發(fā)育生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教案實(shí)驗(yàn)一 模式生物蛙、海膽胚胎發(fā)育各階段切片觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?shí)驗(yàn)原理在多種動(dòng)物中，胚胎發(fā)育經(jīng)歷受精、桑椹胚、囊胚、原腸時(shí)期、神經(jīng)時(shí)期，不同時(shí)期具有不同的特點(diǎn)，在發(fā)育中其形態(tài)和構(gòu)造經(jīng)歷明顯的階段性變化。三、試劑與材料實(shí)驗(yàn)試劑香柏油、顯微鏡實(shí)驗(yàn)材料模式生物切片、裝片（蛙、海膽四、實(shí)驗(yàn)步驟五、實(shí)驗(yàn)作業(yè)記錄形態(tài)學(xué)變化。實(shí)驗(yàn)二 模式生物鯽魚(yú)、雞胚胎發(fā)育各階段切片觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?shí)驗(yàn)原理在多種動(dòng)物中，胚胎發(fā)育經(jīng)歷受精、桑椹胚、囊胚、原腸時(shí)期、神經(jīng)時(shí)期，不同時(shí)期具有不同的特點(diǎn)，在發(fā)育中其形態(tài)和構(gòu)造經(jīng)歷明顯的階段性變化。三、試劑與材料實(shí)驗(yàn)試劑香柏油、顯微鏡實(shí)驗(yàn)材料模式生物切片、裝片（鯽魚(yú)、雞四、實(shí)驗(yàn)步驟五、實(shí)驗(yàn)作業(yè)記錄形態(tài)學(xué)變化。實(shí)驗(yàn)三 兩棲類變態(tài)過(guò)程的觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?shí)驗(yàn)原理出來(lái)，從而結(jié)束幼蟲(chóng)期，建成成體結(jié)構(gòu)，這種現(xiàn)象統(tǒng)稱為變態(tài)。三、試劑與材料實(shí)驗(yàn)試劑何爾夫列他溶液（0.35g0.005g0.01g0.02g100mL）實(shí)驗(yàn)材料五、實(shí)驗(yàn)作業(yè)記錄蛙變態(tài)過(guò)程中的形態(tài)學(xué)變化。[附]蛙的飼養(yǎng)方法卵和蝌蚪的培養(yǎng)最好用潔凈的自來(lái)水5-6（氧化鈉氯化鉀0.005，二氯化鈣0.01，碳酸氫鈉0.02，蒸餾水100m，這樣可以增加胚胎和蝌蚪發(fā)育所必需的鈉、鈣、鉀離子。培養(yǎng)水要多而清潔，否則會(huì)因缺氧而致死。3-5d換一次水較及小蛙為食。實(shí)驗(yàn)四鳥(niǎo)類胚胎發(fā)育的觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?shí)驗(yàn)原理鳥(niǎo)類胚胎發(fā)育是典型的體外發(fā)育，利用人工孵化的家禽，可以方便觀察其發(fā)育過(guò)程。雞胚胎發(fā)育可分為兩個(gè)階段：成蛋階段和成雛階段。胚胎在卵形成過(guò)程中的發(fā)育即母體內(nèi)的發(fā)育，也即是成蛋階段的發(fā)育。這個(gè)階段的發(fā)育過(guò)程是，受精卵+卵裂+囊+圓盤狀體即為胚盤，當(dāng)卵排出體外，因溫度下降，胚胎生長(zhǎng)發(fā)育隨即停止。胚胎在孵化過(guò)程中的發(fā)育卵排出體外后，保存在18℃以下的環(huán)境中，胚胎發(fā)育基本處于靜止?fàn)顟B(tài)。當(dāng)人孵后，胚胎即開(kāi)始發(fā)育。胚胎在孵化過(guò)程中發(fā)育的時(shí)期稱孵化期。雞的孵化期為21天。漸形成各種腺體、器官、骨骼、肌肉、皮膚、羽毛和喙，最后形成新的機(jī)體—雛雞。雞的種蛋四、實(shí)驗(yàn)步驟觀察比較種蛋（受精）與非種蛋（未受精）內(nèi)部結(jié)構(gòu)的差異。觀看教學(xué)片，熟悉雞的胚胎發(fā)育過(guò)程。2.人工孵化種蛋，記錄雞的孵化進(jìn)程及特征。五、實(shí)驗(yàn)作業(yè)拍照記錄雞孵化進(jìn)程中的特征變化。