常用免疫學檢查第一頁，共九十二頁，2022年，8月28日一、血清免疫球蛋白測定

免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）是一組具有抗體活性的球蛋白，由B淋巴細胞受抗原刺激后增殖分化形成的漿細胞合成和分泌，存在于人體的血液、體液、外分泌液及某些細胞（如淋巴細胞）膜上。第二頁，共九十二頁，2022年，8月28日（1）IgG主要由脾臟和淋巴結中的漿細胞合成與分泌，約占血清中Ig的70%～80%，是唯一能夠通過胎盤的Ig。血清中80%的抗細菌、抗病毒、抗毒素抗體屬于IgG。第三頁，共九十二頁，2022年，8月28日（2）IgA血清型IgA占血清中Ig的10%～15%；分泌型IgA由呼吸道、消化道、泌尿生殖道的淋巴樣組織大量合成，在外分泌液系統中發揮其重要的免疫功能。第四頁，共九十二頁，2022年，8月28日（3）IgM：IgM是分子量最大的Ig，占5%～10%。是機體受抗原刺激后最先產生的抗體，其殺菌、溶菌、溶血、促吞噬及凝集作用比IgG高500～1000倍，在機體早期的免疫防御中占有重要地位。第五頁，共九十二頁，2022年，8月28日（4）IgD和IgE1）IgD：占Ig的0.02%～1%，且極易被纖溶酶和（或）胰蛋白酶水解。已發現有些抗核抗體、抗基底膜抗體、抗甲狀腺抗體和抗鏈球菌溶血素“O”抗體等屬于IgD。2）IgE：主要由消化道、上呼吸道粘膜下的漿細胞分泌，在血清中是最少的一種抗體（0.002%）。IgE是親細胞抗體，在Ⅰ型變態反應性疾病的發病中具有重要作用。第六頁，共九十二頁，2022年，8月28日第七頁，共九十二頁，2022年，8月28日【參考值】單項免疫擴散法（RID）：

IgG7.6～16.6g/L；

IgA0.71～3.3g/L；

IgM0.48～2.12g/L。酶聯免疫吸附法（ELISA）：

IgD0.6～2.0mg/L；

IgE0.1～0.9mg/L。第八頁，共九十二頁，2022年，8月28日1．Ig減低見于各類先天性和獲得性體液免疫缺陷、聯合免疫缺陷的病人及長期使用免疫抑制劑的患者。此時5種Ig均有降低。【臨床意義】第九頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】2．Ig增高（1）單克隆性增高：表現為5種Ig中，僅有某一種Ig增高而其他Ig不增高或可降低，主要見于免疫增殖性疾病。如：①原發性巨球蛋白血癥時，表現為IgM單獨明顯增高；②多發性骨髓瘤時可分別見到IgG、IgA、IgD、IgE增高，并據此分為IgG型、IgA型、IgD型和IgE型多發性骨髓瘤；③過敏性皮炎、外源性哮喘及某些寄生蟲感染可表現為IgE增高。（2）多克隆性增高：表現為IgG、IgA、IgM均增高。常見于各種慢性感染、慢性肝病、肝癌、淋巴瘤以及系統性紅斑狼瘡（IgG、IgA或IgG、IgM同時升高）、類風濕性關節炎（IgM增高為主）等自身免疫性疾病。第十頁，共九十二頁，2022年，8月28日二、血清補體的檢查補體（complement，C）是血清中具有酶活性的一組不耐熱的大分子球蛋白。第一組分由9種球蛋白大分子組成，即C1～C9,其中C1還有3個亞單位，即C1q、C1r和C1s；第二組分包括B因子、D因子和P因子等；第三組分包括C1抑制物、I因子、H因子、C4結合蛋白、過敏毒素滅活因子。第十一頁，共九十二頁，2022年，8月28日補體激活途徑補體系統通常以非活性狀態存在于血漿之中，單獨的抗體或補體均不能引起細胞溶解，被激活物（抗原-抗體復合物）活化后才表現出各種生物活性。（1）經典激活途徑從C1開始，完成C1~C9的連鎖反應，參與特異性免疫反應的效應階段；（2）旁路途徑由細菌的細胞壁成分激活，越過C1、C4、C2，直接激活C3繼而完成C3至C9各成分的連鎖反應，參與非特異性反應，在感染早期即發揮作用。（3）凝集素途徑：一些細菌和凝集素也能激活補體系統，是因為它們含有甘露聚糖成分，與血清中甘露聚糖結合蛋白結合，活化相關絲氨酸蛋白激酶，相當于C1S，直接酶解C4和C2，從而激活補體系統。胰酶、纖溶酶也可直接分解C4和C2。第十二頁，共九十二頁，2022年，8月28日補體的生物學作用（1）溶解細胞和殺菌作用：在抗體作用下，補體能殺滅許多細菌。補體也能溶解紅細胞、白細胞、血小板，造成輸血反應和自身免疫疾病。（2）促炎作用：促血管通透因子，C2a、C4a。過敏毒素：C3a、C5a。使嗜堿性粒細胞、肥大細胞或血小板釋放組胺等使血管通透性增高，吞噬細胞滲出局部組織。白細胞趨化因子：C3a、C5a及C567。C3缺乏癥患者易招致細菌性感染，與缺乏補體來源的趨化因子以致不能招引白細胞聚集有關。（3）中和及溶解病毒：C1、C4、C2、C3存在時，可顯著增強特異性抗體對病毒的滅活作用，且其濃度與病毒的滅活程度成正比。第十三頁，共九十二頁，2022年，8月28日（一）總補體溶血活性（CH50）測定【原理】補體系統能被溶血素致敏的綿羊紅細胞（抗原-抗體復合物）所激活，導致補體的連鎖性活化，引起致敏綿羊紅細胞溶解（溶血）。補體活性與溶血程度之間在一定范圍內（20%～80%溶血率）呈正相關系，故一般以50%溶血作為終點（即CH50）較為準確。【參考值】試管法：5萬～10萬U／L。第十四頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】主要反映經典激活途徑（C1～C9）活化的活化程度。1．CH50增高：見于各種急性炎癥、組織損傷和某些惡性腫瘤，妊娠時亦可見升高。２．CH50減低意義更大。（1）補體成分大量消耗：如血清病、鏈球菌感染后腎小球腎炎、系統性紅斑狼瘡、自身免疫性溶血性貧血、類風濕性關節炎及同種異體移植排斥反應等；（2）補體大量丟失：如外傷、手術和大失血的病人；（3）補體合成不足：如肝硬化、慢性肝炎和重型肝炎等。第十五頁，共九十二頁，2022年，8月28日（二）血清C3測定【原理】C3是一種β2-球蛋白，主要由肝細胞合成與分泌，是血清中含量最多的補體成分，無論經典途徑還是旁路途徑C3都參與，因而可以反映出補體的活化情況。【參考值】免疫比濁法：0.85～1.70g／L。第十六頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】１．C3增高：C3作為急性時相反應蛋白，在各種急性炎癥、傳染病早期、某些惡性腫瘤（以肝癌最明顯）病人及排異反應時增高。２．C3減低：可作為腎臟病的鑒別診斷：（1）70%以上的急性腎小球腎炎病人（病程≤6周）血清C3減少，這對一些輕型、不典型急性腎炎的診斷有幫助；（2）85%以上的鏈球菌感染后腎炎患者血清C3下降，而病毒性腎炎患者則85%以上的病例血清C3含量正常，這有助于腎炎的病因鑒別；（3）78%的狼瘡性腎炎患者血清C3減低，當治療后病情轉為穩定時C3含量又恢復正常。第十七頁，共九十二頁，2022年，8月28日三、細胞免疫檢查淋巴細胞是構成機體免疫系統的主要細胞群體，人體的淋巴細胞分為T細胞、B細胞、K細胞（killercell）和NK細胞（naturalkillercell）等細胞群，它們又分別有若干亞群，各有其特異的表面標志和功能。臨床上各種免疫病均可出現不同群淋巴細胞數量和功能的變化。對它們進行檢查可用以判斷細胞免疫功能。第十八頁，共九十二頁，2022年，8月28日（一）T細胞免疫檢測1．T細胞花結形成試驗（ERFT）

