中國科學院研究生院2007年招收攻讀碩士學位研究生入學統一考試試題科目名稱：生物化學與分子生物學考生須知：1．本試卷滿分為150分，全部考試時間總計180分鐘。2.所有答案必須寫在答題紙上，寫在試題紙上或草稿紙上一律無效。一、名詞解釋（每題4分，共20分）重組修復轉座子C4途徑正前饋作用和正反饋作用RNA剪接和可變剪接二、單項選擇題（每題1分，共20分，請在答題紙上標清題號，并將答案寫在題號后）下列各項中，不屬于細胞代謝的中間產物的是：A.葡萄糖-6-磷酸B.丙酮酸C.膽固醇D.乙酰輔酶A在真核生物細胞周期的四個時相中，用于準備DNA合成的是：A.M期B.G1期C.S期D.G2期下列各項中，不屬于真核生物基因表達轉錄前水平調節的過程是：A.RNA編輯B.染色質丟失C.染色體DNA的修飾和異染色質化D.基因重排下列各項中，尚未獲得諾貝爾獎的是：A.DNA雙螺旋模型B.PCR儀的發明C.RNA干擾技術D.抑癌基因的發現下列事件中，不屬于表觀遺傳調控的是：A.DNA甲基化B.組蛋白乙酰化C.mRNA加尾D.RNA干擾大腸桿菌中，參與轉錄終止調控的是：A.TATAboxB.p因子C.snoRNAD.RNaseP正轉錄調控系統中，調節基因的產物被稱為：A.阻遏蛋白B.誘導因子C.激活蛋白D.增強子既可利用上游啟動子，又可利用下游啟動子的RNA聚合酶是：A.RNA聚合酶IB.RNA聚合酶IIC.RNA聚合酶IIID.RNA聚合酶IV用來研究蛋白質-蛋白質間相互作用的實驗技術是：A.酵母雙雜交技術B.原位雜交技術C.RACE技術D.SAGE技術能夠引起細胞內蛋白降解的反應是：A.泛素化B.去泛素化C.磷酸化D.去磷酸化11．雙縮脲發應用來測定：A.肽B.糖C.RNAD.DNA抗霉素A對呼吸鏈（電子傳遞鏈）抑制的作用點在：A.NADH脫氫酶附近B.琥珀酸脫氫酶C.細胞色素氧化酶D.細胞色素b附近氨基酸在摻入肽鏈前必須活化，氨基酸的活化部位是：A.內質網的核糖體B.可溶的細胞質C.高爾基體D.線粒體T4DNA連接酶催化的連接反應需要能量，其能量來源是：A.ATPB.NADC.GTPD.乙酰CoA組蛋白的修飾可引起核小體的解離，這種修飾是：A.糖基化B.腺苷化C.磷酸化D.乙?；姿峄讣っ富钚缘陌l揮依賴于：A.鎂離子B.鈣離子C.氯離子D.鋅離子17．胰島素的功能單位是：A.單體8.二體C.四體D.六體．DNA合成儀合成DNA片段時用的原料是：A.4種dNTPB.4種NTPC.4種dNDPD.4種脫氧核苷的衍生物.蛋白激酶A催化蛋白質上氨基酸殘基的磷酸化，它是：A.絲氨酸殘基B.組氨酸殘基C.酪氨酸殘基D.門冬氨酸殘基.端粒酶是一種蛋白質一RNA復合物，其中RNA起：A.催化作用B.延伸作用C.模板作用D.引物作用三、判斷題(每題1分，共30分，請在答題紙上標清題號，并將答案寫在題號后，其中表述正確的寫“對”，表述錯誤的寫“錯”)糖酵解作用是葡萄糖在無氧條件下轉變為丙酮酸所經歷的一系列反應，在此過程中凈生成兩個ATP分子。在C3植物中CO固定是由核酮糖一1,5—二磷酸羧化酶催化的，反應在葉綠體的基質中進行。