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文檔簡介
實驗二實驗動物的編號標記及注射方法編號標記通常是動物實驗開展時需要進行的第一項工作。編號標記的目的是使個體易于識別,便于實驗者觀察每個動物的變化,并為下一步進行的分組工作做好準備。無論何種編號方法,良好的標記方法都應滿足號碼清晰、耐久、簡便和適用的要求。一實驗目的和要求學習和掌握實驗動物的編號標記和注射方法。二實驗材料和用具小鼠、墨水(紅、黑色)、毛筆、注射器、鑷子、消毒棉球、生理鹽水1哺乳動物的標記(1)臨時標記A染色法染色法是用化學試劑在動物身體明顯部位如被毛、四肢等處進行涂染,或用不同顏色等來區分各組動物,是實驗室最常用、最容易掌握的方法。常用的標記液有:紅色:0.5%中性紅或堿性品紅溶液;黃色:3%~5%苦味酸溶液;咖啡色:2%硝酸銀溶液(涂后需光照10分鐘);黑色:煤焦油酒精溶液。
左前腿上部為1,左腰部為2,左后腿為3,頭部為4,背部為5,尾基部為6,右側從前至后依次為7、8、9。用黑色表示個位數,紅色表示十位數。染色法多用于實驗周期較短,動物數量不多的情況。這種方法雖簡單,動物無痛無損傷,但由于動物之間相互摩擦、舔毛,尿、水浸漬被毛或脫毛,或因日久顏色自行消退等原因,不宜用于長期的實驗。此法主要用于大鼠、小鼠、豚鼠和白色的家兔。(2)半永久標記A掛耳標簽法掛耳標簽法可用來標記多種動物。市售的耳標簽一般是由塑料、鋁或鋼片制成。使用耳標簽時必須仔細挑選大小合適的耳標簽。通常使用塑料制品。B戴項圈法首先,將號碼沖壓在圓形或方形金屬牌上。金屬牌常用鋁板或不銹鋼制作,長期使用不生銹。然后將標有號碼的金屬薄片固定在拴動物的皮帶圈上,將此圈固定在動物頸部。(3)永久性標記A烙印法烙印法是用刺號鉗將號碼烙壓在動物無體毛或明顯的部位,如耳朵、面鼻部和四肢部位等。另外,可用燒紅的鐵烙在動物體表明顯的部位,燒烙出號碼,然后用酒精為溶劑的染料涂抹,以增加號碼的明顯性。此類方法應注意烙號部位的污染和預防感染。B打耳孔法打耳孔法是專門用于動物編號的耳孔機直接在動物耳朵上打孔或打成缺口編號的方法,用剪刀將耳緣剪缺口也可代替此方法。用打孔的位置和孔的數量來標記。一般習慣在耳緣內側打小孔,按前、中、后分別表示為1、2、3號,在耳緣部打成一缺口,則分別表示4、5、6號,打成雙缺口則表示7、8、9號。左耳表示個位數,右耳表示十位數。在加上左耳中部打一孔表示100,右耳中部打一孔表示200,按此法可編至400號。打孔法應注意防治孔口愈合,可使用滑石粉涂抹在打孔局部。耳號鉗C剪指法小鼠可用此法,將小鼠左右前肢的腳趾按不同排列代表不同的數字。一般習慣從左向右第一趾為1,第二趾為2,第三趾為4,第四趾為7。每一、二趾同時剪去為3號,若第一、四趾同時剪去為8號,一次類推。右腳表示個位數,左腳則表示十位數,按此法可剪成1-99號。若配合耳號標記,左耳表示千位,右耳表示百位數可編至4999號。剪指編號方法的有點是各種毛色的小鼠都能使用,避免了黑色小鼠用顏色涂擦被毛后不易分辨的缺點。缺點:在一些長期實驗中,若小鼠腳趾剪去太少,實驗后期小鼠長出新生腳趾會不易區分;若腳趾剪去太多,則動物容易因失血過多導致健康狀況不良。一般剪完后用硝酸銀棉簽燒烙血管止血。E掛牌法這是一種替代方法。不在動物身上做標記,而在籠上掛牌作為編號。使用時應特別注意不要混亂。2兩棲類和爬行類動物的標記(1)剪趾法肢體正常發育的兩棲類和爬行類動物的標記大多采用剪趾法,這是一種有效的永久性標記方法。