【原理】T細胞表面具有特異性綿羊紅細胞（SRBC）受體，可與綿羊紅細胞結合形成玫瑰花結樣細胞，稱為紅細胞玫瑰花結形成試驗或E玫瑰花結形成試驗。以粘附3個或3個以上綿羊紅細胞者為花結形成細胞。本試驗所得花結的百分率，基本代表了被檢標本中的T細胞占淋巴細胞的百分率。【參考值】64.4%±6.7%。第十九頁，共九十二頁，2022年，8月28日1．T細胞花結形成試驗（ERFT）【臨床意義】升高見于：甲狀腺功能亢進癥、慢性淋巴細胞性甲狀腺炎、重癥肌無力、中度慢性肝炎、SLE活動期及器官移植排斥反應等。降低見于：免疫缺陷性疾病，如AIDS、聯合免疫缺陷病等。亦見于惡性腫瘤、SLE、麻疹、流感等病毒感染，以及放療、化療和應用糖皮質激素等。第二十頁，共九十二頁，2022年，8月28日2．T細胞轉化試驗T淋巴細胞表面存在著有絲分裂原受體，在有絲分裂原植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA）、美洲商陸（PWM）作用下，T淋巴細胞代謝活躍，蛋白質、RNA和DNA的合成增加，從而轉化為淋巴母細胞，部分細胞發生有絲分裂。可依照形態學方法計數淋巴細胞及轉化的母細胞數，求出轉化的百分率。也可以用3H-TdR（氚標記的胸腺嘧啶核苷，T淋巴細胞合成DNA時可將3H-TdR作為原料攝入）摻入法及液體閃爍儀測定淋巴細胞的脈沖數/分（cpm），得出刺激指數（SI）：SI＝測定組cpm的均值/對照組cpm的均值，從而反映T細胞的免疫功能。【參考值】形態學法：轉化百分率為60.1%±7.6%；3H-TdR摻入法：正常SI＜2。第二十一頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】（1）判定機體細胞免疫功能：轉化率降低，見于細胞免疫缺陷或細胞免疫功能低下患者，如惡性腫瘤、重癥結核、重癥真菌感染、慢性肝病及接受放療、化療或應用免疫抑制劑治療等。（2）判定疾病的療效和預后：如惡性腫瘤經治療后，T細胞轉化率升至正常，提示治療有效；反之則預后不良。第二十二頁，共九十二頁，2022年，8月28日3．T細胞分化抗原測定白細胞在正常分化成熟和激活過程中細胞表面存在被單克隆抗體識別的膜表面分子，稱為分化抗原（clusterofdifferentiating，CD分子）。T細胞是由一群功能不同的異質性淋巴細胞組成，在鏡下按形態難以區分，但可借助于其細胞膜表面分子具有不同的抗原性加以區別，現已制備了多種單克隆抗體。CD分子是主要的T細胞分化抗原，比較明確的表達在T細胞表面的CD分子有CD2、CD3、CD4、CD8等。第二十三頁，共九十二頁，2022年，8月28日【參考值】CD3+T細胞：61%～85%CD4+T細胞：28%～58%CD8+T細胞：19%～48%CD4+T細胞/CD8+T細胞比值為：1.66±0.33（＞1）第二十四頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】（1）CD3+T細胞：CD3分子表達于所有成熟的T淋巴細胞表面，是T細胞表面所特有的標志，能反映T細胞總數的變化。CD3+T細胞降低見于免疫缺陷性疾病，如AIDS、聯合免疫缺陷病等；亦見于惡性腫瘤、SLE、采用放療及化療或應用免疫抑制劑等。CD3+T細胞升高見于甲狀腺功能亢進癥、慢性淋巴細胞性甲狀腺炎、重癥肌無力、中度慢性肝炎及器官移植后排斥反應。（2）CD4+T細胞：輔助性T細胞（Th）表面表達CD4分子。CD4分子是人類免疫缺陷病毒（HIV）的主要受體。CD4