2乙酰輔酶A是脂肪酸分子所有碳原子的唯一來源。它來自于糖的氧化分解或氨基酸的分解。這些過程是在線粒體內進行的，脂肪酸合成的酶也存在于線粒體內。從膽固醇向膽酸的轉化是膽固醇降解最重要的機制，對這個過程的調控是由線粒體的7a—羥化酶來執行的。大腸桿菌RNA聚合酶全酶由4個亞基(a2郎’)組成。在原核細胞中，起始密碼子AUG可以在mRNA上的任何位置，但一個mRNA上只有一個起始位點。蛋白質生物合成過程中，tRNA在閱讀密碼時起重要作用，他們的反密碼子用來識別mRNA上的密碼子。單糖都含有手性碳原子，因而都具有旋光性。青霉素通過抑制轉肽干擾新的細胞壁形成而起抑菌作用。脂蛋白是由脂質和蛋白質以共價鍵結合而成的復合體。所有信號肽的位置都在新生肽的N端。蛋白質主鏈的折疊形成由疏水作用維系的重復性結構稱為二級結構。錯配修復和重組修復因為發生在DNA復制之后，因此稱為復制后修復。免疫球蛋白基因在淋巴細胞發育過程發生兩次特異位點重排，首先是輕鏈基因發生V-J重排，然后是重鏈基因發生V-D-J重排。RNA聚合酶催化的反應無需引物，也無校對功能。細胞周期的時間控制是由蛋白激酶系統對細胞外信號做出反應，改變其活性而實現的外顯子的序列多保守，而內含子的序列變化較大。核糖體的主要作用是參與蛋白質的修飾。表觀遺傳效應是不可遺傳的。選擇性剪切是真核生物特有的現象。當多個密碼子編碼同一個氨基酸時，這些密碼子可以在第二位或第三位堿基上不同。一般認為，RNA聚合酶并不直接識別啟動子區的堿基對本身，而是通過氫鍵互補的方式加以識別。大腸桿菌在多種碳源同時存在的條件下，優先利用乳糖。微小RNA(microRNA)是通過引起DNA甲基化來調節基因表達的。癌基因可分為病毒癌基因和細胞轉化癌基因兩大類。鳥槍法是一種檢測單核苷酸多態性(SNP)的常用方法。乙肝病毒的基因組是一個有部分單鏈區的環狀雙鏈DNA分子，兩條單鏈長度不一樣泛素不屬于熱休克蛋白。DNA甲基化永久關閉了某些基因的活性，這些基因在去甲基化后，仍不能表達。對靶蛋白的磷酸化是細胞內最重要、最普遍的酶活性調節方式。四、簡答題(每題5分，共30分)什么是反義RNA?真核生物中反義RNA調節基因表達的機理是什么？簡述原核生物與真核生物mRNA的主要差別。設計PCR引物的主要原則是什么？以雌二醇為例，簡述類固醇激素發揮作用的主要機制。核酸的紫外吸收有何特點？實驗中如何利用這一特點研究核酸？線粒體在真核生物的電子傳遞和氧化磷酸化中的作用是什么？五、問答題(每題10分，共50分)真核生物蛋白質的翻譯后加工有哪些？酶的分離純化主要過程及注意事項是什么？大腸桿菌乳糖操縱子的主要結構和阻遏蛋白的作用機制是什么？請列舉出5種真核生物中存在的RNA并概括它們的功能。假設你需要將一段cDNA克隆到表達載體中并轉化到大腸桿菌中。cDNA的兩端和載體上均有BamHI的酶切位點，你需要用BamHI切割cDNA和載體然后將它們連接在一起。下面是實驗方法要求的具體步驟：a.用BamHI處理載體DNA，然后用堿性磷酸酶去除5′端的磷酸基；b.b.用BamHI處理cDNA，然后與步驟a中得到的載體DNA混合，加入DNA聚合酶，在適當的條件下使cDNA與載體連接；c.