實驗動物質量監測2023/2/21第一頁，共七十五頁，2022年，8月28日

遺傳質量監測微生物學與寄生蟲學監測飼料質量監控環境質量監測2023/2/22第二頁，共七十五頁，2022年，8月28日實驗動物質量監測的意義生物學實驗研究的四個基本條件

Animal，Equipment，Information，Reagent，簡稱AEIR四要素這4個要素在整個實驗研究中具有同等重要的地位，不能忽略或偏廢。事實上，實驗動物質量往往成為制約性要素，影響整個實驗的質量和水平實驗動物質量監測是實驗動物科學的重要內容，是確保實驗動物質量的必要手段。2023/2/23第三頁，共七十五頁，2022年，8月28日實驗工作人員的健康和生命的保證常見的人畜共患病：流行性出血熱、狂犬病、猴B病毒、淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒、利什曼原蟲等2023/2/24第四頁，共七十五頁，2022年，8月28日動物生產和繁殖的保證動物一旦染上傳染病，則種群難以凈化，一些烈性傳染病如鼠痘、兔病毒性出血癥等可致動物全軍覆沒，造成巨大經濟損失。2023/2/25第五頁，共七十五頁，2022年，8月28日

實驗結果準確性、規律性、重復性的保證2023/2/26第六頁，共七十五頁，2022年，8月28日實驗動物質量監測主要包括以下幾個方面：遺傳質量、微生物與寄生蟲質量、飼料質量、環境質量監測。2023/2/27第七頁，共七十五頁，2022年，8月28日第一節遺傳質量監測

實驗動物的遺傳背景與反應特性，是影響實驗結果的重要因素。不同遺傳背景與反應特性的實驗動物，對同一刺激有時可引起不同質和量的反應。為了保存實驗動物品種品系特性。使實驗動物使用者在動物實驗中能得到正確的、可重復的科學數據，保證生物醫學研究的良好效果，實驗動物生產者在嚴格遵守品系繁育技術路線的同時，還必須努力做好實驗動物遺傳質量的嚴格監測，以防止實驗動物遺傳上的污染和變異。2023/2/28第八頁，共七十五頁，2022年，8月28日如：BALB/c對放射線比其他品系更為敏感。C57BL/6腫瘤發生率低，A系高。BALB/c和C3H小鼠對鼠傷寒沙門氏菌的敏感性存在顯著差異SHR為自發性高血壓大鼠，心血管疾病發生率高

2023/2/29第九頁，共七十五頁，2022年，8月28日一、群體管理

管理上人為的粗心最易引起遺傳上的混雜，所以對育種群進行恰當的管理是保證遺傳質量的最有效方法。每一個實驗動物育種機構都應當認真執行良好的育種制度，完善地保持育種記錄，基礎群應有系譜記錄。而要做到以上要求，最重要的因素就是要有訓練有素、經驗豐富的技術人員，他們應懂得育種體系和方法、記錄方法、動物遺傳學、實驗動物學等知識。2023/2/210第十頁，共七十五頁，2022年，8月28日二、免疫學標記監測

（一）皮膚移植法這是目前最常用和最靈敏的檢測亞系內或亞系間組織相容性基因差異的方法。在小鼠和大鼠中普遍采用的是尾部或背部皮膚移植法。皮膚移植法靈敏度高。易掌握，經濟。不需昂貴設備，易對植皮成活情況進行觀察和判斷。由于手術創傷小，動物對移植創傷的抵抗力強。所以不會影響檢測結果。可檢測出許多H基因。并能有效地測出新發生的、造成亞系變異的遺傳混雜和突變。2023/2/211第十一頁，共七十五頁，2022年，8月28日

（二）混合淋巴細胞反應混合淋巴細胞反應的原理為：異源動物或遺傳上有差異個體的淋巴細胞混合或培養相當時間后，這些細胞都開始增大，合成DNA、RNA、蛋白質，甚至進一步裂解。這是植皮排斥反應辨別和擴增階段的體內對應方法，其結果可預測體內植皮一宿主反應。此反應結果可在7～9天獲得，定期地從群體中抽取足夠量的動物進行監測能夠維護實驗動物的品質。2023/2/212第十二頁，共七十五頁，2022年，8月28日