+T細胞降低見于某些病毒感染性疾病，如AIDS、巨細胞病毒感染，全身麻醉、嚴重創傷及應用免疫抑制劑等。CD4

+T細胞升高見于類風濕性關節炎活動期。第二十五頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】（3）CD8+T細胞：CD8分子是抑制、殺傷性T細胞的標志，可特異性的殺傷攜帶致敏抗原的靶細胞，如腫瘤細胞、病毒感染的細胞等。CD8+T細胞減低見于類風濕性關節炎、重癥肌無力、2型糖尿病、膜性腎小球腎炎；CD8+T細胞升高見于傳染性單核細胞增多癥、巨細胞病毒感染、慢性乙型肝炎。（4）CD4+T細胞/CD8+T細胞比值：降低常見于AIDS（常＜0.5）、惡性腫瘤進行期和復發時，亦見于傳染性單核細胞增多癥、巨細胞病毒感染等。增高見于類風濕性關節炎活動期、SLE、多發性硬化癥、重癥肌無力、膜性腎小球腎炎等。器官移植后CD4/CD8比值動態增高，預示可能發生排斥反應。第二十六頁，共九十二頁，2022年，8月28日（二）B細胞免疫檢測B淋巴細胞是機體免疫系統的抗體產生細胞，其表面有多種表面抗原和表面受體。表面抗原主要包括CD19、CD20、CD22等；表面受體主要包括B細胞抗原受體（BCR）、補體受體（CR）及Fc受體等。第二十七頁，共九十二頁，2022年，8月28日1．B細胞膜表面免疫球蛋白（SmIg）測定

