“光面”。光面毛面（3）若比色皿外表面有液體，應(yīng)用擦鏡紙朝同一方向拭干，以保證吸光度測量不受影響。(4)比色皿內(nèi)盛液應(yīng)為其容量的2/3，過少會影響實驗結(jié)果，過多易在測量過程中外溢，污染儀器。容量的2/3(5)比色皿的光面要與光源在一條線上。光透過窗口序號1(參比)23456待測液鐵標(biāo)準(zhǔn)液體積/mL0.001.002.003.004.005.005.0010%NH4Cl/mL4.002%磺基水楊酸/mL2.00氨水（1+10）/mL滴加至溶液變黃色后再多加4.00mL定容至/mL50.0050.0050.0050.0050.0050.0050.00吸光度Aρ（mg?L-1）四、實驗步驟取系列50mL容量瓶并編號，按下表配制系列溶液。以試劑空白作參比溶液，在420nm波長下測定各溶液的吸光度。ρxAρAx

以吸光度為縱坐標(biāo),鐵含量為橫坐標(biāo),繪制工作曲線。由工作曲線確定待測溶液的含量。五、注意事項在用磺基水楊酸測定Fe3+時，在pH=9~11.5范圍形成穩(wěn)定的3:1黃色配合物，且不容易受干擾。本實驗以NH3-NH4Cl緩沖溶液控制。待測溶液的濃度一