（三）淋巴組織移植用供體的均質淋巴器官，如骨髓、脾、淋巴結、胸腺或胚胎肝臟制備出單細胞懸液。然后將適量活細胞通過靜脈或腹腔注射到受體動物體內，組織相容性由受體中存活者及脾增大者來確定，也可以用放射學方法。根據移植細胞的存活數測定。2023/2/213第十三頁，共七十五頁，2022年，8月28日三、生化標記監測

通過多種形式的電泳和電聚集．可檢定生化標記即同工酶或蛋白質，常用的電泳介質有乙酸纖維素膜、淀粉凝膠、聚丙烯酰胺凝膠。每一種標記系統都需要將緩沖液、溫度、時間、電壓和電流調整到最佳值．并做特異性染色，最后將得到的帶型與公布的生化遺傳圖式進行比較。如中華人民共和國國家標準GB；T14923-2001公布9種常用近交系大鼠生化位點標記基因(表5-2)。2023/2/214第十四頁，共七十五頁，2022年，8月28日表5-2常用近交系大鼠生化位點標記基因StrainAkp1Cs2Es1Es3Es4Es6Es8Es9F344/NaaaababaLOU/CaaaabbbaSHRababaabaWKYbbadbaacLEW/MaaadbabcACIbababbba2023/2/215第十五頁，共七十五頁，2022年，8月28日四、骨骼形態特征監測

常采用“下頜骨分析法”來鑒別和檢測大小鼠的亞系變異。將年齡、性別、體重相當的大鼠或小鼠處死后，小心剪下頭部，煮沸2～3min以上，加入蛋白水解酶，37℃恒溫保持過夜，剔除殘余肌肉，除去切齒，仔細分辨出右下頜骨，加以標記，在直角坐標系上測量出多個形態特征參考點距離。將所有測量的平均數作統計分析，利用判別函數確定下頜骨形狀。如果測量值集中，則表明被測亞系間無顯著的遺傳變異。2023/2/216第十六頁，共七十五頁，2022年，8月28日五、染色體帶型監測

可以利用染色體分帶技術，鑒別C帶和Q帶作為染色體標記，用來區分大、小鼠的近交系，在多數大、小鼠的近交系中，所有中期染色體都存在C帶材料，同源染色體的C帶區域大小相同；不同的近交系，C帶材料大小不同，是品系特異的，是一種很有價值的檢測亞系變異和混雜來源的方法。2023/2/217第十七頁，共七十五頁，2022年，8月28日

六、現代分子生物學技術在遺傳監測中的應用

傳統的遺傳監測方法來源于過去研究者對哺乳動物進行遺傳分析時采用的研究手段。隨著分子生物學技術的發展，分子生物學技術有可能取代傳統的遺傳監測方法，其優點是多態性高，位點豐富，實驗技術成熟，直接涉及生物的遺傳基礎，DNA樣品容易保存和運輸等等。現將在遺傳監測中有著廣泛應用前景的幾種分子生物學方法介紹如下：2023/2/218第十八頁，共七十五頁，2022年，8月28日1．限制性片斷長度多態(RFLP)技術當動物基因組DNA被限制性內切酶消化時，酶能夠識別雙鏈DNA鏈上的特定核苷酸序列，并在每條DNA鏈上切割產生一個切口，將雙鏈DNA分子斷開而形成3`-OH和5`-P末端，使DNA裂解為片斷。這些片斷的長度在動物群體中存在變異，造成多態現象。通過DNA電泳和DNA探針分子雜交技術，即可觀察到不同帶型。2023/2/219第十九頁，共七十五頁，2022年，8月28日

