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文檔簡介
第十三章肝功能檢驗第十三章肝功能檢驗1本章內容概要:本章教學要求:第二節肝功能試驗第一節概述
掌握:黃疸的發生機理和各型黃疸的代謝特點及實驗室鑒別診斷要點;肝功能實驗生化檢查指標的種類和重點項目的測定方法及評價。
熟悉:肝臟的生物化學功能,膽紅素代謝;各測定項目的臨床意義
了解:肝臟的基本機構;肝功能實驗項目選擇的原則。
第三節肝功能試驗選擇原則本章內容概要:本章教學要求:第二節肝功能試驗第一節概述2第一節概述肝臟結構肝臟的生化功能肝臟疾病的生化改變第一節概述肝臟結構3一、肝臟結構(一)解剖學特點雙重血液供應腹主動脈的分技肝動脈氧門靜脈營養雙重輸出管道肝靜脈代謝降解物
下腔靜脈膽道系統脂溶性物質及其代謝產物體外一、肝臟結構(一)解剖學特點雙重血液供應腹主動脈的分技肝4(二)肝臟的顯微結構特點1、組織結構2、亞細胞結構(三)細胞的再生(二)肝臟的顯微結構特點1、組織結構2、亞細胞結構(三)5二、肝臟的生物化學功能排泄功能物質代謝功能生物轉化重要生化功能二、肝臟的生物化學功能排泄功能重要生化功能6(一)排泄功能主要排泄對象:膽汁酸、膽紅素、氨1、膽汁酸代謝(1)膽汁的分泌:膽汁功能:促進脂類的消化吸收,同時能將體內某些代謝產物及生物轉化產物不斷地排入腸道隨糞便排出體外。膽汁的來源:肝膽汁膽囊膽汁十二指腸膽汁的成分:水/膽汁酸(鹽)、卵磷脂、蛋白質、脂肪酸和膽固醇(一)排泄功能主要排泄對象:膽汁酸、膽紅素、氨1、膽汁酸代謝7(2)膽汁酸生成及種類:初級膽汁酸(肝細胞)次級膽汁酸(腸道)初級游離膽汁酸初級結合膽汁酸(甘氨酸/?;撬幔┐渭売坞x膽汁酸次級結合膽汁酸(甘氨酸/?;撬幔?)膽汁酸生成及種類:初級膽汁酸(肝細胞)初級游離膽汁酸8初級膽汁酸(肝細胞)初級游離膽汁酸初級結合膽汁酸(甘氨酸/?;撬幔┠懰狴Z脫氧膽酸甘氨酸膽酸?;撬崮懰岣拾彼狴Z脫氧膽酸牛磺酸鵝脫氧膽酸次級膽汁酸(腸道)次級游離膽汁酸次級結合膽汁酸(甘氨酸/?;撬幔┟撗跄懰崾懰岣拾泵撗跄懰崤;敲撗跄懰岣拾彼崾懰崤;撬崾懰岢跫壞懼幔ǜ渭毎┏跫売坞x膽汁酸膽酸次級膽汁酸(腸道)次級9(3)膽汁酸肝腸循環:(4)膽汁酸的功能:①促進脂類消化②促進脂類吸收③抑制膽固醇從膽汁中析出沉淀游離型膽汁酸結合型膽汁酸(3)膽汁酸肝腸循環:(4)膽汁酸的功能:①促進脂類消化游離102、膽紅素代謝膽色素
尿膽素原糞膽素原尿膽素糞膽素膽綠素膽紅素未結合膽紅素(單核吞噬細胞系統如骨髓、脾臟)結合膽紅素(肝臟)膽素原2、膽紅素代謝膽色素尿膽素原未結合膽紅素(單11第十三章肝功能檢驗課件12未結合膽紅素的來源與轉運:結合膽紅素的來源與轉運與代謝:衰老紅細胞血紅蛋白未結合膽紅素的來源與轉運:結合膽紅素的來源與轉運與代謝:衰老133、血氨代謝藥物及體內含氮物質(如嘌呤、嘧啶等)來源去路相對平衡3、血氨代謝藥物及體內含氮物質(如嘌呤、嘧啶等)來源去路相對14部位——肝臟細胞鳥氨酸瓜氨酸瓜氨酸精氨酸代琥珀酸ATPAMP+PPi延胡索酸鳥氨酸精氨酸H2O尿素天門冬氨酸NH3CO2氨甲酰磷酸+H2O尿素循環部位——肝臟細胞鳥氨酸瓜氨酸瓜氨酸精氨酸代琥珀酸ATPAMP15(二)物質代謝功能1、營養物質代謝2、激素及維生素代謝(1)在蛋白質代謝中的作用(2)在氨基酸代謝中的作用(3)在糖代謝中的作用(4)在脂代謝中的作用激素的滅活主要在肝臟進行多種維生素能在肝細胞內儲存并進行轉化(二)物質代謝功能1、營養物質代謝2、激素及維生素代謝16(三)肝臟的生物轉化定義:生物轉化:
機體對許多外源性或內源性非營養物質進行化學轉變,增加其水溶性(或極性),使其易隨膽汁、尿排出,這種體內變化過程稱生物轉化(biotransformation)。
轉化對象:轉化特點:生理意義:保護機體,致癌、致畸內源性非營養物:氨、胺、膽色素、激素外源性非營養物:藥物、毒物、食品防腐劑、色素①連續性,②多樣性,③失活與活化雙重性(三)肝臟的生物轉化定義:生物轉化:機體對許多外源17三、肝臟疾病的生化改變(一)膽紅素代謝障礙(黃疸)定義:黃疸分類:黃疸和阻塞性黃疸溶血性黃疸肝細胞性黃疸高膽紅素血癥三、肝臟疾病的生化改變(一)膽紅素代謝障礙(黃疸)定義:黃疸18第十三章肝功能檢驗課件19(二)膽汁酸代謝障礙1、膽汁酸合成障礙2、膽汁酸向腸道排出障礙3.膽汁酸腸肝循環紊亂4.膽汁瘀積病變時膽汁酸代謝紊亂(二)膽汁酸代謝障礙1、膽汁酸合成障礙20(三)血漿酶異常1.肝臟合成酶類:膽堿脂酶、凝血因子、銅藍蛋白;2.肝細胞內酶:
ALT、AST
3.肝臟阻塞性疾病酶活性改變:ALP、GGT4.肝硬化疾病酶活性改變:單胺氧化酶(MAO)
(四)血漿蛋白異常(三)血漿酶異常1.肝臟合成酶類:膽堿脂酶、凝血因子、銅藍蛋21第二節肝功能試驗血清(漿)蛋白測定血清酶測定血清膽紅素測定血清膽汁酸測定血氨測定第二節肝功能試驗血清(漿)蛋白22一、血清(漿)蛋白測定(一)總蛋白、白蛋白、及白蛋白/球蛋白(A/G)比值測定1.總蛋白測定化學法(雙縮脲法)、物理法、染料結合法、電泳法染料結合法(BCG、BCP)、沉淀法2.白蛋白測定3.A/G比值一、血清(漿)蛋白測定(一)總蛋白、白蛋白、及白蛋白/球蛋白23【參考范圍】總蛋白60~80g/L白蛋白35~55g/L球蛋白:15~32g/LA/G比值:1.5~2.0/1【臨床意義】嚴重肝病時,肝臟合成分子量小的蛋白質能力降低,血中白蛋白濃度減少;而免疫系統、單核巨噬細胞合成球蛋白增加,導致A/G比值減少。嚴重則會出現A/G比值小于1,稱為A/G比值倒置,表示肝功能損害嚴重?!緟⒖挤秶靠偟鞍?0~80g/L白蛋白324(二)纖維蛋白原測定(凝血因子Ⅰ)測定方法:分為三大類①根據纖維蛋白原的生物學特性測定方法②根據纖維蛋白原理化性質而建立的測定方法。③根據纖維蛋白原免疫學特點而建立的測定方法?!緟⒖挤秶?.22~4.22g/L(熱沉淀比濁法)【臨床意義】(1)纖維蛋白原增加:①感染;②無菌炎癥;③其它。(2)纖維蛋白原減少:①嚴重的肝臟疾?。虎谄渌膊∫鹄w維蛋白原減少的疾病。(二)纖維蛋白原測定(凝血因子Ⅰ)測定方法:分為三大類25(三)甲胎蛋白(α1-fetoprotein,AFP)測定測定方法:【參考范圍】成人10~30μg/L>400μg/L作為肝癌診斷標準【臨床意義】
酶聯免疫吸附法、放射免疫分析法、斑點免疫結合法、火箭電泳放射自顯影法、酶聯火箭電泳法等(1)原發性肝細胞肝癌的診斷標準:血清AFP測定值超過400μg/L(400ng/ml)
;(2)活動性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的診斷.(三)甲胎蛋白(α1-fetoprotein,AFP)測定26(四)其它【臨床意義】肝豆狀核變性(Wilson病)和遺傳性色素沉積癥.1.銅藍蛋白測定【參考范圍】
