植物生理學 過氧化氫酶的活性的測定_第1頁
植物生理學 過氧化氫酶的活性的測定_第2頁
植物生理學 過氧化氫酶的活性的測定_第3頁
全文預覽已結束

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

過氧化氫酶的活性的測定－紫外線吸收法一、原理HO在240nm波長下有強烈吸收，過氧化氫酶能分解過氧化氫，22使反應溶液吸光度（A）隨反應時間而降低。根據測量率的變化速240率即可測出過氧化氫酶的活性。二、材料與設備植物材料：植物的葉實驗材料：紫光分光光度計、離心機、研缽、250ml容量瓶、0.5ml吸管1支、10ml試管1支試劑：0.2mol/LpH7.8磷酸緩沖液0.1mol/HO（用0.1mol/L高錳酸鉀標定）22三、操作步驟1、酶提取液：稱取葉片0.5g置于研缽中，加入pH7.0的磷酸緩沖液研磨成為勻漿，并用緩沖溶液清洗研缽數次（共用6ml磷酸緩沖液，緩沖液分幾次加入），取上部澄清液在4000rpm下離心15min,上清液即為過氧化氫酶粗提液。保存備用。2、測定：取10ml試管1支，按表20-2順序加入試劑。紫外線吸收法測定HO樣品配置表22在管中加入0.3ml0.1mol/L的HO，加完后立即計時，并迅速倒入石22英比色杯中，240nm下測定吸光度，每隔一分鐘讀數一次，共測三分鐘，測完后，按下式計算酶活性。四、結果計算以lmin內減少0.1的酶量為一個酶活單位（U）△AXV240T-過氧化氫酶活性（u/gFW/min）=0?1XVXtXFW=0.043X4.6一0.1一0.2一0.3一3=10.99五、實驗反思1、影響過氧化氫酶活性測定的因素有哪些？過氧化氫酶提取自植物的新鮮葉片中，新葉與舊葉的酶活性存在差異，所以葉片的選擇會影響酶活性的測定。溫度的變化也會引起酶活性的測定研磨是否充分，洗滌是否洗干凈也會影響。2、實驗測得的吸光度較小（吸光度的起始值較低），酶活性較小，可能是選取的葉片較老，實驗中的失誤，用滴定管滴定時，滴定的蒸餾水超過

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論