例如：位于小鼠第2號染色體補體-5（complement-5）位點(He)的pC5探針，當用HindⅢ消化小鼠DNA時，C3H品系將產生一條2.7kb的帶型，而AKP品系將產生6.0kb和4.6kb兩條帶型。從而可以在He位點上區別這兩個品系。目前所報道的RFLP位點已多達1098個，給遺傳學研究帶來許多便利條件。2023/2/220第二十頁，共七十五頁，2022年，8月28日2．簡單序列長度多態(SSLP)技術簡單序列長度多態位點是動物基因內廣泛存在的由l～4個核苷酸組成的成串的重復序列，又稱為微衛星(microsatellite)。估計這樣的DNA結構在哺乳動物基因組內的數目多達5萬～10萬個。目前在小鼠已發現有6000個之多。在每個特定的位點上，重復序列的長度在不同品系中存在著差異。采用夾在這些序列兩端的引物，通過聚合酶鏈式反應(PCR)和電泳，就能觀察到這些位點的差異，從而區分不同的品系。2023/2/221第二十一頁，共七十五頁，2022年，8月28日

例如：小鼠第16條染色體的D16Mit4位點，其PCR產物的大小（bp）在常用近交系中分別如下：C57BL/6-132，DBA/2-123，A/J-147，C3H-123，BALB/c-149，AKR-126，CBA-132。SSLP測試技術比RFLP技術簡便，多態性高，需要的DNA樣品較少，引物容易獲得，推廣應用前景可觀。2023/2/222第二十二頁，共七十五頁，2022年，8月28日3．DNA指紋(fingerprinting)技術上述兩種DNA技術是針對單個DNA位點進行的測試。DNA指紋技術一次可同時測試多個位點，所以有一定的優勢。DNA指紋技術經過電泳后可獲得十幾到幾十條帶，而這些帶型在個體之間或品系之間有差異，如同人類的指紋在每個人都不同一樣，因此而得名。通常有兩種方法獲得DNA指紋圖。一是用限制性內切酶和小衛星探針技術獲得的DNA指紋。二是用較短的隨機擴增引物或小衛星引物，通過PCR而獲得的DNA指紋。2023/2/223第二十三頁，共七十五頁，2022年，8月28日DNA指紋圖譜有時在亞系或亞群之間有區別，所以對亞系的監測十分有用。但是DNA指紋的結果因為電泳帶太多而不好辨認和比較。因此，也影響其在遺傳監測和其他研究中的應用。目前所做的DNA指紋比上述兩種DNA技術少，但隨著研究的深入和方法的改進，將來一定會有所突破。2023/2/224第二十四頁，共七十五頁，2022年，8月28日4．隨機擴增多態（RAPD）技術

RAPD技術是20世紀90年代發展起來的一種簡便、快捷的檢測基因組DNA多態性的遺傳標記技術。該項技術首先將動物目的基因組DNA提純、酶切，用含10個堿基的隨機引物，對DNA進行PCR擴增，經電泳，便可在多個位點上得到擴增產物。各種DNA多態分析方法，2023/2/225第二十五頁，共七十五頁，2022年，8月28日

如：DNA指紋、限制性片段長度多態(RFLP)等，雖然可直接檢測基因組的遺傳變異，但都不同程度地存在操作復雜、需要特異性操作、需要事先知道動物基因組DNA序列等不足。而RAPD技術，由于引物可任意改變，有可能找到任何一個個體特異的RAPD標記，從而為實驗動物的遺傳檢測和分析提供一個十分有效的工具。2023/2/226第二十六頁，共七十五頁，2022年，8月28日

七、遺傳性狀監測結果的分析

當被檢查的遺傳性狀與每個品系的遺傳概貌圖一致時，同時遺傳管理資料清晰、可信，可以認為有關品系的繁育生產正在正確地進行，該品系的動物遺傳質量合格；若與遺傳概貌圖不一致時，可以考慮以下原因：2023/2/227第二十七頁，共七十五頁，2022年，8月28日1．遺傳污染(geneticcontamination)

這是最常見的遺傳變異，往往是由于遺傳學管理不善所致。另外，相同毛色的動物品系在同一個飼養單元中繁育、維持，非常容易產生品系間的錯誤交配。這種情況如發現得早，在被檢查的性狀中至少可以觀察到一個以上基因標記發生改變，出現雜合型，或與遺傳概貌不符的其他表型；如果發現得較遲，一些雜合基因可隨機地固定為單一的純合型，但與原品系的遺傳概貌不一致。出現上述情況均應淘汰原品系，更換來源清楚、質量合格的動物作為新種，重新進行品系的繁育。2023/2/228第二十八頁，共七十五頁，2022年，8月28日2.遺傳漂變(geneticdrift)