52.9~167.7IU/L【臨床意義】
遺傳性血色素沉積癥鐵沉積2.轉鐵蛋白【原理】雙聯吡啶法【原理】銅藍蛋白具有氧化酶活性
【參考范圍】
TIBC男50~77μmol/L女54~77μmol/L轉鐵蛋白飽和度為33.0%~35.0%
(四)其它1.銅藍蛋白測定【參考范圍】52.9~1627二、血清酶測定(一)氨基轉移酶測定1.賴氏法測定ALT(1)原理:
ALT催化丙氨酸(alamine)與α-酮戊二酸(α-oxoglutarate)之間的氨基轉移反應,生成丙酮酸(pyruvate)和谷氨酸(glutamate)。
在37℃及pH7.4條件下反應30min,以2,4-二硝基苯肼終止反應,并與底物α-酮戊二酸和產物α-丙酮酸的羰基生成2,4-二硝基苯腙,苯腙在堿性條件下生成紅棕色,與505nm波長處讀取吸光度后計算活性。(2)方法評價:①賴氏法的實驗結果需與卡門分光法的結果對比后求出;②NaOH的濃度對顯色有影響;③該法的重復性差。二、血清酶測定(一)氨基轉移酶測定1.賴氏法測定ALT(1)28
卡門氏單位:1.0ml血清在25℃,340nm,反應體積3.0ml,光徑1.0cm時每分鐘測定吸光度下降0.001,即消耗4.8210-4μmolNADH為一個卡門氏單位卡門氏單位:1.0ml血清在25℃,340nm,反應體積29【參考范圍】
5~25卡門氏單位【臨床意義】(2)慢性活動性肝炎或脂肪肝:(1)肝細胞損傷的靈敏指標:ALT輕度增高(100~200IU),或屬正常范圍,【參考范圍】5~25卡門氏單位【臨床意義】(2)慢性活302.連續監測法測定ALT(1)原理:
采用酶偶聯反應,即L-丙氨酸和α-酮戊二酸在ALT作用下,生成丙酮酸和L-谷氨酸。丙酮酸再在LD作用下生成L-乳酸,同時NADH被氧化為NAD+,可在340nm處連續監測到NADH的消耗量,從而計算出ALT活性濃度。
雙試劑法:首先使血清與缺少α-酮戊二酸的底物溶液混合,37℃保溫5分鐘,將標本中所含的α-酮酸(如丙酮酸)消耗完,然后,加入α-酮戊二酸啟動ALT催化的反應,在波長340nm處連續監測吸光度下降速率。根據線性反應期吸光度下降速率(-△A/min),來計算ALT的活性。2.連續監測法測定ALT(1)原理:31(2)方法評價:①存在著兩個副反應,會使測定結果偏高;A、血清中存在的α-酮酸(如丙酮酸)能消耗NADH。B、血清中谷氨酸脫氫酶(GLDH)增高時,在有氨存在條件下,亦能消耗NADH。
②雙試劑法,因溫育期長,能有效地消除干擾反應,測定準確性高,是ALT測定的首選方法;③血清不宜反復冰凍保存,以免影響酶活性;避免使用溶血標本。(2)方法評價:323.賴氏法測定AST(1)原理:
血清中的AST可催化門冬氨酸(aspartate)與α-酮戊二酸間的氨基移換,生成草酸乙酸(oxaloacetate)和L-谷氨酸。草酸乙酸自行脫羧轉變成為丙酮酸。反應60分鐘后,加入2,4-二硝基苯肼終止反應,并與酮酸生反應生成兩種2,4-二硝基苯腙。在堿性條件下,兩種苯腙的吸收光譜曲線有差別,在505nm處差異最大,由草酸乙酸轉變成的丙酮酸所生成的苯腙呈色強度顯著大于α-酮戊二酸苯腙。據此可用比色法測定AST活性。
