電話：400-998-2324郵箱：service_uplc_ms@163.com網址：本產品僅供科學研究使用！請勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測等用途！-上海液質檢測技術有限公司第第頁Ca++Mg++-ATP酶活性檢測試劑盒說明書貨號：UPLC-MS-4574規格：50T/24S

可見分光光度法產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系工作人員。試劑名稱規格保存條件試劑一液體30mL×1瓶2-8℃保存試劑二液體4mL×1瓶2-8℃保存試劑三粉劑×2支-20℃保存試劑四液體2mL×1瓶2-8℃保存試劑五液體3mL×1瓶2-8℃保存試劑六粉劑×1瓶2-8℃保存試劑七粉劑×1瓶2-8℃保存試劑八液體15mL×1瓶常溫保存標準品液體1mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、試劑三：臨用前取1支加入1mL蒸餾水充分混勻待用；現用現配。用不完的試劑-20℃分裝保存一周。215mL2-8℃315mL2-8℃4200.1mL1.9mL0.5μmol/mL5=2:1:1:1注意：配試劑最好用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。產品說明：Ca++Mg++-ATP酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中，可催化ATP水解生成ADP和無機磷。根據Ca++Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及無機磷，通過測定無機磷的量來確定ATP酶活性高低。ADP+PiCa++Mg++-ATPaseMolybdenumBluePhosphomolybdateBlue（660nm）2-31mL/操作步驟：一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）5001mL功率0w3103080g410n測。0.1g1mL8000g4℃10min血清漿二、測定步驟1、分光光度計預熱30min以上，調節波長至660nm，蒸餾水調零。2、酶促反應（在EP管中加入下列試劑）試劑名稱對照管測定管試劑一（μL）13090試劑二（μL）8080試劑三（μL）4040試劑四（μL）-40樣本（μL）-200混勻，37℃（哺乳動物）或25℃（其他物種）準確水浴10min試劑五（μL）5050樣本（μL）200-混勻，4000g，常溫離心10min，取上清液3、定磷（1.5mLEP管中依次加入下列試劑）試劑名稱空白管標準管對照管測定管0.5μmol/mL標準磷應用液（μL）-100--上清液（μL）--100100蒸餾水（μL）100定磷試劑（μL）1000100010001000混勻，40℃水浴10min，冷卻至室溫，在660nm處測定吸光值。計算ΔA測定=A測定管-A對照管，ΔA標準=A標準管-A空白管。每個測定管需設一個對照管，標準管和空白管只需測1-2次。三、Ca++Mg++-ATPase活力的計算1、血清（漿）Ca++Mg++-ATPase活力的計算：定義：規定每小時每毫升血清（漿）中Ca++Mg++-ATP酶分解ATP產生1μmol無機磷的量為一個酶活力單位。Ca++Mg++-ATP酶活力(U/mL)=C標準管×ΔA測定÷ΔA標準×V總÷V樣÷T測定2Ca++Mg++-ATPase定義：規定每小時每毫克組織蛋白中Ca++Mg++-ATP酶分解ATP產生1μmol無機磷的量為一個酶活力單位。Ca++Mg++-ATP酶活力(U/mgprot)=C標準管×ΔA測定÷ΔA標準×V總÷（Cpr×V樣）÷T=7.5×（ΔA測定÷ΔA標準÷Cpr定義：規定每小時每克組織中Ca++Mg++-ATP酶分解ATP產生1μmol無機磷的量為一個酶活力單位。Ca++Mg++-ATP酶活力(U/g質量)=C標準管×ΔA測定÷ΔA標準×V總÷(V樣÷V樣總×W)÷T=7.5×ΔA測定÷ΔA標準÷W定義：規定每小時每1萬個細菌或細胞中Ca++Mg++-ATP酶分解ATP產生1μmol無機磷的量為一個酶活力單位。Ca++Mg++-ATP酶活力(U/104cell)=C標準管×ΔA測定÷ΔA標準×V總÷(V樣÷V樣總×500)÷T=0.015×ΔA測定÷ΔA標準Cmg/mL；Wg；500500注意事項：1、由