遺傳漂變是指一個品種或品系動物基因型在飼養的過程中可能發生隨機的改變。這種改變多由于近交系動物部分雜合基因尚未純合時即進行了分系，造成了亞系和支系的形成。監測時可以看到一個品系所有的動物在1～2個基因標記上與原品系的遺傳概貌不符，但表型一致又均為純合型。這種情況在經同系異體移植試驗排除了遺傳污染后需按照亞系和支系重新命名。2023/2/229第二十九頁，共七十五頁，2022年，8月28日3．遺傳突變(mutation)

遺傳突變在哺乳類動物中的頻率為10～5。在分析監測結果時，如果僅看到一只動物單個基因標記出現雜合型，應考慮有否發生遺傳突變。為了證實此點，往往需要根據動物編號查詢該只動物同窩兄妹或雙親的基因標記表型。如遺傳突變發生在親代，則同窩兄妹均應為雜合型或分離產生不同的表型。2023/2/230第三十頁，共七十五頁，2022年，8月28日

如果在同窩兄妹或雙親中該基因標記的表型與遺傳概貌圖一致，應考慮被測個體發生了遺傳突變。在檢查時如同時發現其他基因標記的表型與遺傳概貌圖不符，無論是雜合型還是純合型均應考慮發生了遺傳污染，應立即淘汰換種。遺傳突變如無特殊保留價值，在剔除突變的個體后，整個品系可以繼續保存；如有保存價值，可將突變個體單獨培育成同源突變近交系。2023/2/231第三十一頁，共七十五頁，2022年，8月28日第二節微生物學與寄生蟲學監測

如何控制微生物和寄生蟲，是實驗動物標準化的主要內容之一。一般而言，科研中使用的實驗動物，其微生物和寄生蟲的控制級別越高，其結果就越精確、越可靠。2023/2/232第三十二頁，共七十五頁，2022年，8月28日一、監測意義1．在人工飼養的開放環境中，實驗動物被集中飼養，由于活動空間相對狹小，實驗動物繁殖快、數量多，同時受到外界各種病原微生物以及寄生蟲的干擾，極易導致疾病的爆發與流行。實驗動物疾病的爆發，除造成動物死亡外，還會干擾實驗的順利進行，引起生物制品的污染，對人類健康產生危害。因此對實驗動物進行微生物、病毒與寄生蟲的監控，對保證實驗研究的順利進行和工作人員的身體健康具有十分重要的意義。2023/2/233第三十三頁，共七十五頁，2022年，8月28日

定期對各級實驗動物群進行微生物學、寄生蟲學監測，以確定各級實驗動物是否符合原定級別，即是否有原級別不應有的病原體的入侵，以便及早采取措施，以免疫情擴大而蒙受更大的損失。另一方面，要避免科學工作者誤用下合適的動物，避免人獸共患病病原體感染飼養人員，保障這些人員的健康。2023/2/234第三十四頁，共七十五頁，2022年，8月28日

2．對實驗動物飼養設施的監測，為確保這些設施能否控制微生物污染提供依據。

3．對引進的實驗動物進行檢疫，避免病原體入侵原有的動物群。

4．如動物群發生疾病，為了確證病原，對患病動物進行病原學診斷，積累對疾病的認識，收集菌株和毒株，進一步研究病原，為診斷試劑和疫苗的制備提供菌株和毒株。2023/2/235第三十五頁，共七十五頁，2022年，8月28日二、監測方法

