殺蟲(chóng)劑觸殺毒力測(cè)定（點(diǎn)滴法）

目前使用的殺蟲(chóng)劑大多數(shù)都具有較強(qiáng)的觸殺作用，所以殺蟲(chóng)劑的觸殺毒力測(cè)定顯的特別重要。觸殺毒力測(cè)定有藥膜法、點(diǎn)滴法、噴霧法和浸液法。室內(nèi)比較精確的觸殺毒力測(cè)定方法是點(diǎn)滴法和藥膜法。點(diǎn)滴法（topicalapplication）是將一定量農(nóng)藥丙酮液點(diǎn)滴在蟲(chóng)體的一定部位上，藥劑可自體壁進(jìn)入體內(nèi)。試驗(yàn)用具

容量瓶（10、25、50及100ml）、微量點(diǎn)滴器或毛細(xì)管微量點(diǎn)滴器、吸管、培養(yǎng)皿、燒杯、試管、濾紙、平頭鑷子、計(jì)算紙、白紙、毛筆等。測(cè)定方法

（選用玉米螟為試驗(yàn)材料）一、實(shí)驗(yàn)過(guò)程1、預(yù)備試驗(yàn)先用丙酮將供試藥劑（溴氰菊酯）配制成若干個(gè)不同濃度，選取4齡玉米螟幼蟲(chóng)若干，每個(gè)濃度用點(diǎn)滴器（或微量進(jìn)樣器）點(diǎn)滴藥液于幼蟲(chóng)的胸部背面，每頭幼蟲(chóng)點(diǎn)滴1μl(或通過(guò)標(biāo)定容量的點(diǎn)滴器），每個(gè)濃度點(diǎn)滴蟲(chóng)數(shù)不少于30頭，待藥液揮發(fā)后，把5－8頭盛于一皿中，加入少量飼料，蓋好培養(yǎng)皿，寫(xiě)好標(biāo)記，經(jīng)24小時(shí)后檢查試蟲(chóng)的生存及死亡頭數(shù)，計(jì)算其死亡率。從這些濃度中找出適合的濃度，即找出其死亡率在20％—90％之間的5—7個(gè)不同劑量的等比濃度共下一步試驗(yàn)用。

最后采用繪圖法或直線回歸方程求出LD50，并用方差分析法檢定其可靠性程度例如：供試藥劑（溴氰菊酯）對(duì)玉米螟幼蟲(chóng)觸殺LD50毒力測(cè)定結(jié)果及檢驗(yàn)。

1、溴氰菊酯對(duì)玉米螟幼蟲(chóng)觸殺結(jié)果（見(jiàn)表1）表1溴氰菊酯對(duì)玉米螟幼蟲(chóng)觸殺毒力處理劑量*μg／頭×10劑量對(duì)數(shù)㏒x參試蟲(chóng)數(shù)（頭）處理24小時(shí)后死亡情況校正死亡率機(jī)率值（y）死亡蟲(chóng)數(shù)（頭）平均死亡率（％）校正死亡率（％）8.7517.533.570.0140.0210.0280.0對(duì)照0.9421.2431.5441.8452.1462.3222.447丙酮124124124124124123124124102348567589102211.318.538.745.260.572.382.31.69.917.137.744.359.971.9823.74.04.64.85.35.65.9＊除理劑量單位，還可以用濃度（ppm）作單位，則所求出的單位是LC50。

死死亡亡百率分率劑量數(shù)值劑量數(shù)值換算成對(duì)數(shù)值非對(duì)稱(chēng)“S”型曲線對(duì)稱(chēng)型“S”曲線換成機(jī)(LD50)數(shù)值轉(zhuǎn)換的原因率值劑量值對(duì)數(shù)值直線二、繪圖法求LD50

此方法以劑量對(duì)數(shù)作橫坐標(biāo)，機(jī)率值作縱坐標(biāo)，繪制直角坐標(biāo)系。在直角坐標(biāo)系中找出該次試驗(yàn)的坐標(biāo)點(diǎn)，并用一直線連接起來(lái)，該直線稱(chēng)“劑量對(duì)數(shù)—死亡率機(jī)率直線”。從機(jī)率值“5”處引一與橫坐標(biāo)平行的直線與“劑量對(duì)數(shù)—死亡率機(jī)率直線”相交，以相交點(diǎn)引一線垂直于橫軸，此垂線與橫坐標(biāo)的交點(diǎn)，即為溴氰菊酯對(duì)玉米螟LD50的劑量對(duì)數(shù)值，再查反對(duì)數(shù)表，即為L(zhǎng)D50值（見(jiàn)下圖）因?yàn)椹SX＝1.86