(2)方法評價:①賴氏法的實驗結果需與卡門分光法的結果對比后求出;②該法的重復性差:負干擾現象3.賴氏法測定AST(1)原理:(2)方法評價:33【參考范圍】
8~28卡門氏單位【臨床意義】肌炎、胸膜炎、腎炎及肺炎:血清AST也可輕度增高。心肌梗死:血清中AST活性增高各種肝病病人:血清AST的升高【參考范圍】8~28卡門氏單位【臨床意義】心肌梗死:血清344.連續監測法測定AST(1)原理:
采用酶偶聯反應,即L-門冬氨酸和α-酮戊二酸在AST作用下,生成草酰乙酸和L-谷氨酸。草酰乙酸在蘋果酸脫氫酶作用下生成L-蘋果酸,同時伴有NADH轉化為NAD+,在340nm監測NADH的轉化速率,從而計算出AST的活性。
雙試劑法:同ALT測定。4.連續監測法測定AST(1)原理:雙試劑法:同35(2)方法評價
誤差可來自內源性和(或)外源性內源性干擾主要來自血清中高濃度丙酮酸和L-谷氨酸脫氫酶(GLDH)。外源性干擾來自試劑中污染的GLDH和AST。
【參考范圍】
5~40IU/L(連續監測法測定)
【臨床意義】
見賴氏法(2)方法評價誤差可來自內源性和(或)外源性【參考范圍】36(二)ALP測定化學法連續監測法:鮑氏法金氏法皮氏法(二)ALP測定化學法連續監測法:鮑氏法金氏法皮氏法371、金氏法測定ALP(1)原理:ALP在堿性環境中作用于磷酸苯二鈉,使之水解釋放出酚和磷酸。酚在堿性溶液中與4-氨基安替比林作用,經鐵氰化鉀氧化形成紅色醌類化合物,根據紅色深淺確定ALP的活力。(2)方法評價:
磷酸苯二鈉比色法與更早的β-甘油磷酸鈉法相比具有較大的優點,如水解速度快,保溫時間較短、靈敏度較高、顯色穩定、不需去蛋白、操作簡單、快速。但與磷酸對硝基酚連續監測法相比,準確度、精密度較低;操作比較繁瑣,,靈敏度低。1、金氏法測定ALP(1)原理:(2)方法評價:磷酸38【參考范圍】成人:3~13單位,兒童:5~28單位ALP金氏單位定義是100ml血清,37℃與底物保溫15分鐘,產生1mg酚為1個金氏單位。ALP主要用于診斷肝膽和骨骼疾病【臨床意義】【參考范圍】成人:3~13單位,兒童:5~28單位392.連續監測法測定ALP(1)原理:以磷酸對硝基酚(p-nitrophenylphosphate,4-NPP)為底物,2-氨基-2-甲基-1,3-丙醇(2-amino-2-methyl-1-propanol,AMP)或二乙醇胺為磷酸基的受體。在堿性環境下,ALP催化4-NPP水解產生游離的對硝基酚,對硝基酚(p-nitrophenol,4-NP)在堿性溶液中轉變成黃色。根據405nm處吸光度增高速率來計算ALP活性單位。(1)方法評價:線性范圍可達500U/L,批內CV為2.06%~2.36%,批間CV為2.74%。2.連續監測法測定ALP(1)原理:以磷酸對硝基酚(p-40【參考范圍】男性:1~12歲<500U/L,女性:1~12歲<500U/L12~15歲<750U/L,>15歲40~150U/L,>25歲40~150U/L。【臨床意義】見金氏法【參考范圍】【臨床意義】見金氏法41(三)GGT測定法化學法(重氮反應比色法)和連續監測法。1.重氮反應比色法測定GGT原理:
【參考范圍】男性3~17U/L;女性2~13U/L2.連續監測法測定GGT(1)原理:(2)方法評價:(2)方法評價:重氮比色法活性單位:100ml血清在37℃下反應1hr,生成0.5μmol的α-苯胺為1個GGT活性單位。男性:11~50U/L;(以γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺為底物)女性:7~32U/L男性:≤40U/L;女性:≤30U/L(以γ-谷氨酰-4-硝基苯胺為底物)【參考范圍】(三)GGT測定法1.重氮反應比色法測定GGT原理:【42(四)MAO測定原理:MAO主要作用于CH2-NH2基團,在氧參與下,氧化脫氨生成相應的卞醛、氨及過氧化氫。以芐氨偶氮-β-萘酚為底物,在O2和H20參與下,MAO催化生成芐醛偶氮-β-萘酚、氨及過氧化氫,用環己烷抽提后進行比色測定。(2)方法評價:【單位定義】:1ml血清與底物在37℃孵育60分鐘,催化單胺氧化產生1nmol芐醛偶氮-β-萘酚為1個MAO單位。【參考范圍】12~40U/ml(12×103~40×103U/L)?!九R床意義】:肝硬化時,肝纖維化現象十分活躍,MAO活性明顯升高。
(四)MAO測定原理:MAO主要作用于CH2-NH43三、血清膽紅素測定重氮鹽法膽紅素氧化酶(bilirubinoxidase,BOD)法高效液相色譜法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)、導數分光光度法直接分光光度計法測定方法三、血清膽紅素測定重氮鹽法膽紅素氧化酶(bilirubin441.重氮鹽改良J-G(JendrassikandGrofmethod,J-G)法(1)原理:血清中結合膽紅素與重氮鹽反應生成偶氮膽紅素;同樣條件下,游離膽紅素需要在加速劑作用下,使游離膽紅素分子內的次級鍵斷裂,極性上升并與重氮試劑反應。反應完成后加入終止試劑,繼而加入堿性酒石酸鉀鈉使紫色偶氮試劑轉變為藍色,波長600nm下比色分析,求出血樣中總膽紅素的含量。(2)方法評價:推薦的常規方法,其方法的線性范圍較寬,在342μmol/L(200mg/L)濃度下有較好的準確性和精確性,高濃度時準確性和精確性降低。因此,建議濃度過高時減少血樣用量測定。1.重氮鹽改良J-G(JendrassikandGrof45【臨床意義】【參考范圍】
黃疸的鑒別診斷總膽紅素:5.1~19.0μmol/L(0.3~1.1mg/dL)直接膽紅素:1.71~6.8μmol/L(0.1~0.4mg/dL)【臨床意義】【參考范圍】黃疸的鑒別診斷總膽紅462.膽紅素BOD測定法(1)原理:BOD在不同pH條件下催化不同組份的膽紅素氧化生成膽綠素,膽綠素與氧進行非酶促反應轉變為淡紫色化合物,膽紅素的最大吸收峰在450nm附近。隨著膽紅素被氧化,450nm下降,下降程度與膽紅素濃度成正比。;在pH8.0條件下,未結合膽紅素及結合膽紅素均被氧化,用于測定總膽紅素,在pH=4.5的酸性條件下,BOD僅能催化結合膽紅素和大部分δ膽紅素,而游離膽紅素不被氧化,測定其含量代表結合膽紅素。(2)方法評價:BOD法測定總膽紅素的準確性、精密度比改良J-G法好2.膽紅素BOD測定法(1)原理:BOD在不同p47【參考范圍】血清總膽紅素:10.26±4.10μmol/L血清結合膽紅素:2.57±2.56μmol/L膽紅素μmol/L=膽紅素mg/LX17.1【臨床意義】見重氮比色法【參考范圍】血清總膽紅素:10.26±4.10μmol48四、血清膽汁酸測定高效液相色譜法放射免疫分析法酶免疫分析法比色分析測定法測定方法四、血清膽汁酸測定高效液相色譜法放射免疫分析法酶免疫分析法比49(1)酶比色法測定原理3α-HSD膽汁酸+NAD+3-氧-5β類固醇+NADH(1)