（一）實驗動物病毒學檢測方法

1．血清學檢測適用于各級各類實驗動物的經常性檢測和疫情普查。常用方法有：酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、免疫熒光試驗(IFA)、免疫酶染色試驗(IEA)、血凝試驗(HA)、血凝抑制試驗(HI)、病毒中和試驗、補體結合試驗、瓊脂擴散試驗。2023/2/236第三十六頁，共七十五頁，2022年，8月28日2．病原學檢測適用于動物群中有疾病流行，需要檢出病毒或確認病毒存在的情況。檢測方法有：病毒分離與鑒定，病毒顆粒、抗原或核酸的檢出，潛在病毒的激活，抗體產生試驗等。例如：采用免疫組化的方法在光鏡下檢查病變組織中的特異性抗原。采用HA或HI方法檢查患病動物排泄物或組織懸液中的血凝素抗原；采用電鏡或免疫電鏡技術檢查組織或排泄物中的病毒顆粒；采用聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)檢查病毒基因組；采用核酸分子雜交技術或聚合酶鏈反應(PCR)檢出組織或排泄物中的病毒核酸。2023/2/237第三十七頁，共七十五頁，2022年，8月28日

（二）實驗動物細菌學檢測方法最常用的方法是病原菌的分離與培養或進行動物接種。部分病原菌，如：鼠傷寒沙門菌、鼠棒狀桿菌、布氏桿菌、沙門菌、氣管敗血波氏桿菌等，可采取血清學方法，但仍需結合分離培養結果最后做出診斷。對于泰澤菌，由于不能在人工培養基上生長，因此宜采用組織壓片、鏡檢的方法進行檢查，并結合病理檢查結果最后做出診斷。2023/2/238第三十八頁，共七十五頁，2022年，8月28日

（三）實驗動物真菌學檢測方法目前主要采用沙氏培養基分離培養。皮膚真菌一般在25℃培養，深部真菌在37℃培養。不同的真菌具有一定的菌落特點，鏡下染色檢查可進行種屬鑒定，有時，還需借助于生物化學反應結果和免疫學方法進行最后診斷。2023/2/239第三十九頁，共七十五頁，2022年，8月28日

（四）實驗動物寄生蟲學檢測方法

1．體外寄生蟲肉眼觀察法、透明膠紙粘取法、拔毛取樣法、皮屑刮取法、黑背景檢查法、解剖鏡下通體檢查法等，主要檢查蚤、虱、螨等節肢動物。

2．體內寄生蟲主要檢查蠕蟲和原蟲，可用直接涂片法(糞便、血液、臟器、腸內容物)、飽和鹽水漂浮法或沉淀法、透明膠紙肛門周圍粘取法、組織或器官剖面壓印法、病變組織切片或壓片法、尿液的離心法(如查鼠膀胱線蟲)等。2023/2/240第四十頁，共七十五頁，2022年，8月28日

實驗動物的微生物、寄生蟲檢測具體操作方法詳見《國家標準實驗動物微生物學和寄生蟲學的檢測方法（嚙齒類和兔類）》（GB/T14926.1-14926.41-2001）。檢測方法歸納起來有病原學檢測和血清學檢測。細菌、真菌和寄生蟲以病原學檢測為主，血清學檢測為輔。隨著血清學方法技術的提高，有些病原感染的檢測也逐漸使用血清學方法，如支原體、泰澤菌、弓形蟲等。病毒的常規定期檢測以血清學為主，疾病診斷以病原學檢測為主。2023/2/241第四十一頁，共七十五頁，2022年，8月28日三、監測要求

1．選定監測項目任何一種實驗動物都有許多致病性微生物、寄生蟲，結合具體情況選擇合適的檢測項目，既達到保證動物質量的目的，又可節省人力物力。各國、各地和單位都有一定的檢測項目，雖不盡相同，但主要方法類同。我國經過十多年來對各地實驗動物感染病原微生物、寄生蟲情況的調查，結合其他國家的規定和經驗，制定了我國嚙齒類和兔類微生物學、寄生蟲學等級標準，貓、犬、猴等中型實驗動物，衛生部醫學實驗動物管理委員會亦有初步規定。2023/2/242第四十二頁，共七十五頁，2022年，8月28日2．采樣數量和頻度檢測結果的準確性，要采取合適的動物數量。采樣動物數可根據動物群體的污染程度而有所不同。例如：某種病原體感染率為1％的動物群體，如要確實查出來，最少也得查100只動物，但實際上，如果病原體具有中等程度的傳染力，若能檢查10只左右，大概就可以達到目的。按照國家標準規定，動物數量超過100只的生產繁殖單元取樣如下：普通級動物不能少于10只；清潔級動物檢測5～10只；飼養于小隔離罩內的無菌動物和無特定病原體動物隨機抽檢2只；飼養于生產繁殖單元的抽檢5～10只。2023/2/243第四十三頁，共七十五頁，2022年，8月28日

