標準解讀

《GB/T 34745-2017 豬圓環病毒2型 病毒SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR檢測方法》是一項國家標準，旨在規范豬圓環病毒2型（PCV2）的實驗室檢測流程。該標準詳細規定了使用SYBR Green Ⅰ作為熒光染料進行實時熒光定量PCR的方法來檢測豬圓環病毒2型的具體步驟和技術要求。

首先，在準備階段，標準明確了所需材料與試劑清單，包括但不限于引物、dNTPs混合物、Taq酶、SYBR Green Ⅰ染料以及用于提取DNA的標準試劑盒等，并強調了實驗前所有設備應處于良好工作狀態的重要性。

接著，對于樣品處理部分，描述了從采集到核酸純化的整個過程。這其中包括了如何正確地采取生物樣本，確保其質量不受污染；以及采用何種方法或工具對收集來的組織液或其他類型標本中的總DNA進行有效分離和純化。

在反應體系構建環節中，則具體介紹了如何配制適合于SYBR Green Ⅰ熒光定量PCR反應的最佳條件下的混合溶液，比如各組分的比例調整及最終體積設定等細節內容。

此外，還詳盡說明了運行程序設置，即根據所使用的儀器型號選擇合適的溫度循環參數，以保證擴增效率最大化同時減少非特異性產物生成的可能性。同時也指出了數據分析時需要注意的關鍵點，如Ct值計算原則、溶解曲線分析技巧等，幫助實驗者準確判斷陽性結果并排除假陽性干擾因素。


如需獲取更多詳盡信息，請直接參考下方經官方授權發布的權威標準文檔。

....

查看全部

  • 現行
  • 正在執行有效
  • 2017-11-01 頒布
  • 2018-05-01 實施
?正版授權
GB/T 34745-2017豬圓環病毒2型病毒SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR檢測方法_第1頁
GB/T 34745-2017豬圓環病毒2型病毒SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR檢測方法_第2頁
GB/T 34745-2017豬圓環病毒2型病毒SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR檢測方法_第3頁
免費預覽已結束，剩余9頁可下載查看

下載本文檔

GB/T 34745-2017豬圓環病毒2型病毒SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR檢測方法-免費下載試讀頁

文檔簡介

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T34745—2017

豬圓環病毒2型病毒SYBRGreenⅠ實時

熒光定量PCR檢測方法

Porcinecircovirustype2—MethodofdetectingvirusbySYBR

GreenⅠreal-timePCR

2017-11-01發布2018-05-01實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

中國國家標準化管理委員會

GB/T34745—2017

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中華人民共和國農業部提出

。

本標準由全國動物衛生標準化技術委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位河南農業大學中國動物衛生與流行病學中心

:、。

本標準主要起草人魏戰勇鄭蘭蘭邵衛星胡慧陳紅英王亞賓王學兵崔保安寇亞楠

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34745—2017

豬圓環病毒2型病毒SYBRGreenⅠ實時

熒光定量PCR檢測方法

1范圍

本標準規定了實時熒光定量檢測豬圓環病毒型的技術要求

SYBRGreenⅠPCR2。

本標準用于檢測豬圓環病毒型核酸適用于臨床樣品中豬圓環病毒型的快速檢測

2,2。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T6682

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

值循環閾值

Ct:(CycleThreshold)

脫氧核糖核酸

DNA:(DeoxyribonucleicAcid)

乙二胺四乙酸

EDTA:(EthylenediaminetetraaceticAcid)

磷酸鹽緩沖溶液

PBS:(PhosphateBufferSaline)

聚合酶鏈式反應

PCR:(PolymeraseChainReaction)

豬圓環病毒型

PCV2:2(PorcineCircovirusType2)

仔豬斷奶后多系統衰竭綜合征

PMWS:(PostweaningMultisystemicWastingSyndrome)

酶聚合酶

Taq:TaqDNA(TaqDNAPolymerase)

t值解鏈溫度

m:(MeltingTemperature)

4試劑

除非另有規定僅使用分析純試劑所有試劑均用無酶污染的容器用水處理后高壓

,。RNA(DEPC

滅菌分裝

)。

41蛋白酶配制見附錄保存

.K(A):-20℃。

42裂解緩沖液配制見附錄保存

.(A):4℃。

43異硫氰酸胍裂解液配制見附錄保存

.(A):4℃。

44平衡酚配制見附錄保存

.(A):4℃。

45酚氯仿異戊醇混合液配制見附錄保存

.--(25∶24∶1)(A):4℃。

46氯仿異戊醇配制見附錄保存

.-(24∶1)(A):4℃。

47氯仿常溫保存

.:。

48異丙醇常溫保存

.:。

49乙醇用新開啟的無水乙醇和滅菌去離子水配制符合

溫馨提示

  • 1. 本站所提供的標準文本僅供個人學習、研究之用，未經授權，嚴禁復制、發行、匯編、翻譯或網絡傳播等，侵權必究。
  • 2. 本站所提供的標準均為PDF格式電子版文本（可閱讀打印），因數字商品的特殊性，一經售出，不提供退換貨服務。
  • 3. 標準文檔要求電子版與印刷版保持一致，所以下載的文檔中可能包含空白頁，非文檔質量問題。

評論

0/150

提交評論