【原理】B細胞抗原受體（BCR）是B細胞的特征性表面標志，BCR又稱B細胞膜表面免疫球蛋白（surfacemembraneimmunoglobulin，SmIg）。早期的前B細胞表達IgM，成熟的B細胞表達IgD、IgM或IgA、IgE等，SmIg的作用是結合特異性抗原。用熒光標記羊抗人IgG、IgM、IgA、IgD或IgE抗體，分別與活性淋巴細胞反應，于熒光顯微鏡下，觀察呈顯熒光的細胞（綠色熒光為SmIg陽性的B細胞）。求出各類SmIg細胞的百分數，其總和為血液中B細胞的百分率。第二十八頁，共九十二頁，2022年，8月28日【參考值】IFA法：SmIg陽性細胞總數均值為21%（16%～28%）SmIgG細胞為7.1%（4%～13%）SmIgM細胞為8.9%（7%～13%）SmIgA細胞為2.2%（1%～4%）SmIgD細胞為6.2%（5%～8%）SmIgE細胞為0.9%（0%～l.5%）第二十九頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】主要用于檢測外周血B淋巴細胞的百分率。SmIg陽性細胞降低，主要見于體液免疫缺陷性疾病。SmIg陽性細胞升高，常與B淋巴細胞惡性增生有關，見于慢性淋巴細胞白血病、多毛細胞白血病和原發性巨球蛋白血癥等。巨球蛋白血癥患者SmlgM細胞可高達78%。第三十頁，共九十二頁，2022年，8月28日紅細胞-抗體-補體花結形成試驗B細胞表面存在著膜表面免疫球蛋白（SmIg）、Fc受體和補體受體等。雞（羊）紅細胞經相應的抗紅細胞抗體（EA）致敏后，當與B細胞混合時，EA的Fc段與B細胞表面的Fc受體結合所形成的花結樣細胞稱為EA-花結形成細胞（EA-RFC）。如在EA致敏紅細胞中再加入補體，與B細胞表面的補體受體結合，則形成EAC花結形成細胞（EAC-RFC）。B細胞表面還具有小鼠紅細胞受體，能與小鼠紅細胞結合，形成鼠紅細胞花結（M-RFC）；這類細胞主要為帶有SIgM的幼稚B細胞。這組試驗總稱為紅細胞-抗體-補體花結形成試驗。第三十一頁，共九十二頁，2022年，8月28日紅細胞-抗體-補體花結形成試驗【參考值】EA-RFC：8%～12%；EAC-RFC：8%～12%；M-RFC：8.5%±2.8%。【臨床意義】降低見于：免疫缺陷性疾病，如原發性和繼發性免疫缺陷病等，尤以M-RFC降低更明顯。升高見于：淋巴增殖性疾病，如慢性淋巴細胞白血病、多毛細胞白血病等。第三十二頁，共九十二頁，2022年，8月28日3．B細胞分化抗原測定CD19和CD20分子是B細胞特有的表面標志，存在于前B細胞、未成熟B細胞和成熟的B細胞表面。CD19是全部B細胞共有的表面抗原，B細胞活化后不消失，是最重要的B細胞標記分子。CD20在B細胞激活后消失。CD22分子只存在于成熟的B細胞中。應用CD19、CD20和CD22等單克隆抗體，分別與B細胞表面抗原結合，通過免疫熒光法、免疫酶標法或流式細胞術進行檢測，分別求出CD19、CD20、CD22等陽性細胞百分率和B淋巴細胞數。主要檢測CD19。第三十三頁，共九十二頁，2022年，8月28日3．B細胞分化抗原測定【參考值】熒光激活細胞分離儀（FACS）：CD1911.7%±3.37%。【臨床意義】CD19+細胞升高見于B細胞系統的惡性腫瘤；CD19+細胞降低見于體液免疫缺陷病及使用化療或免疫抑制劑后。第三十四頁，共九十二頁，2022年，8月28日鏈球菌溶血素“O”（ASO）測定鏈球菌溶血素“O”（streptolysin“O”）是A群溶血性鏈球菌的代謝產物之一，為具有溶血活性的蛋白質，能溶解人類和一些動物的紅細胞。鏈球菌溶血素“O”具有一定的抗原性，能刺激機體產生相應抗體，稱為抗鏈球菌溶血素“O”（anti-streptolysin“O”，ASO）。加一定量的鏈球菌溶血素“O”（抗原）于倍比稀釋的被檢血清中，如被檢血清中存在ASO（抗體），則可使加入的鏈球菌溶血素“O”失去溶解紅細胞的能力。【參考值】乳膠凝集法（LAT）：ASO＜500U。第三十五頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】1．ASO升高常見于A群溶血性鏈球菌感染及感染后免疫反應所致的疾病，如感染性心內膜炎及扁桃腺炎，風濕熱、鏈球菌感染后急性腎小球腎炎等。2．ASO在溶血性鏈球菌感染1周后開始升高，4～6周達高峰，并可持續至病愈后數月到數年。故ASO增高，提示曾有溶血性鏈球菌感染，不一定是近期感染的指標。鏈球菌感染后ASO動態升高，且C反應蛋白（C-RP）、血沉陽性，有利于風濕熱的診斷。3．確已感染溶血性鏈球菌，但ASO一直不見增高，可由于：（1）該溶血性鏈球菌不產生或產生很少量鏈球菌溶血素“O”，此時應檢查與溶血性鏈菌球感染有關的其他抗體，如抗透明質酸酶、抗鏈球菌激酶等；（2）感染早期就應用大量抗生素或糖皮質激素。4．高膽固醇血癥、巨球蛋白血癥及多發性骨髓瘤病人，ASO也可增高。第三十六頁，共九十二頁，2022年，8月28日肥達（Widal）反應肥達（Widal）反應是檢測患者血清中有無傷寒、副傷寒沙門菌抗體的一種反應。將被檢血清倍比稀釋后分別與傷寒沙門菌菌體“O”抗原、鞭毛“H”抗原和副傷寒沙門菌甲、乙、丙的鞭毛抗原“A”、“B”、“C”，在生理鹽水介質中進行凝集價測定。凝集效價明顯升高或動態上升有助于傷寒、副傷寒的明確診斷。【參考值】“O”凝集價＜1︰80；傷寒“H”凝集價＜1︰160；副傷寒“A”、“B”、“C”凝集價＜1︰80。第三十七頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】（1）正常人因隱性感染或預防接種，血清中可含有一定量的相關抗體，可超過正常值范圍，其效價隨地區而有差異。（2）由于抗體產生需要一定時間，有時單次抗體效價增高不能確定時，應在病程中逐周復查，若抗體效價依次遞增或恢復期較急性期升高4倍或以上，則有診斷意義。（3）“O”抗原刺激機體產生IgM類抗體，出現較早，持續約半年；“H”抗原刺激機體產生IgG類抗體，出現較晚，持續時間長達數年，且消失后易受非特異性抗原刺激而能短暫地重現。因此：①“O”、“H”均升高則傷寒感染的可能性大；均低于正常值，則患傷寒的可能性甚小。②若“H”升高而“O”不升高，則有可能是預防接種或是非特異性的“回憶反應”。③若“O”升高而“H”不升高，則可能是傷寒類感染的早期。第三十八頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】（4）“O”抗原為傷寒沙門菌和副傷寒甲、乙沙門菌的共同抗原，血清中檢出高效價的“O”抗體，不能區別3個不同的病原菌感染；但3者的鞭毛抗原（“H”、“A”、“B”）不同，可從3種鞭毛的特異性抗體效價上升來判斷感染的菌種。副傷寒丙沙門菌感染時，“O”凝集效價不高，而只有其鞭毛抗原“C”的凝集效價升高。（5）10%的傷寒病人，肥達反應始終陰性。可能的原因是發病早期已大量應用有效抗菌藥物，或應用皮質激素類免疫抑制劑，或者體液免疫功能不足。第三十九頁，共九十二頁，2022年，8月28日2．酶聯免疫吸附試驗（ELISA）

ELISA是用酶促反應的放大作用來顯示初級免疫學反應，既可檢測抗體又可檢測抗原。以傷寒沙門菌脂多糖（內毒素的主要成分）為抗原，用間接ELISA法檢測傷寒病人血清中的特異性IgM抗體，有助于傷寒的早期診斷。Vi（virulence）抗原存在于傷寒沙門菌表面，可以阻止傷寒沙門菌“O”抗原與其相應抗體的凝集反應。當體內有傷寒沙門菌存在時就有一定量的Vi抗體存在，細菌清除后抗體亦隨之消失，故測定Vi抗體有助于檢出傷寒帶菌者。【參考值】ELISA法：IgM抗體為陰性或滴度＜1︰20；

Vi抗體滴度＜1︰20。第四十頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】（1）抗傷寒沙門菌脂多糖的IgM型抗體，于發病一周后即見明顯升高，故有早期診斷價值，此時肥達反應大多呈陰性反應。（2）如果Vi抗體滴度＞1︰20，有助于檢出傷寒慢性帶菌者。若要進一步肯定診斷，則應反復取糞便進行分離培養。如果Vi抗體效價平穩下降，提示帶菌狀態消除。第四十一頁，共九十二頁，2022年，8月28日3．膠乳凝集試驗（LAT）用傷寒沙門菌“Vi”、“H”、“O”的高效價抗血清致敏膠乳顆粒，產生膠乳抗體，用此抗體與病人血清（不同倍比稀釋為1︰20以上）混合后，若病人血清中含有傷寒沙門菌“Vi”、“H”、“O”抗原，則可出現凝集顆粒而為陽性。