除了采樣的數量，還必須考慮到檢測的間隔時間。一般來說，一旦病原體侵入動物群體引起感染，初期分離病原體較容易，抗體的檢出率上升。2～3個月后可因某些個體抗體水平的降低以及新出生的非感染個體的增加等原因，抗體檢出率下降，據此，檢測間隔時間以3個月一次為宜。至少每年檢查2次，選在春、秋季疾病多發季節為宜。2023/2/244第四十四頁，共七十五頁，2022年，8月28日

采樣時，宜在動物群中不同方位隨機采取育成動物，選擇至少4個不同的位置采集樣品或采用前哨動物放人群內，不時調換位置，飼養一定時間后解剖檢查抗體或病原。運輸途中保證動物的安全和避免污染。引種的動物則需有檢疫隔離期，小鼠、大鼠和豚鼠l～7天，兔21天，犬、貓21～28天，猴l～9周。2023/2/245第四十五頁，共七十五頁，2022年，8月28日

一般來說，無論病原學或血清學檢測，檢測結果陽性者表示該群動物有該病原體感染的存在。但作為疾病病原體的確定，還需要進一步分析。如果檢測結果陰性，一般來說可作為無此病原體存在的依據。但檢測結果亦受多種因素的影響。如：取材數量、感染率的高低、取材頻率、取材對象(動物年齡、疾病的早晚期等)、方法學的選擇(病原學或血清學檢測)、方法學的敏感性等，均與檢測結果有密切相關。2023/2/246第四十六頁，共七十五頁，2022年，8月28日第三節飼料質量監控

實驗動物作為生物體離不開營養，飼料是實驗動物攝人營養素的主要來源。只有良好的營養才能使實驗動物保持良好的健康狀態，而健康的實驗動物才能確保實驗結果的可靠。因此，加強飼料質量標準化管理，是實現實驗動物標準化的重要環節。2023/2/247第四十七頁，共七十五頁，2022年，8月28日

一、實驗動物飼料生產加工、儲存與管理

實驗動物飼料是以實驗動物飼養標準為依據，經過嚴密設計、科學配方、精心加工、生產制造而形成的標準化產品。因此，進行實驗動物飼料生產必須了解有關實驗動物飼養管理法規條例，全面掌握飼料的生產過程。2023/2/248第四十八頁，共七十五頁，2022年，8月28日1．實驗動物配合飼料的生產加工應根據各種實驗動物的特性和不同的實驗目的，采用不同的飼料加工方法。常用實驗動物如大鼠、小鼠、豚鼠及兔等實驗動物的飼料應制成具有一定硬度的顆粒飼料較為適合其攝食習性；狗、貓則以膨化飼料為好；而有的實驗動物根據實驗目的不同，常要求制作糊狀、粉狀或液體飼料以滿足研究需要。但是無論其形狀如何，在實驗動物飼料加工生產過程中都應注意生產規格及其產品標準。2023/2/249第四十九頁，共七十五頁，2022年，8月28日2．實驗動物飼料的儲存包括原料儲存和成品儲存兩部分內容。原料儲存：應按原料種類、生產廠家、進貨日期等分開保管。保管中要注意溫度、濕度變化，防止鳥類、鼠類和昆蟲的污染。盡量做到先進先出。成品儲存：要定期清掃存儲罐，產品變更時徹底清掃存儲罐，成品庫內嚴格執行先進先出原則。注意存儲罐的溫、濕度，防止成品飼料霉變，防止野鼠、昆蟲及有毒物質自引污染。分類堆放，標志清楚，嚴防與原料混貯，保證標準貨物出庫登記。2023/2/250第五十頁，共七十五頁，2022年，8月28日3．實驗動物的飼料管理實驗動物飼料管理是指從飼料原料選擇、生產加工到成品以及生產過程中的蟲害、安全及衛生管理的全過程。2023/2/251第五十一頁，共七十五頁，2022年，8月28日