[附]雞胚發(fā)育進(jìn)程及特征胚齡：蛋黃表面有一顆顏色稍深，四周稍亮的圓點(diǎn)，俗稱“魚(yú)眼珠”或白光珠。”。胚齡：卵黃囊血管的形狀象靜止的蚊子，俗稱“蚊蟲(chóng)珠胚齡：蛋轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)，卵黃不易跟隨著轉(zhuǎn)動(dòng)，俗稱為“釘殼胚齡：明顯看到黑色的眼點(diǎn)，谷稱“起珠（若為5羊水。胚齡：胚胎形似“電話筒看到羊毛。胚齡：胚胎較易看到，象在羊水中浮游一樣，俗稱“浮蛋轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)二邊卵黃不易晃動(dòng)，俗稱為“邊口發(fā)硬胚齡：血管開(kāi)始加粗，血管顏色開(kāi)始加深，解剖背部出現(xiàn)絨毛，腺胃明顯可辨。胚齡：血管加粗、顏色逐漸加深。解剖身軀覆蓋絨毛。毛，跖、趾出現(xiàn)角質(zhì)鱗片原基。胚胎全身覆蓋絨毛，頭向氣室，胚胎開(kāi)始改變橫著的位置，逐漸與蛋長(zhǎng)軸平行。合。體內(nèi)外的器官大體上部形成了。胚齡：黑影繼續(xù)燕大，解剖冠和肉髯明顯，絕大部分蛋自己進(jìn)入羊膜腔。胚齡：以小頭對(duì)準(zhǔn)光源，再看不到發(fā)亮的部分，俗稱“封門大、眼、頭日益顯小，兩腿緊搶頭部。喙向氣室。胚齡：氣室向一方傾斜，這是胚胎轉(zhuǎn)身的緣故，俗稱為“斜口右翼下，眼開(kāi)始睜開(kāi)。胚齡：喙進(jìn)氣室，開(kāi)始呼吸，頸、翅突入氣室，頭埋右翼下，兩腿彎曲朝頭部，呈搶頭部的黑影閃動(dòng)，俗稱“閃毛20.5-21胚齡：出殼。雞的人工孵化（種蛋）1-4天為胚胎生長(zhǎng)階段；20-21外界條件將是保證胚胎正常發(fā)育，并使孵化獲得成功的關(guān)鍵因素。溫度：37.5°C-38.6°C；19-2136.1°C-37.5°C。間，同時(shí)胚胎發(fā)育遲緩并帶來(lái)死亡。濕度：1-18天相對(duì)濕40%-60%；19-2165%-75%通風(fēng)換氣：通風(fēng)換氣的主要目的是幫助胚蛋中的胚胎與外界進(jìn)行氣體交換和熱能交換，同時(shí)調(diào)節(jié)機(jī)內(nèi)的溫度。換量也不斷增加。因此除胚胎發(fā)育初期外，胚胎的氣體交換都是由通風(fēng)換氣解決。通風(fēng)換氣還與溫度、濕度有密切的關(guān)系。通風(fēng)良好時(shí)，空氣能充分流通還能與外界不斷的進(jìn)行熱能交換。溫度、相對(duì)濕度都可保證。翻蛋：連。胚蛋放置位置必須適當(dāng)，在1-182小時(shí)翻蛋一次，翻蛋角度以90度為宜。18天時(shí)，將種蛋移到出雛盤上叫落盤。這時(shí)胚胎發(fā)育完成，在20-21天時(shí)（即雞蛋的大頭部分，健壯的雛雞先把蛋殼啄開(kāi)一個(gè)小孔雛雞的頭便可脫殼而出，而后身體也逐漸自行掙脫出來(lái)。1胚齡 2胚齡 3胚齡4胚齡 5胚齡 6胚齡7胚齡 8胚齡 9胚齡10胚齡 11胚齡 12胚齡13胚齡 14胚齡 15胚齡16胚齡 17胚齡 18胚齡19胚齡 20胚齡 20.5胚齡替補(bǔ)實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)五 精子形態(tài)觀察及體外獲能實(shí)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖煜げ溉轭惥拥男螒B(tài)結(jié)構(gòu)。二、實(shí)驗(yàn)原理唾液酸、吸收抗原、表面ATP酶等許多成分發(fā)生變化，負(fù)電荷增加，與凝集素的結(jié)合力也Austin1951年發(fā)現(xiàn)兔子和大白鼠直接排出的精子不能使卵受精，必須在生殖道中停留成獲能，卵泡液、輸卵管分泌物、血清、房水等多種液體都可使精子獲能pCa2濃度等環(huán)1活Hi鈣pH升高，從而誘發(fā)精子獲能。三、試劑與材料實(shí)驗(yàn)試劑IVF液（NaCl5.803g/L，KCl0.201g/L，NaHCO2.106g/L，CaCl·2HO0.264g/L，丙3 2 2酮酸鈉0.055g/L，60%乳酸鈉3.5mL，葡萄糖1.000g/L，青霉素G鉀或鈉鹽0.063g/L，硫酸0.050g/L