將步驟b的產物轉入大腸桿菌感受態細胞中，培養后均勻涂在含有抗生素的瓊脂培養皿上。因為表達載體中含有抗性基因，能表達抵制抗生素的酶，所以只有含有載體的大腸桿菌才可以在含有抗生素的培養皿上生長，而未被轉化的細菌則因受到抗生素的抑制而死掉。你還參照實驗手冊做了下面四組對照：對照一、在含有抗生素的培養皿上面涂布未被轉化的(即不含有載體的)大腸桿菌感受態細胞(cellsalone)。對照二、用未被酶切的載體直接轉化大腸桿菌感受態細胞，將產物涂布在含有抗生素的培養皿上面(vectoralone)。對照三、用BamHI酶切載體DNA后，不用堿性磷酸酶處理，不需要cDNA，直接加入DNA聚合酶，然后轉化、涂板(Omitphosphatase,omitcDNA)。對照四、除使用堿性磷酸酶外，其它與對照三相同(OmitcDNA)。你一共做了三次實驗，在第一次中所有的平板中都長出很多細菌。在第二次實驗中所有的平板中都沒有長細菌。在第三次實驗中你得到了較好的結果，轉化成功，具體克隆數見下表：請回答下列問題：

A.B.A.B.C.解釋第二次實驗失敗的原因，并說明對照二的目的是什么；對照三和對照四的目的是什么？為什么實驗手冊上建議用堿性磷酸酶處理載體?中國科學院研究生院2007年招收攻讀碩士學拉研究生入學捶一考試試電參考答案和評分標推科目名稱：生物化學與分子生物學說明‘名詞斛彈、愉答網和何富明部分的評分標準見各建管霆中括號中的分值.一.名詞解釋I年也dih共"處ii.童蛆梭設?遺然幅1att能報的子代。曲升孑可遇過遺杪.組而加以弗外卜即認同樨加*的母陵上希相應棒音椎序列在至干堤長口處.版后用用含成的序列科卜上魄的空機此過程稱為蒯赳E3也因加雌在苴制之后又前:小豆桐后修復n分j,*算座再轉座子無一種可以由柒色體的一牛ti貴轉林到另外位置的遺愧因子.也就是一期m發生轉座的洲n捫，1C4選觸I￡4地性電作為CK曲收集，曲抻和抻運的兼斑，期期以*合■岐豐宮的葉片表面轉運郢內那的現崎這見匿潮!較面與皿意爭因此C4蜃柱是優任EM如戰威寓開的用周團6以逆知懈小邢陽世生的一片方式“分：心后兒M則和正曲作的做黜鐘附H器黑………皿加落丁.抵中產生眥*坤的眄的跟^肌雌碩好用”如瓦ftNA0接和用空剪接剪接是指從面州海體中生除內含于的過程口分】.可變薊技是指使用不同的剪捱便點，從同一面R附前體中指到不同妁楮本的過程【2分】,加M選擇倒（耳鹿1分，共M分）■號答案1拊2對3tt4恬5的?錯7對S替9對10911情以情113錯14?15三?貢斯???1分，共30初B#??K對17對1?19it￡■對21恰“對13e14情15時26特17對Uto19的3D對四、面答題(ft/百分，其"分)),什也是反義RNA?戈楂生物中反文RNAQ節茶因賽達的機電是什包'脩阮女SNA是指與目標MM具前互撲蟀列的限A分子12舟工3Mtt■11序列互補身臨定的同A蚌合，從而抻制麗的兩璋口分*2+府處廉搪生物與總植生物的A的生暮差別.料既植生謝謝A的特SEr【25分？P-國人的半衰潮煙，明譯在持京未克生培來時即開始進行.沒有內含b,忤多衡值生物毗監以分嗣友子的稔式存在.