【參考值】正常人為陰性或“O”凝集效價＜1︰80，“H”凝集效價＜1︰160。

【臨床意義】

（1）傷寒沙門菌侵入人體后，血中即有特異性抗原存在，其陽性時期早于肥達反應，也早于檢查傷寒特異性IgM型抗體。（2）傷寒早期，尿中也有其特異性抗原，故也可借尿液膠乳凝集試驗陽性而作出診斷。（3）本試驗對診斷那些未能產生抗體的傷寒病人尤其有幫助。第四十二頁，共九十二頁，2022年，8月28日（三）結核分支桿菌抗體和DNA測定

機體感染結核分支桿菌后，體內可產生結核特異性抗體（TB-Ab）。將結核分支桿菌抗原包被在固相載體上，與待測血清反應，血清中相應的抗體可結合于其上，再以膠體金（或酶）標記，顯示反應，可檢出血清中結核分支桿菌抗體。結核分支桿菌的DNA可用PCR方法檢測。【參考值】膠體金或ELISA法：TB-Ab陰性；

PCR法：結核分支桿菌DNA陰性。【臨床意義】TB-Ab陽性率為80%～90%左右，表示有結核分支桿菌感染，其靈敏度超過90%和特異性超過85%，比傳統的痰涂片找結核分支桿菌和細菌培養方法簡便、快捷、靈敏。PCR檢測DNA特異性更強、靈敏度更高，但應防止污染引起的假陽性。第四十三頁，共九十二頁，2022年，8月28日（四）幽門螺桿菌抗體（Hp-Ab）測定

用斑點反應板上的固相胃幽門螺桿菌混合抗原與血清中的幽門螺桿菌抗體（Hp-Ab）形成復合物，膠體金標記抗人IgG抗體再與復合物結合，形成肉眼可見的紅色圓斑點。【參考值】金標免疫斑點法為陰性（反應板孔中央只出現紅色橫線）。【臨床意義】Hp-Ab陽性見于胃、十二指腸幽門螺桿菌感染，如胃炎、消化性潰瘍等，其敏感性大于90%，特異性為85%。Hp-Ab陽性也可見于胃癌和胃粘膜相關性淋巴樣組織淋巴瘤。第四十四頁，共九十二頁，2022年，8月28日HP的自然過程第四十五頁，共九十二頁，2022年，8月28日（五）漢坦病毒（HTV）抗體IgM測定漢坦病毒（Hantavirus，HTV）是腎綜合征出血熱（HFRS）的病原體。抗-HTVIgM是感染HTV后出現于患者血清中的一種特異性抗體。【參考值】ELISA法為陰性。【臨床意義】人體感染HTV2～3天后，即可在血清中檢出抗-HTVIgM，7～10天達高峰（陽性率可達95%），其后開始下降。所以檢測抗-HTVIgM有助于HFRS的早期診斷。第四十六頁，共九十二頁，2022年，8月28日（六）流行性乙型腦炎病毒抗體IgM測定

流行性乙型腦炎病毒（EPBV）是披膜病毒科黃病毒屬中的一種RNA病毒。人感染EPBV后，早期可產生特異性IgM抗體。【參考值】ELISA法為陰性。【臨床意義】急性乙型腦炎患者血清中特異性IgM抗體于發病后第3～4天出現，兩周陽性率達高峰（70%～90%）。因此，檢測特異性IgM抗體有助于乙型腦炎的早期診斷。乙型腦炎病后機體可產生中和抗體，2個月時達高峰，可持續5～15年，常用于人群隱性感染的流行病學調查。第四十七頁，共九十二頁，2022年，8月28日弓形蟲抗體和DNA測定弓形蟲感染為人畜共患性疾病，人體感染弓形蟲后，可引起發熱、關節及肌肉疼痛、淋巴結腫大等。若孕婦感染可引起流產、胎兒先天畸形等。弓形蟲的核酸為DNA，弓形蟲抗體（toxoplasmaantibody）有IgM和IgG兩型。【參考值】間接血凝試驗（IHA）、IFA法和ELISA法測定：IgG、IgM均為陰性PCR法測定：DNA為陰性【臨床意義】IgM型弓形蟲抗體升高是近期感染的指標，IgG型弓形蟲抗體增高是既往感染的指標。DNA陽性對弓形蟲病的診斷意義更大。第四十八頁，共九十二頁，2022年，8月28日日本血吸蟲抗體測定機體感染日本血吸蟲后可產生特異性抗體。在血清中檢出特異性IgM、IgG和IgE抗體，有利于臨床診斷和流行病學的調查。環卵沉淀試驗（COPT）：血吸蟲蟲卵內毛蚴的分泌物具有良好的抗原性，該抗原與血吸蟲患者血清中抗體可發生抗原-抗體反應，在蟲卵周圍形成特異性沉淀物。