通常若每只腳只剪除一趾,對動物個體的行為和生存沒有影響。但對哪些趾有特殊功能的動物不應該實施剪趾術。(2)除鱗甲法對蛇來說除掉尾下鱗甲是一個較好的永久性標記方法。用小號外科剪刀或采取灼燒法除掉鱗片(為防止鱗甲的再生必須除掉其皮的下層)。還可以采用電灼燒法,在皮膚上灼印數字或字母,為防鱗甲再生也必須灼傷皮膚的深層。(3)紋身染色法對兩棲類和爬行類動物也可以采用紋身染色法進行標記。標記時只能使用沒有毒性作用的色素、固定劑及溶劑制成的油漆,不能使用普通油漆,否則會造成動物死亡。(4)剪殼法對龜類動物可采用在其背甲邊緣盾板上剪缺口或鉆孔進行標記。標記時在背甲邊緣盾板上打小孔,按前、中、后分別表示1、2、3號,在背甲盾板的邊緣部打成一缺口,按前、中、后分別表示4、5、6號,如打成雙缺口則表示7、8、9號。右邊表示個位數,左邊表示十位數。打孔時使用滑石粉涂抹在打孔局部以防止孔口愈合。按此法可編至99號。3禽鳥類的標記(1)掛腿圈法禽鳥類可用金屬或塑料腿圈進行標記。首先將號碼沖壓在圓形或方形金屬牌上,金屬牌常用不繡鋼的鋁板制作,目前也有市售打好號碼和記號的鋁制牌;然后將金屬薄片固定在拴腿的皮帶圈上,將此圈固定在禽鳥類腿的上部。此種方法簡便、使用。(2)染色法對禽鳥類來說,可用無毒漆或染料進行羽毛染色來標記。但這種方法只能保持到顏色消退或鳥類換羽,一般不常用。(3)戴項圈法對頸部較長的禽鳥類來說,可配戴合適的塑料項圈或項帶進行標記。(4)穿鼻法常用鼻鞍或鼻盤標記水禽。用單根尼龍絲或金屬絲穿過鼻孔將印有號碼的塑料鼻鞍或鼻盤固定。(二)注射方法注射方法是兩種動物給藥方法之一。1注射器的準備與消毒(1)選擇大小適當的注射器,先吸入清水,試其是否漏水,漏水的注射器不能使用,因其注射量不準確,而且若注射材料為病原菌,則會污染環境。(2)消毒時將筒心從針筒中拔出,用一塊紗布先包針筒,后包筒心,并使兩者在紗布內的方向一致,包好后,置煮沸消毒器中。選好的針頭包以紗布,置煮沸消毒器之另一端。同時放入鑷子一把,加入自來水,以淹沒注射器為度,煮沸消毒10分鐘。(3)消毒完畢后,用鑷子取出注射器,置筒心于針筒中,并將針頭牢固地裝于注射器的針嘴上,使針頭的斜面與針筒上的刻度在一條直線上。(4)吸入注射材料,并將注射器內的空氣排盡,若注射材料具有傳染性,則排氣時應以消毒棉花包住針頭,以免傳染材料外溢而污染環境。(5)準備注射。2注射方法的分類注射法分為:皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、腦膜下注射、腦內注射、胸腔內注射、靜脈注射、腰椎內注射、關節腔注射和心內注射等。(1)皮下注射皮下注射較為簡單,易于掌握,一般選擇皮膚較薄,皮下脂肪少的部位,如頸背部、復側或后腿、股內側等部位注射。注射時,用左手拇指和食指輕輕提起動物皮膚,右手持注射器,將注射針測如皮下,若針頭容易擺動則證明針頭已在皮下,推送藥液,緩慢拔出注射針,稍微用手指壓片刻針刺部位,防止藥物外漏。皮下注射的部位:小鼠選頸背部皮膚;大鼠選背部或側下腹部;豚鼠選大腿內側、背部或肩部等皮下脂肪少的部位;兔選背部或耳根部;貓、犬選大腿外側。(2)肌肉注射肌肉注射比皮下和腹腔注射用得較少,但當給當給動物注射不溶于水而混懸于油或其它溶劑中的藥物時,常采用肌肉注射。做肌肉注射時應選擇肌肉豐滿、無大血管通過的部位,一般采用臀部、股部、肩胛部及胸部(雞)。注射時先固定好動物,右手持注射器使之與肌肉成60°,一次斜刺入肌肉中,回抽一下針栓,確認無血后可注射藥物,小動物無需回抽針栓;注射完畢后用手指在注射部位輕輕按壓片刻即可。