二、實驗動物飼料的消毒

實驗動物的飼料在收獲、加工、儲存及運輸過程中都有污染病菌的可能，為確保實驗動物質量和動物實驗的準確性，我們要通過適當的消毒方法使其達到滅菌的目的。常用飼料消毒方法有干熱、濕熱、輻照及藥物熏蒸等多種，應按飼養動物的不同要求和飼料種類以及所具備的條件來選擇。2023/2/252第五十二頁，共七十五頁，2022年，8月28日1．干熱滅菌法

將飼料在80～100℃的條件下烘烤。此法設備比較簡單，但溫度不好掌握，滅菌不夠徹底，而且營養損失較大。2023/2/253第五十三頁，共七十五頁，2022年，8月28日2．高溫高壓滅菌法高溫高壓滅菌法是指將飼料在121℃，1.0kg/cm3的高溫高壓蒸鍋內加熱15min以上，將細菌全部殺死。用高壓滅菌必須使蒸氣滲透飼料內部，操作時預先將鍋內減壓至-60mmHg以下，然后導人高壓蒸氣，一般115℃30min、12l℃20min、125℃15min。絕大多數維生素。尤其是維生素C、維生素B1、維生素B6和維生素A等，過熱會受到破壞，而純化學性飼料比天然飼料更不穩定。2023/2/254第五十四頁，共七十五頁，2022年，8月28日3．藥物熏蒸滅菌法熏蒸是利用化學藥品的氣霧劑對飼料進行消毒。如用環氧乙烷進行滅菌，熏蒸后必須在不低于20℃的自然空氣中將殘余氣體揮發。實驗證明，即使這樣處理，在飼料中仍然殘存一些對動物代謝有損害的化合物。2023/2/255第五十五頁，共七十五頁，2022年，8月28日4.放射線照射滅菌法通常在對谷物類飼料消毒時，采用5Mrad劑量的60Co照射對營養成分損失甚小。γ射線對維生素B1和維生素B6僅有微小破壞，通常采用的劑量為3～5Mrad。此法在滅菌效果和對營養素的破壞程度方面都優于其他方法。但受條件所限，不便推廣。2023/2/256第五十六頁，共七十五頁，2022年，8月28日三、實驗動物飼料的檢測

飼料檢測是實驗動物飼料質量管理必不可少的重要手段。飼料質量變化不僅直接影響著實驗動物質量，而且也間接影響實驗結果的可靠性。我國實驗動物飼料質量應符合國家標準GBl4924-2001，根據實驗動物的不同種類、性別、年齡、體重和生理階段，結合能量與其他各種營養物質代謝實驗和飼養實驗結果，科學地規定每只動物每天應給予的能量及各種營養物質的數量。這種規定被稱為飼養標準。2023/2/257第五十七頁，共七十五頁，2022年，8月28日1．感觀性狀的檢驗根據飼料產品的種類，用手、眼、鼻等器官直接通過色澤、氣味、手感、雜質情況等項指標對飼料的新鮮程度、均勻度、含水量等進行直觀判斷。

2．營養成分的測定按照國家實驗動物飼料營養標準所規定的養分含量及分析方法，對產品的營養成分和混合均勻度等進行檢測。飼料含水量應經常檢測，其他營養成分應定期抽檢，對魚粉、酵母粉等貴重原料的養分含量(如蛋白質等)，應在每批進貨時抽樣檢測。具體可參照表5-3～表5-6。2023/2/258第五十八頁，共七十五頁，2022年，8月28日第四節環境質量監測

嚴格監控實驗動物生產環境和動物實驗環境，可保證實驗動物健康和質量標準化，可保障實驗研究獲得正確的結果。合乎標準的環境，不僅為實驗動物及動物實驗工作者提供適宜的條件，維持實驗動物等級標準，而且是保障工作人員身體健康，使他們不受危害因素傷害的需要。實驗動物設施在啟用前和使用的過程中，都必須對環境的相關指標進行監測。對內環境的監測如下：2023/2/259第五十九頁，共七十五頁，2022年，8月28日一、噪聲測定1．儀器普通噪聲計、積分型噪聲計。