一個向工由可館科事十冊白質*l陳模生物15KM的T熠無枸子結構，3,均沒杳或R有馳舸的po”(J9罐也式植生物畫A的特衽1【工m分】B,至含有內含子，轉電后的或防前體防加工制成熱的郵人后才性械翻譯*h有些曲體mRHAJVtr選擇性剪忸現顰，起遇常不存在多暇度于*c.5,攙存在用子轉構r維大學4tli有giya＞隹巴”瓦祖計PC決引物的主K原則比什也？答：(1)曳物也度庾大于18個根甘酸，一勝為30—24中核音嚷131(2)引物與器序列同地加但不座過低(一段不低于砧*◎:1LitL(3)弓I%不施有姓央站將1即電能書冊p以上的回文即到⑷南引物何不的大于面以上的互補刖成同班到*左置所財任何互業的餐基工JLitL(5)引物中W的分布盡可能均勻,GF含■物&麗?臭肛＜：叫印二胃為。!■怖。理raut揮柞用的主案機藺.**與星盾中的年般第史體培合，盤M-受體艮合物由胡胞質轉移則卻附檀內衛史，地種直合物本身是一種作錄的博普勒，當他們站備到DNA特定部位后，引起大黃地生成專一性的mHNA,導顯合成出火.的特異蛋白質，從而調節代詡或生理功叔皿J?5.檀|?的裝外勝也有何特點？實物中加何利用這?特點砒我抹成7等士林眼的碳塞具有共鋤II健，囪而有架外囁收的性質.各腫HE基.演昔和植膏酸的吸收北調幅有區劇_LULT&ift的紫外吸收峰在2帥畫1附近工田.可用于泅定找BfiJJJtL根據260nm與需Onm的瞋光度（A）可判斷枚般擁度[[分1天精的DNA的工CP）6600.RNAA7700-7800.我生受性降解時F（P）0處升高.以此可以瞿別核酸刪劑的質■■且虹立然粒體在其原生物的電子傳遞和紈化砌庖化中的推用是什必？答，其核生物的電子梅遨和就他用硬犯都是在他肥的蛾粒體內81我生的傳ffi.現cue鼓觸體內展的動能概括熱3個方面，0）西明通以及陽防鹿氧化為COj.同時使NAD*和FAD逐版為NADH和FAD，這是發生在拔粒體基質盥面向基痍的內時曲白上門P）由于亂KADH和F*陽竹至覘粒體內廉上，同時摩.原用于泵口15升】.⑶將貯存于電化學質子攆立的推■由內界上的F用機.便合體合思皿13先】?五、忖掙HWMio其樹分）1*真植生物醬白JW的加祥后加工有.爬了韻⑴值號肚的例熱無趣康核生物迅顯并雌物.啦白質除謝離于典蒙膘揮怪用外，還有_麗分娶分泌到期胞外利定位于用都蛻中國懵用.邙一需更近希的冬肽而荊i一段飆些帷中列利為值號戰序如弓再砒至林1的轉建聚虬到達目的地后，疳號世存被切除.12地L⑵二桶城利用成I在niRMl先于中，出膏斷輒酸的密碣子，而不少直白用分子中含有胱蛆酹二雁鍵，有的龍可彥個，U二破做愚孤白圍的功能基困.-84（1龍通過兩小半就亂橫的強基制化野威的.有的在切除立四前脾已經形覘.正打臼j使線感步勝至現一定的空間站拘二肽他的排費在肚理合成沒疔結來時磔已經開始*核浦帶可保m加至皿牛蛆緊1?班基住的肚能，固段迷從橫睛悻中鼻排后「便開蛤折疊?三期結構的形成幾乎加曲硅合成的生止何時完成.俄白局的折費是從a的開始的.12分】《打嘮基化作用使多at變成腦擊臼.將強白中的糖普建有兩類；一類是心傅上卡冬彼植側跳上的n原子與寡聚糖轅之間構成的K-糖昔博.