【參考值】環卵沉淀法：正常人為陰性。ELISA法和膠乳凝集法（LAT）：IgE為0～150IU/L，IgG、IgM為陰性。【臨床意義】COPT的敏感性高（94.1%~100%），假陽性率較低，可為臨床診斷、考核治療效果、檢測疫情等提供可靠依據。IgE、IgM陽性提示病程處于早期，是早期診斷的指標；IgG陽性提示疾病已是恢復期，曾有過血吸蟲感染，可持續數年。第四十九頁，共九十二頁，2022年，8月28日囊蟲抗體測定囊蟲病是一種人和豬共患的寄生蟲病。囊蟲侵入人體后，可在血清和腦脊液中出現特異性IgG抗體，其特異性和敏感性較高。【參考值】ELISA法：血清＜1︰64為陰性；腦脊液＜1︰8為陰性。間接血凝法：血清＜1︰128為陰性；腦脊液＜1︰8為陰性。【臨床意義】IgG陽性見于囊蟲病。其中腦囊蟲病占60%～80%。此外，可用作流行病學調查。第五十頁，共九十二頁，2022年，8月28日瘧原蟲抗體和抗原測定IFA法和ELISA法測定抗體為陰性；免疫印跡法測定抗原為陰性。【臨床意義】瘧原蟲抗體陽性提示近期有瘧原蟲感染。但是瘧原蟲抗體檢測陰性不足以否定瘧疾，應做抗原檢測或血液涂片找瘧原蟲以利確診。抗體陽性對回顧性分析、流行病學調查有意義。第五十一頁，共九十二頁，2022年，8月28日（八）梅毒血清學檢查當機體感染梅毒螺旋體后，即產生梅毒螺旋體抗體，包括特異性抗體和非特異性抗體（反應素）。反應素檢測為定性試驗，特異性抗體檢測有助于梅毒的確診。【參考值】反應素定性試驗：快速血漿反應素試驗（RPR）、不加熱血清反應素試驗（USR）、美國性病研究實驗室試驗（VDRL）均為陰性；特異性抗體確診試驗：梅毒螺旋體血凝試驗（TPTA）和熒光螺旋體抗體吸附試驗（FTA-ABS）均為陰性。第五十二頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】1．定性試驗用于梅毒的初篩，一期梅毒陽性率約為70%，二期梅毒可達100%，三期梅毒陽性率較低。因上述試驗的抗原為非特異性，所以一些非梅毒疾病如系統性紅斑性狼瘡、類風濕性關節炎、硬皮病、麻風等可出現假陽性。孕婦亦可陽性。2．在定性試驗陽性的前提下，特異性抗體試驗陽性即可確診為梅毒。第五十三頁，共九十二頁，2022年，8月28日（九）艾滋病病毒抗體及RNA測定艾滋病（AIDS）是由人獲得性免疫缺陷病毒（HIV）引起的獲得性免疫缺陷綜合征。當機體感染HIV數周到半年后，患者體內可出現抗-HIV抗體。【參考值】篩選試驗：ELISA法和快速蛋白印跡法（RWB）均為陰性；確診試驗：蛋白印跡法（WB）和RT-PCR（逆轉錄酶聚合酶鏈反應）法檢測HIV-RNA均為陰性。第五十四頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】篩選試驗敏感性高但特異性差，常有假陽性。確診試驗有利于AIDS的確診和早期診斷。臨床上抗-HIV陽性，又具有體重減輕10%以上、持續發熱達38℃1個月以上、持續腹瀉1個月以上、卡氏肺囊蟲肺炎、卡波西（Kaposi）肉瘤、明顯霉菌或其他條件致病菌感染任何一項者，可診斷為艾滋病。第五十五頁，共九十二頁，2022年，8月28日HIV感染的自然過程第五十六頁，共九十二頁，2022年，8月28日五、腫瘤標志物檢測腫瘤標志物（tumormarker）是指能夠區分腫瘤或非腫瘤的化學物質，包括腫瘤抗原、激素、受體、酶與同工酶、癌基因及其產物等百余種。目前分五類：①原位性腫瘤相關抗原，此類物質在同類正常細胞中含量甚微，當細胞癌變時迅速增加，如本周蛋白；②異位性腫瘤相關抗原，此類物質由惡變的癌細胞產生，如肺癌時異位ACTH明顯增高等；③胎盤和胚胎性腫瘤相關物質，如甲胎蛋白、癌胚抗原等；④病毒性腫瘤相關物質，如EB病毒（Burkitt淋巴肉瘤）、乙肝病毒（肝癌）等；⑤癌基因、抑癌基因及其產物。第五十七頁，共九十二頁，2022年，8月28日（一）血清甲胎蛋白（AFP）測定甲胎蛋白（alphafetoprotein，AFP）是人胚胎時期血液中含有的一種特殊的糖蛋白，由胎兒肝細胞和卵黃囊合成，其濃度從胎齡6周后逐漸上升，至16～20周達高峰（可達1～3g/L），然后逐漸下降，出生時臍血中AFP含量為10～100mg/L，出生后1個月降至正常成人水平。AFP的生成量與胎兒肝臟或出生后的肝臟再生時分裂細胞數呈正相關，故認為AFP是診斷肝細胞癌的重要指標。【參考值】放射免疫法（RIA）：血清＜25μg/L（25ng/m1）第五十八頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】1．原發性肝癌AFP是目前診斷肝細胞癌最特異的標志物，血清中AFP＞300μg/L可作為原發性肝癌的診斷閾值，但也有10%～30%病人，AFP不增高或增高不明顯，可能與瘤體大小、分化程度有關。一般認為，病理分化接近正常的肝細胞或分化程度極低者，AFP常較低或測不出。第五十九頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】2．病毒性肝炎、肝硬化隨著受損肝細胞的修復再生，幼稚化的肝細胞重新具有產生AFP的能力（常＜200μg/L）。急性肝炎患者，當ALT開始下降、肝細胞轉入修復期時AFP升高，常在病程第4周達高峰后逐漸下降，隨肝細胞修復而AFP逐漸減少至消失。