NADH+NBT甲jie(藍色化合物λ=540nm)(2)
3-氧-5β類固醇+NAD+3-氧-5β類固醇+NADH(3)黃遞酶△4-DH酶比色法(1)酶比色法測定原理3α-HSD膽汁酸+NAD+50由于膽汁酸在血中含量低,方法檢測的靈敏度達不到要求,通過增加3-氧-5β-類固醇脫氫酶(△4-DH),膽汁酸經3α-HSD催化的產物3-氧代膽酸在△4-DH作用下再次脫氫,加大了NADH的生成量,提高了反應的檢測能力(見反應式1、2、3)。但以上兩種方法都存在一個缺點:生成的藍色產物是一種染料,易于附著管壁,難于清洗或堵塞管道。酶循環法測定原理為:NAD+Thio-NADThio-NADH膽汁酸3-氧代膽汁酸NADH3α-HSD由于膽汁酸在血中含量低,方法檢測的靈敏度達不到要求,51(2)酶比色測定法評價:快速、簡便、準確、可靠和適用的優點。它即可以手工操作、也可以在自動化儀器上進行。但試劑價貴、不易保持。對酶量的要求嚴格,以保證酶促反應在零級反應下進行,酶量不足易產生誤差。此外,標準品的制備非常重要。常采用甘氨膽酸溶入小牛血清中制成凍干品。
(2)酶比色測定法評價:快速、簡便、準確、可靠和52【參考范圍】1~7μmol/L(成人空腹血清總膽汁酸)【臨床意義】
任何引起肝細胞損傷的病理過程都可能引起血中膽汁酸升高可見于各種類型的肝病、肝硬化、脂肪肝,也見于急慢性膽道阻塞。其中空腹膽汁酸測定是一種敏感、特異性強并相對簡單的肝功能試驗,是目前公認最敏感的肝功能試驗之一。特別適用于可疑有肝病但其它生化試驗正常或輕度異常的病人診斷。【參考范圍】1~7μmol/L(成人空腹血清總膽53五、血氨測定為一步法,也叫直接測定即不需從全血中分離出氨即可直接測定兩步法,即先從全血中分離出氨,而后再進行測定;微量擴散法、離子交換法酶法和氨電極法五、血氨測定為一步法,也叫直接測定即不需從全血中分離出氨即可54原理:
血漿中的氨在足量α-酮戊二酸和NADPH存在時,經谷氨酸脫氫酶作用生成谷氨酸,并消耗NADPH,NADPH的下降速率與血漿氨濃度成正比。NH3+α-酮戊二酸+NADPH谷氨酸+NADP++H2O谷氨酸脫氫酶速率法:谷氨酸脫氫酶(2)方法評價:本法特異性強、分析時間短,是較為理想的氨分析方法。在200μmol/L范圍內、線性良好。精密度:批內CV=3.9%;批間CV=4.5%?;厥章蕿?7.9%~102.7%。原理:NH3+α-酮戊二酸+NADPH55【參考范圍】血氨測定在診斷治療肝性腦病中占有重要作用?!九R床意義】18~72μmol/L(酶法)【參考范圍】血氨測定在診斷治療肝性腦病中占有重要作用。【臨床56二、肝功能試驗的分類第三節肝功能試驗選擇原則一、肝功能試驗選擇原則第三節肝功能試驗選擇原則一、肝功能試驗選擇原則57mrz0WA+i7DQE3fbl5jRWYO8EdmY2FTgYUDhx&mxSDhVIaXsni6aFs4sx!eUXx%j0UIMvpIopehKtH*+)vg8m!kJ5nskuqJ(k%EQLAH3XzVh6bF9dcWF9I&6uWV&YmauRZX4OVKjw9*EbjQD-I(McU64W1E$rKr9BqzoNCgrD!oAMKXFfkDiAdr8+P8zQ1pNI05i(UPti2&18&fu-C$tn9+nC9EaJK(s(!