另一類是駐雄上民氨酸，蘇蓋醒例族上的氧原子與嘉索培植之間構也的口一0昔健.通常在中策白上發現的嘉索糖根是五黑糖*惠聚助根胞通進捏能懵的單成醉被帶到強白質上的.高爾基體能對糖蛋白選行進一曲的把怖和調整?31￡5）非樂就I男基B!界幫的小怖I絲低醒、蘇瓶睡屋基的碑蹤化】??■'咎乩酸尊的邛基化：谷氯屆和天冬斌睢的教基化?工1±J-末場西后耳核生物多及的^^修郡JftfPflSlMt遢常N末幡的需T甲Bt甲確氮或或甲限依黑以及更多的N米喇飆費般蓄艮拔除去.我棧生物學就的N末用她蓊還要提一小打WHt-獨蕃港的再修飾也時有食生.上！肛（7）H伸gtth有當省白質生物含成忖是取前體蛋白或多能白用式出需的.豌越餒白BWfi切It環為我力的話性分子*_LL殳L駕■的分喜嶂化主襄過密或注意*般觸ffaT爸集是■書"僮化功他的杳自修鼠卷騙悚?.首先金期丁*11井卻是疊自履類坯是喇類餐?芬處提地過程打下，U）醞白加類施的好H純佗L7分金浦的樨純需ti精商方面的工推I一是把修制劑從根火體枳試箍到作較小的體例，二是把睥制劑中大見的雜施潴白和其它大分子物質分離巾去.為了判斯分寓提把方注的優劣，一艦用國小押標索荷?，一是總通力的回收；二扭比活力提高的得救.分高峙化過程如下］必選擇蔭備■率富的新M生我料料?h.咬好.c.抽槌r在此濫下.跟水或低盤迎沖派，從班次為槳甲軸攝BL刑到阻攝現，d,外惠及地化.酶是生物活tt物質，在分離境化時劭須注意屎就就少11語性也莪，檢作條櫛要泡和，樂加像作一般在山51c間設行?用一系列分離蛋白質的方法，如tk析.葬電點玩淀?有機用劑分生?法撲性曲變性蟀方法從*相H裱中初步分離腳.怫后再果用喂酊足折、曷子交挽庭折.觥服過渡、親和的折、琉水星析”高效液機但造坪層析技常政普情制卻電冰技術逋一步翎化**以得到鯉的修朋品*e-結（即極晦的分寓和純化1門分】梗施是取HIHM能帕麗因此如出順過用翦的兩力福⑴我造保冊界不帔降解，攫柞葡在無曲&唧附系陵中進行，tn為海證集括力::在，掾作善仲JMfi和r全都榻作一艦在第5c間進行，基*步。包搭上施狎■串■的新群生物材料.#?'抽提及分離和飩化等.士大導桿曲兒糖操姒子的主要姑梅和阻遇近白的作用機制是什么？答.大H軒菌JLH操縱子上依次排列著啟動子.攥縱基因加三個結構基因.結構基因1H也設碼分解孔倦的B一半幾精昔IB.HlcY編碼吸收顯朝的|!-半見韜甘透性蔭.kcA編碼。一半乳褊七乙酸轉移酹.乳儲除縱子的探圾線閃lacO不偏碼任何蛋白質，它是另一位點上調節基因Inci所編碼的阻遏督白的詰合閱曲?15分】眼、墨白是一種變構強白，當細胞中有歌糖成其他誘導物的情況下，阻遏蛋直便與它們相結合,使陽遏蛋白的構部發生改變而不能結合到1"。上，于是拈錄便得以進行，從而他及收和分解?Ufi的唧披誘導產生，如果細胞中沒有免糖或其他誘導物,眼遇皈白就結合到1皿。上，從而阻止結合在啟動子上的RNA聚合睥向赭移動.使轉最不能進行.gjn乩普工A.對照一中肥耒絲轉化的大曲桿場感受態知世，應該不含有抗性.不能在含有抗生素的培養皿上生長，但現在時照一在含TT抗生雄的咯莽皿氏出苗