(3)皮內注射皮內注射是將藥液注入皮膚的表皮和真皮之間,可用于觀察皮膚血管的通透性變化或觀察皮內反應,多用于接種或過敏實驗等。將注射部位的被毛去除,酒精棉球消毒后。用左手將皮膚捏成皺襞,右手持帶4號針頭的注射器將針頭與皮膚呈30°,針頭的橫斷面朝上,緊貼皮膚皮層刺入皮內,然后再向上挑起再稍刺入即可注射藥物。注射時會感到有很大阻力,注射后可見皮膚表面隆起一丘疹狀的小泡,同時因注射部位局部缺血而呈蒼白色,停留片刻再拔出針頭,以免藥液露出。如果小泡不很快小時,表明藥液確實注入在皮內;如很快消失,則可能注在皮下,應更換部位重新注射。大鼠、小鼠、地鼠可在背部、尾根部或趾部注射,豚鼠、兔在耳朵;犬、貓較少進行皮內注射。(4)腹腔注射腹腔注射的部位為下腹部腹中線左右兩側1cm處,為避免傷及內臟,抓取固定動物時應使頭稍向后低,使內臟移向上腹。腹腔注射時,注射部位消毒后,右手持注射器在注射位置將針頭刺入皮膚,針頭到達皮下后,再稍向前進針,后以約45°刺入腹腔,針尖通過腹腔后抵抗力消失,回抽針栓,如無血或尿液,則表明進入腹腔方可注入藥液。大鼠、小鼠、豚鼠腹腔注射時一般以左手固定動物,右手注射即可;對體重較大的大鼠或豚鼠,可由一人固定動物,暴露腹部,另一人進行注射操作;家兔、貓、犬等大動物需由助手固定好動物。為避免傷及內臟,應將動物處于頭低位,使內臟移向上腹。×√(4)靜脈注射A大小鼠一般采用尾靜脈注射大鼠、小鼠的尾部有四根明顯的血管,其中腹側的一根為動脈,背部的一根為靜脈,兩側還各有一根靜脈。由于兩側的靜脈比較容易固定故常作為靜脈注射的部位。操作時先將動物固定在鼠筒內或扣在燒杯中,使尾巴露出,用酒精或二甲苯涂擦尾部,或將鼠尾在50‘C熱水中浸泡半分鐘使血管擴張。以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側,使靜脈充盈,用中指從下面托起尾巴,以無名指和小指夾住尾巴的末梢,右手持注射器,使針頭與靜脈平行,從距尾尖約2~3厘米處進針,此處皮薄易于刺入,先緩注少量藥液,如無阻力,表示針頭已進入靜脈,可繼續注入。如注射局部隆起、發白,且推入阻力較大,表明針頭未刺入靜脈,應拔出針頭,重新向尾根方向移動針頭,再次刺入,直至無皮丘出現,確認刺入血管內方可注入藥液。注射完畢后把尾部向注射側彎曲以止血。如需反復注射,應盡可能從末端開始,以后向尾根部方向移動注射。B兔一般采用耳緣靜脈注射因兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動脈,耳外緣為靜脈。內緣靜脈深不易固定,故不用。外緣靜脈淺易固定,常用。
先拔去注射部位的被毛,用手指彈動或輕揉兔耳,使靜脈充盈,左手食指和中指夾住靜脈的近端,拇指繃緊靜脈的遠端,無名指及小指墊在下面,右手持注射器盡量從靜脈的遠端刺入,移動拇指于針頭上以固定針頭,放開食指和中指,將藥液注入,然后拔出針頭,用手壓迫針眼片刻。C犬、貓靜脈注射犬、貓的前肢內側皮下靜脈比較容易固定,故用于靜脈注射。注射時由助手將動物固定,去除注射部位被毛、消毒,助手將注射部位用手握緊,使靜脈充盈,操作者持帶針頭的注射器與血管平行刺入靜脈,回抽見血后放開壓迫,操作者一手固定針頭,一手慢慢推注射器注入藥液。D猴靜脈注射常選用前肢橈靜脈或后肢隱靜脈進行注射,注射方法同犬。E豬的靜脈注射常選用耳大靜脈進行,注射方法同兔。F雞的靜脈注射選取翼下靜脈進行注射。注
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