2．測定方法分靜態和動態：靜態為在動物飼養前，所有系統正常運轉時檢測；動態為飼養動物后，在正常飼養條件下檢測。通常在潔凈室無人、無動物，空調凈化系統正常運行的情況下測定潔凈室的噪聲，測定點選擇在被測環境的中央，如房間大于15m2，可選擇兩個或兩個以上的測定點，距地面1m。2023/2/260第六十頁，共七十五頁，2022年，8月28日二、照度測定1．儀器便攜式照度計。

2．測定方法測定者需穿著黑色衣服，避免反射光影響測定結果。測定前開啟所有的照明設備，測定時以距墻壁1m以上、離地面85cm處的平面照明度為準。每隔1.0～2.0m選擇一個測量點，每點測3次，取平均值，單位為lx。2023/2/261第六十一頁，共七十五頁，2022年，8月28日三、空氣落下細菌測定

空氣落下菌數測定應在實驗動物設施經消毒滅菌，空調凈化系統正常運行48h后進行。

1．試劑直徑9cm的血液瓊脂培養基。

2．測定方法在無動物的狀態下，每5～10m2放置一個直徑9cm的血液瓊脂培養基，敞開皿蓋暴露30min，蓋上皿蓋，置于37℃培養48～72h后，計算培養皿內菌落數。2023/2/262第六十二頁，共七十五頁，2022年，8月28日四、空氣潔凈度測定

應在動物飼養前，空調凈化系統運行48h后進行，檢測儀器為塵埃粒子計數器。亂流潔凈室面積不大于50m2的布置5個測點，每增加20～50m2應增加3～5個測點。測定方法按使用說明書，每個測定點連續測定3次，測定過程中不得調整測定次數。測定時100級凈化室的采樣量每分鐘不少于1L，1000級以上的凈化室的采樣量每分鐘不小于0.3L。結果評定：層流潔凈室取各測定點最大值；亂流潔凈室取潔凈室各測點的平均值作為實測結果。2023/2/263第六十三頁，共七十五頁，2022年，8月28日五、相鄰潔凈區靜壓差測定1．儀器微壓計，最小刻度為1.0Pa。

2．測定方法測定順序一般由低壓到高壓，測定前將需要測定壓差的兩個區域封閉，關閉所有的門。測定時將測定用的膠管穿過墻上或門上預留的孔洞進入室內(穿膠管的孔洞必須密封，設置在離墻面不遠處垂直氣流的方向，且周圍無阻擋物、氣流干擾小的區域)。2023/2/264第六十四頁，共七十五頁，2022年，8月28日六、氣流方向和速度測定1．儀器發煙管、熱球式電風速儀或數字顯示式風速儀。

2．測定方法測定氣流方向一般用煙霧法，也可用紙條測定法。測定氣流速度，將風速儀放置在有代表性的飼養實驗動物籠具的位置進行測定。測量點設置可參照溫度測試點設置。測量時風速計傳感器與風向垂直，指針做周期性運動，要取其平均值。2023/2/265第六十五頁，共七十五頁，2022年，8月28日七、換氣次數測定1．儀器熱球式電風速儀或數字顯示式風速儀。

2．測定方法測量換氣次數，首先必須計算出換氣量。換氣量由送風管道風速求得。在一個以上進氣口的房間，要將各進氣口合并計算。2023/2/266第六十六頁，共七十五頁，2022年，8月28日

例如，以送風口計算換氣次數，公式為：換氣量Q(m3/h)＝3600SV

其中：S為有效截面積(m2)，V為平均風速(m/s)。換氣次數R(次/h)＝Q/L

其中：R為換氣次數(次/h)，Q為換氣量(m3/h)，L為室內容積(m3)。2023/2/267第六十七頁，共七十五頁，2022年，8月28日八、溫度、濕度測定

溫、濕度是日常管理中最基本也是最重要的環境檢測指標之一，溫、濕度的檢測除了可觀察連接到空調設備上的自動溫、濕度控制儀，還應在每個房間設置溫度、濕度計。常用的溫度計有棒狀溫度計、最高最低溫度計、熱敏電阻溫度計、數字型溫度計等。常用濕度計有干濕球溫度計、通風干濕機溫