重型肝炎時，若見AFP增高，則提示壞死的肝細胞再生；反之，則提示肝細胞大量壞死，預后不良。3．妊娠妊娠3～4個月后，AFP上升，7～8個月達高峰（＜400μg/L），分娩后約3周即恢復正常。孕婦血清中AFP異常升高，有可能為胎兒神經管畸形。4．其他先天性膽管閉鎖、生殖腺胚胎性腫瘤等，血中AFP也可增加。第六十頁，共九十二頁，2022年，8月28日（二）癌胚抗原（CEA）測定癌胚抗原（CEA）最初發現于成人結腸癌組織中，是一種富含多糖的蛋白復合物。胚胎期主要存在于胎兒的消化管、胰腺及肝臟，出生后組織內含量極低。惡性腫瘤患者的血清中可發現CEA含量有異常升高。【參考值】ELISA和RIA法:血清＜5μg/L。第六十一頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】CEA測定無特異性，也缺乏早期診斷價值，臨床主要用于：1．消化器官癌癥的診斷CEA升高主要見于結腸癌、胃癌、胰腺癌等。CEA隨病程的進展而升高，對判斷療效和預后有一定價值。如結腸癌術后2～4天CEA即可下降至參考值范圍，如術后CEA持續不降或尚未降至參考值范圍又再回升，提示腫瘤有殘存或復發。2．鑒別原發性和轉移性肝癌原發性肝癌CEA升高者不超過9%，而轉移性肝癌CEA陽性率高達90%，且絕對值明顯增高。故CEA對鑒別原發和轉移性肝癌有幫助。3．其他肺癌、乳腺癌、膀胱癌、尿道癌、前列腺癌等CEA亦可增高。CEA輕度增高也可見于潰瘍性結腸炎、肝硬化、阻塞性黃疸以及吸煙者和老年人。第六十二頁，共九十二頁，2022年，8月28日癌抗原125（CAl25）測定癌抗原125（CAl25）為一種糖蛋白性腫瘤相關抗原，存在于卵巢腫瘤的上皮細胞內。主要用于輔助診斷惡性漿液性卵巢癌、上皮性卵巢癌，亦用于卵巢癌的療效觀察。【參考值】RIA和ELISA法：男性及50歲以上女性＜2.5萬U/L20～40歲女性＜4.0萬U/L（RIA）【臨床意義】卵巢癌病人血清CAl25水平明顯升高，其陽性率可達97%，故CAl25對診斷卵巢癌有較大臨床價值，尤其對觀察治療效果和判斷復發較為靈敏。其他癌癥，如宮頸癌、乳腺癌、胰腺癌、膽道癌、肝癌、胃癌、結腸直腸癌、肺癌等也有一定的陽性反應。非惡性腫瘤，如良性卵巢瘤、子宮肌瘤、肝炎等病人血清CAl25也會增高，但多數不超過10萬U/L。肝硬化失代償期血清CAl25明顯增高。第六十三頁，共九十二頁，2022年，8月28日癌抗原15-3（CA15-3）測定癌抗原15-3（CA15-3）是一種乳腺癌相關抗原，屬糖蛋白，對乳腺癌的診斷及術后隨訪監測有一定的價值。【參考值】RIA法和化學發光免疫分析法（CLIA）：血清＜25000U/L。【臨床意義】乳腺癌時30%～50%的患者可見CAl5-3明顯升高，但在早期乳腺癌時，它的陽性僅為20%～30%左右。乳腺癌治療后復發及乳腺癌轉移后陽性率可達80%。其他惡性腫瘤，如轉移性卵巢癌、結腸癌、支氣管癌、原發肝癌等，CAl5-3也有不同程度的升高。妊娠婦女，血清CAl5-3水平也可增高。第六十四頁，共九十二頁，2022年，8月28日組織多肽抗原（TPA）測定組織多肽抗原（tissuepolypeptideantigen，TPA）是一種非特異性腫瘤標志物，體外實驗時，有絲分裂期間的增殖細胞TPA分泌活躍。血清中TPA增高主要用于輔助診斷迅速增殖的惡性腫瘤，且在惡性腫瘤的療效觀察上敏感性較高。【參考值】RIA法：血清＜130U/L。【臨床意義】惡性腫瘤患者血清TPA水平均可顯著升高，與腫瘤發生部位和組織類型無相關性；多見于膀胱轉移細胞癌，其次見于前列腺癌、乳腺癌及消化道惡性腫瘤等。惡性腫瘤經治療好轉后，TPA水平降低；若TPA再次增高，提示有腫瘤復發。TPA與CEA同時檢測可有利于惡性與非惡性乳腺病的鑒別診斷。急性肝炎、胰腺炎、肺炎及妊娠后期等血清中TPA亦可升高。第六十五頁，共九十二頁，2022年，8月28日前列腺特異抗原（PSA）測定前列腺特異抗原（prostatespecificantigen，PSA）是一種由前列腺上皮細胞分泌的蛋白酶，為單鏈糖蛋白，正常人血清中PSA含量極微，在前列腺癌時，前列腺腺管破壞導致血清PSA水平明顯升高。【參考值】RIA法和CLIA法：血清≤4.0μg/L。【臨床意義】PSA是高度的前列腺組織特異抗原，90%～97%的前列腺癌患者血清PSA明顯升高；手術后降至正常，若再次升高，應考慮腫瘤的復發與轉移。第六十六頁，共九十二頁，2022年，8月28日六、自身抗體檢查人體的免疫系統具有高度的“自我識別”能力。一般情況下，機體對“非己”抗原發生免疫排斥，而對自身抗原呈現自身免疫耐受即機體免疫系統對自身抗原不產生免疫應答，無免疫排斥的現象。如機體免疫系統對自身抗原發生免疫應答，產生自身抗體和（或）自身致敏淋巴細胞的現象，稱為自身免疫。當自身免疫表現為質和量的異常，自身抗體和（或）自身致敏淋巴細胞攻擊自身靶抗原細胞和組織，使其產生病理改變和功能障礙時，即形成自身免疫性疾病。AID按自身抗原分布的范圍可分為器官特異性（如橋本甲狀腺炎等）和非器官特異性（如SLE等），另有一類中間型。自身抗體的檢查，對自身免疫病的診斷、療效觀察均具有重要意義。第六十七頁，共九十二頁，2022年，8月28日（一）類風濕因子（RF）檢查

