動物機能學實驗2實驗八藥物對離體心臟的影響編者：陳小軍【實驗原理】

蛙心離體后，用理化因素類似于兩棲類動物血漿的任氏液灌注時，在一定時間內，仍保持有節律的舒縮活動。當能影響心臟活動的藥物作用于心臟時，心臟的節律性舒縮活動將隨之改變，此外，心臟受植物性神經的支配及某些體液因素的調節和影響，因此，在灌流液中，滴加腎上腺素、乙酰膽堿及其相應的受體阻斷劑心得安和阿托品等藥品，可間接觀察神經體液因素對心臟活動的影響。【實驗目的】1.學習離體蛙心制備及灌注方法。2.觀察藥物和某些神經體液因素對心臟節律性活動的影響。【實驗材料】（一）動物

蟾蜍（二）器材

生物機能系統或BL-420生物信號采集系統，張力換能器，探針，外科剪，小手剪，燒杯，滴管，蛙心套管，蛙心夾，鐵支架，試管夾，眼科鑷，絲線，雙凹夾，蛙板，蛙足釘等。（三）藥品

任氏液，0.1％毒毛旋花紫苷K，2％的氯化鈣，1:100,000乙酰膽堿，0.5%阿托品。【實驗步驟】1.取蟾蜍1只，使頭向下，將蛙針于枕骨大孔處向前插入顱腔左右搖動，破壞腦組織，再將針插入脊椎管，以破壞脊髓，動物全身軟癱。2.仰位固定于蛙板上，先用普通剪刀將胸部皮膚剪開，再將胸部肌肉及軟骨剪去，用虹膜剪剪破心包膜暴露心肌。3.在右主動脈下穿一根線并結扎，再在左右主動脈下穿一根線。將心臟用玻璃分針向上翻至背面，將前后腔靜脈和左右肺靜脈一起結扎（注意勿扎住靜脈竇）。

4.在主動脈分支處下穿一線，打好松結，備結扎套管之用。5.提起左主動脈遠心端線，用眼科剪刀在左主動脈上靠近動脈園椎處剪一“V”形斜口，將盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主動脈；插至動脈園錐時略向后退，在心室收縮時，向心室后壁方向下插，經主動脈瓣插入心室腔（不可插入過深，以免心室壁堵住插管下口）。插管若成功進入心室、管內液面會隨著心室跳動而上下波動。用左主動脈上近心端的備用線結扎插管，將松結扎緊并固定在套管的小鉤上，以免心臟向下滑脫。用滴管吸去套管內血液，換上新鮮任氏液，以防止血塊堵塞套管。提起插管，在結扎線遠端分別剪斷左主動脈和右主動脈。輕輕提起插管，剪斷左右肺靜脈和前后腔靜脈，將心臟離體，用滴管吸凈插管內余血，加入新鮮任氏液。反復換洗數次，直至液體完全澄清。保持灌流液面高度恒定（1~2cm），即可進行實驗。【觀察與紀錄】（1）描記正常蛙心收縮曲線曲線幅度：代表心臟收縮的強度。曲線疏密：代表心跳頻率。曲線的規律性：代表心室的節律性。曲線的頂點水平：代表心室收縮的程度。曲線的基線：代表心室舒張的程度。（2）連接實驗裝置：將蛙心套管固定于鐵架臺，用帶有長線的蛙心夾在心舒期夾住心尖部，將長線連于張力換能器（薄片近斷朝上），換能器前部稍向下，以免液體流入換能器而損壞換能器。換能器連接BL-420生物信號采集系統輸入孔CH1。【軟件操作】依次選定“實驗項目”“循環實驗”“蛙心灌注”，編輯標記條，作好每一步標記。（1）記錄一段正常心臟搏動曲線后，注意觀察心博頻率與幅度。（2）滴入0.1％毒毛旋花紫苷K1～2滴，觀察心博曲線變化，并記錄結果。用任氏液沖洗三次，待頻率與幅度接近正常值，再進行下一步。（3）于灌注液內加1～2滴2％的氯化鈣，觀察心博曲線變化，并記錄結果，沖洗。（4）于灌注液內加1:100,000乙酰膽堿1～2滴，觀察心博曲線的變化，并記錄結果，沖洗。（5）于灌注液內加0.5%阿托品1～2滴，觀察心博曲線的變化，然后加入1:100,000乙酰膽堿1～2滴，觀察曲線有無改變，并與步驟7比較并記錄結果。

【注意事項】1、本實驗以青蛙心臟為好。因蟾蜍皮下腺體有強心苷樣物質，可降低對強心苷的敏感性。（在實驗可以低鈣任氏液灌注蛙心，使心臟的收縮減弱，可以提高心肌對強心甙的敏感性。）2、在整個實驗過程中應保持套管內液面高度不變，以保證心臟固定的負荷。每次加試劑不宜過多，先加1～2滴，作用不明顯時可再追加。3、在實驗過程中，基線的位置、放大倍數、描記速度應始終一致。4、本實驗試劑種類較多，忌錯用滴管造成污染。5、固定換能器時，應稍向下傾斜，以免液體流入換能器而損壞換能器。6、波