HPO12HO0.056g/MgCl6HO0.102g/，牛血清白蛋白（BSA）實(shí)驗(yàn)材料雄性小鼠四、實(shí)驗(yàn)步驟斷頸處死雄性小鼠。

2 4 2 2 2打開(kāi)腹腔，剪取附睪尾（盡可能除去脂肪，將每個(gè)附睪尾放入已在35%C22h2mlIVF液（30mg/ml中。將附睪尾剪成幾段，用鑷子輕輕擠壓之，使精子擠入培養(yǎng)液中，去掉附睪尾。r/min5min2mlIVF液重懸。37℃、5%CO21.5h，使之獲能。鏡檢，觀察獲能精子的運(yùn)動(dòng)。五、實(shí)驗(yàn)作業(yè)觀察比較精子在獲能前后運(yùn)動(dòng)形態(tài)和速度的變化。實(shí)驗(yàn)六 植物組織培養(yǎng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?shí)驗(yàn)原理生物體的每一個(gè)細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)需的全部基因。三、試劑與材料實(shí)驗(yàn)試劑MS培養(yǎng)基、無(wú)菌水，升汞、酒精、次氯酸實(shí)驗(yàn)材料銀杏枝葉四、實(shí)驗(yàn)步驟（一)培養(yǎng)基的配制1.母液配制母液分大量元素、微量元素、鐵鹽及有機(jī)物質(zhì)四類。2.培養(yǎng)基的配制與分裝3.培養(yǎng)基的滅菌(二)取材、消毒與接種（1）先將剪下的枝條清洗干凈，選擇新鮮的花柄、嫩梢和帶腋芽的莖段作為外植體，將外植體放在自來(lái)水下沖洗12h,以沖洗掉大的土壤顆粒。75%酒精表面消毒30S0.1%15min4~5次。將消毒后的外植體放入消毒過(guò)的培養(yǎng)皿上，在無(wú)菌條件下切成0.4~0.5cmMS三個(gè)芽，并用封口膜封好。(三)外植體的培養(yǎng)接種后的外植體放入用75%酒精消毒后的干凈的光照培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)條件為：溫度27℃，光照周期為光照12h/d+12h/d，培養(yǎng)基的pH5.8導(dǎo)。全部接種工作都是在嚴(yán)格無(wú)菌條件下進(jìn)行的,所以要特別認(rèn)真、仔細(xì)、以防雜菌污染。(四) 兩周后觀察愈傷組織的誘導(dǎo)并進(jìn)行生根生芽誘五、實(shí)驗(yàn)作業(yè)觀察植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)物在培養(yǎng)中的生長(zhǎng)情況。觀察植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)物有無(wú)污染，分析原因？以MS為例，試說(shuō)明MS培養(yǎng)基中各成分各有何作用。實(shí)驗(yàn)七 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)果實(shí)發(fā)育的影響一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,4-D、萘乙酸對(duì)無(wú)籽果實(shí)形成的誘導(dǎo)作用。二、實(shí)驗(yàn)原理植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑2,4-D、萘乙酸（NAA）等，在適當(dāng)?shù)臐舛认履苷T導(dǎo)無(wú)籽果實(shí)形成。適當(dāng)濃度的乙烯利能促進(jìn)果實(shí)成熟。三、試劑與材料實(shí)驗(yàn)試劑20mg/L2,4-（用少許1mmol/LNaOH溶解2,4-500mg/LNA（用熱水或少量95乙醇溶解NA，再用蒸餾水定容40乙烯利實(shí)驗(yàn)材料盆栽番茄、辣椒幼苗，香蕉（或大蕉、柿子、芒果等）四、實(shí)驗(yàn)步驟無(wú)籽果實(shí)的誘導(dǎo)形成（1）2,4-D誘導(dǎo)無(wú)籽果實(shí)2-320mg/L2,4-D觀察果