所以X＝72

因?yàn)椹SX×10

所以X＝72／10＝7.2μg/頭三、劑量對(duì)數(shù)機(jī)率值直線的驗(yàn)證及LD50的計(jì)算1）求直線回歸方程y=a+bx根據(jù)表2∑x=12.489∑y=33.9∑x2=24.2051∑xy=63.2301

—x=∑xn=12.4897=1.784=—y===∑yn33.974.843b==∑xy－∑x?∑yn∑x2

－（∑x）2n63.2301－12.489×33.9724.2051－

（12.489）271.4289=a＝—y=－bx4.843－1.4289×1.784＝2.2938

將a與b代入y=a＋bx公式即得該試驗(yàn)毒力回歸直線方程y＝2.2938+1.4289x。

2)求LD50

（用回歸直線計(jì)算）

因?yàn)楫?dāng)機(jī)率y＝5時(shí)即為50％的死亡率，所以將y＝5代入回歸方程中，即可求出LD50

由y＝2.2938+1.4289x

得5＝2.2938+1.4289xX=5－2.29381.4298=1.8939∵㏒x＝1.8939X原劑量對(duì)數(shù)×10∴LD50＝78.310＝7.83μg/頭查反對(duì)數(shù)表得：x=78.3列方差分析表如下

此回歸方程的回歸效果達(dá)倒及顯著的水平，符合實(shí)際情況，所求LD50

=7.8μg/頭可靠。4、LD50標(biāo)準(zhǔn)誤差和置信區(qū)間（可靠范圍）上面所求出的LD50

是人工飼養(yǎng)的玉米螟幼蟲(chóng)LD50，其值往往受到所取樣本影響，與昆蟲(chóng)的群體有一定的差距，即所求的LD50不一定代表群體的實(shí)際情況。因此，還需計(jì)算LD50的標(biāo)準(zhǔn)誤差以及置信區(qū)間（可能的實(shí)際所在的范圍）。變異來(lái)源平方和自由度均方F值回歸剩余3.9260.051153.9260.0102384.90F=384.90>F0.01(1.5)1）LD50標(biāo)準(zhǔn)誤差表6－3劑量對(duì)數(shù)X試驗(yàn)蟲(chóng)數(shù)n機(jī)率值Y權(quán)重系數(shù)*wnwnwxnwx20.9421.2431.5441.8452.1462.3222.4771241241241241241241243.63984.06994.50004.93015.36025.61205.79030.3020.4710.5810.6340.6010.5580.530∑37.4558.4072.0478.6274.5269.1962.37452.5935.2872.59111.23145.04159.93160.66152.62837.3533.2390.23171.74267.62343.19373.05373.461652.52*w（權(quán)重系數(shù)）—查w—表，即用機(jī)率（y）查之如y=3.639查w—表得0.302，其余類(lèi)推。標(biāo)準(zhǔn)誤差：Sm=—Vm—Vm=1b2{}1∑nw+∑nw(m－—x)2(x－—x)2其中：Sm—LD50

標(biāo)準(zhǔn)誤—Vm—LD50

的變量m—LD50

對(duì)數(shù)值b—LD50

回歸式中的坡度（或回歸系數(shù)）—x—平均致死劑量，為對(duì)數(shù)值—x∑mwx∑mw＝837.35452.59＝＝1.8501注意：平均致死劑量（1.8501）不同于致死中量LD50＝m=1.8939(為對(duì)數(shù)值)∑nw(x－－x)2

＝∑nwx2

－（∑nwx）2∑nwx1652.52－（837.35）2452.59==1652.52－1549.21=103.31Vm=b21{∑nw1+－x(m－

)2∑nw－x(x－

)2｝＝0.001Sm=Vm＝0.03280.001＝2）置信區(qū)間當(dāng)機(jī)率P＝0.05，群體自由度df＝∞時(shí)，查t表：t0.05=1.96，因此，當(dāng)LD505％最小顯著性差異（LSD）0.05＝t0.05（df＝∞）×Sm=1.96×0