類風濕因子（RF）是一種以變性IgG為靶抗原的自身抗體，無種族特異性，有IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五型。主要存在于類風濕性關節炎患者的血清和關節液中，易與變性的IgG的Fc段結合，形成抗原-抗體復合物。主要檢測IgM型。【參考值】乳膠凝集試驗正常人為陰性；血清稀釋度＜1︰10。【臨床意義】未經治療的類風濕性關節炎病人，RF陽性率為80%，且滴度常＞1︰160。臨床上動態觀察滴定度變化，可作為病變活動及藥物治療后療效的評價。SLE、硬皮病、皮肌炎等風濕性疾病，及感染性疾病如傳染性單核細胞增多癥、感染性心內膜炎、結核病等，RF也可陽性，但其滴度均較低。約有1%～4%的正常人可呈弱陽性反應，尤以75歲以上的老年人多見。第六十八頁，共九十二頁，2022年，8月28日（二）抗核抗體的檢查抗核抗體（ANA）是以細胞的核成分為靶抗原的自身抗體的總稱，無器官及種族特異性。依其與細胞核不同抗原成分起反應而分為抗核蛋白抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗單鏈DNA抗體、抗可溶性核成分抗體及抗核仁抗體。用免疫熒光法以鼠肝細胞核作抗原時，病人血清的ANA可與之結合，再加入熒光素標記的抗人IgG后，胞核處發出黃綠色熒光，胞漿區不發光。陽性血清連續稀釋后可測定效價。第六十九頁，共九十二頁，2022年，8月28日1．抗核抗體（ANA）測定【參考值】IFA法為陰性，血清滴度＜1︰40。【臨床意義】（1）陽性主要見于系統性紅斑狼瘡（systemslupuserythematosus，SLE）。未經治療的SLE患者，ANA陽性率可達96%（滴度在1︰128～1︰2048之間），但特異性較差。約有6%的正常人可呈弱陽性反應。（2）類風濕性關節炎、系統性硬化病、皮肌炎、干燥綜合征、慢性肝炎等也可出現陽性反應，但滴度均較低。第七十頁，共九十二頁，2022年，8月28日抗核抗體陽性（1︰20）第七十一頁，共九十二頁，2022年，8月28日1．抗核抗體（ANA）測定（3）根據細胞核著染后的熒光類型，ANA可分為4種。①均質型（彌漫型）：全部細胞核呈均勻熒光，與抗dsDNA和抗組蛋白抗體有關，多見于SLE及硬皮病、皮肌炎等；②膜型（周邊型）：核邊緣處熒光較強呈輪狀，對應的抗體為抗dsDNA抗體，見于SLE活動期；③斑點型（顆粒型）：核內呈斑塊狀或點塊狀熒光，抗體類型為可提取性核抗原（ENA）抗體，見于硬皮病及肢端動脈痙攣病；④核仁型：僅核仁處發熒光，抗體類型為RNA，見于硬皮病及干燥綜合征。第七十二頁，共九十二頁，2022年，8月28日膜型第七十三頁，共九十二頁，2022年，8月28日斑點型第七十四頁，共九十二頁，2022年，8月28日核仁型第七十五頁，共九十二頁，2022年，8月28日彌漫型第七十六頁，共九十二頁，2022年，8月28日太空望遠鏡型？第七十七頁，共九十二頁，2022年，8月28日2．抗雙鏈DNA抗體測定抗雙鏈DNA抗體（doublestrandedDNAantibody，dsDNA）的靶抗原是細胞核中的DNA的雙股螺旋結構，這種抗體是SLE的活動性標志，尤其是SLE合并狼瘡性腎炎時。常用間接熒光抗體法（IFAT）測定。【臨床意義】抗dsDNA抗體對SLE的特異性較高，其活動期陽性率達70%～90%。其他疾病，如類風濕性關節炎、慢性肝炎、干燥綜合征等亦可出現陽性。第七十八頁，共九十二頁，2022年，8月28日抗ds-DNA抗體陽性第七十九頁，共九十二頁，2022年，8月28日可提取性核抗原（ENA）抗體譜測定核內可提取性核抗原（extractablenuclearantigen，ENA）抗原由多種分子質量不同的多肽構成，即Sm、核糖體、Scl-70、Jo-1、SS-B、SS-A和核糖核蛋白（RNP）等。主要包括抗RNP抗體和抗酸性核蛋白（Smith，Sm）抗體。【參考值】免疫印跡試驗（IBT）：陰性。第八十頁，共九十二頁，2022年，8月28日【臨床意義】抗Sm抗體為SLE所特有，特異性達99%，但敏感度低（20%）；抗Sm抗體陽性的SLE患者，內臟病變發病率較高，對治療反應性差。抗RNP抗體陽性主要見于混合性結締組織病，亦見于SLE、進行性系統性硬化病、皮肌炎、重疊綜合征等。抗RNP抗體陽性的SLE患者，腎臟損害一般較輕。第八十一頁，共九十二頁，2022年，8月28日4．狼瘡細胞（LE細胞）檢查狼瘡（LE）因子是一種重要的抗核蛋白抗體，多為IgG。LE因子與輕微損傷的白細胞上抗原決定簇作用時，使細胞核膨脹、核染色質結構不清、嗜堿性減弱，形成一種淡紫紅色的均質體，即LE小體。