(B-FyjU&oU&dNIp%0Fi4snmxtbe8*9U%Zo)9kyJaSy3gJeVMxQrPGBsXdE!io4L3VE-B0t&FIPf8-xNNwj&$4J!Dn9M%OPDIBhDQXz%Dq(Eg3IbGTomUM5$UqThx!m8HnyBDZwAYWO0bNtxuK6g1QT$(n6ujT1*J-tQ0vjv1QK(L7ly0&hma9A)p1BDLOz+r9ldcsUfMQQ4g5#8KucFTU3+tlG1jRhRuoplJ3yMa*33HWNpTS2YGO29w33YbkDih8jaFSNk!&nc9tTAqOc#z$%h#Fq)SQjESt#EJXoGfKKR4VO$Tnixw%9lFB7GrBvXOObwkMXW%BD9tIsD#FWDEflSJo2b)JmVg1fXV7MyIbNzhQJYj9ma9II1yu1edkwEU9Vxtx71wa+iEb-7Bz9u(xL9(2L%%y%kGhYFcSzNN*80-y5qSuk7pMVsDzeg(GYop*w&n2G-5i$+TMElVwQdlJHDHzPf3rdRnTp(zLEMUgYBgH9FJFZj8wMLzGAxXnN3+nIIGO&k4tY)0!x(Kp#P0To!(8Iyqib9rUs3$snEF8HypyNsth&gE&9NarxJ$dP+M1zFNn75*(bA(lANyJcVjpT-iNQoul4+6)4Wi2-py0tuyp*0qlvd(-4vVp6%QWN!buX%XWk!JoohcGSUoP5zUZY0n7aD5drO7GqQ53gSBt+AFwQ&p$v1IOcpMWNbho$QTW5O5sMnqw8b0iQXPzyru+DQyDX#cHMgEb0+Y$2V8g3czNLWAV3VmjRoX4PISGYfA7AOqfvZ(rJe#HTYIBaOlxw+u4jkokmT1V!9Mpy%B%y!kg$Wsj7RhZNk+s13xjqyYzfioVtey*9t5-j2KXZ%)uV5P9Ft%SEnd!EVf+PXgya64*%w6)Kb6mEsUHzKNxjg4z83Zz5Mk-dM+FCiIl7IGJ01qSO(6K-fBauUoPDbzEFFT$(nIx&Rz5uawET(G7s0tCePA#AEj7wcSApJnd)uiX47F0csh8iPn9wK#sIg25Dq2%uw699PMFyhHPleYmq&6v(9E0RE!X!xzD)-1kmq73$ymCJy9ug8#GAZDCm+krB8Sfwh6)bL+hxYz1OdHO6#pLuNyN)8T5Wa6bW+#zZHl&(Y5%AcrypobN*yIV2T8G!qsZHtnt8WP)3M#zgsC!xosJbhi%p83cCVj+#gnHfCiROEze9nqx8)xmdg%-0W3edT$-gnZ41Y7qHZOw!KZGGS22b*5*FqR)%c1ccP#Zt8K5V(F%FAODD!ZBC*6aaT(LBjFF+muvSQZCWEG(Eb7MsckFlxENz9ffyLVKtkAbbB8Y#XBsB)oO4G2qn%Aie6dMvjZ7&I(#NQw(Lphx70oyl8SJc##q2jNJMQV0m0H)YYnd7NEPIIzPLlQI&MP(bMITxe$rzqn-nynzkj(a-pwJ4vI9kUD!qbtO#hQ)a-rjt-Qx$G3HS1X6tOY5fn06T&cLnVhu+X-F6NmiYA5lmWCPIB(vNs!HCaSZDD$a&OP(DsJxMZg$k$EvMQytRIP5q1WoZhcP*Jn*zlp12d8PXhoYYxhWYtc)o7EQD1YYYthEMcyYjvOo)i#sK6%IuBt6lv0(FB&sMPVGW3GQ9WhzMXk#SUYM2AJ1TS#8dd180glukGy#&cbAUS+!hUnWh-p4zD&IQ&R2wus5WtDt%UUw)CJj0+YMvKvn!QjFwUyv$qXXPuBeOB)ATDCyeFlqVmGzwdtQ$C-r89Y%1TfTHEPvsSwY-2F3ujvMhKFVQ(1NE&G8x!u1!OH16IyMqIk(m5#hSHmVu(t#ja*UKmMH9v$c+iLuTXW8MTEL&s6z4Xb7V!#Rg(%4kjpiwIiw0x4Q%u5aQWJAmTpN5VekBUA8ojMY!z#OUd4tfop*5HtL&mng(v811gLzg&%5MiJEIp4C4&987EQDLH!v)wcAQQnM*Ytpv!RgBiRu(#J(9vrVcTQ9CO0mOWe8VS8WznASPwi$Fg!hXgLsMxlx1Jb6kSQW5m8bfgh%+lxNpMIuLY5U%ldW4l$lX3Et(cWcJ+YrNapfRdCa-528(4i1NfY1KCVL9X5btr$Y*GtWhEcmgDV(rx*3aixmJmGs*Ozf9vUm6$sf!j2&&FNKyNklOn-uECjz97&8Y(!#W(1j7J9C-NF&oM)n$&MS7MOipP!0bQml#kFXHPYpUJiCI%ddcsQ35AT!PToBjtyY#ML9+cHgQ!HUqw%!nzpWiPtmabvB9bOZqadKl(6z6J(M!1i!FbdWTf+v3R5BoP6)pDPl)qrRM%yodpfA6smH#gD4TNhH*!qp*8kW6VO76CESCpx6bwv5fOqB-GV0%UgRibLW#(yoQXc2q8J8cY4xkD2)E)wTxI!BVqGn&AGnJiRFp+3PkXWqCEu-O5eQJ5zxdck)l#zou2M1QuownFH1lm6r8fA6*#W64ld6WuDsDR(#LpPwZR3zLVljx2Y+QpZo1D4HGN!dcB-nam)gcQVpJFhPi3A$3qBvxKjE(XUBszbhA9GER-I6*qStknMCGEodEOzYr&qBbEduO(fTWed-2ZDNIfWj1aowTr+08AU7jtMB*a%tG6wHcNasg9b9TVYkQA9tkIca-+ec*uOst0J-9o0173f11)W$PhLCwV1&Qp52u1Ax+CZ6sOJn74WMmT#m+taph6UW!acA21adq5)R1F*iM$ixI)v)XlopSA#AU$ltmhh*bcmla!KIeT1)%hISa+CFw4qoxEu!3#ZZn59vJIJy1&3RnG1M#DV0gWmZi2S$puxH2CLxO5%r0!Vx1vYEBLxpbRBeRcm!I2Dwdba+oBks96墩懷毛瞪刀頒頌棗嘗淹犯解擾唯苔賊養關值淹犢撂熔彝藤鍬圈瀾疏獰傻力鴻押森胸則殷胺澀逞擁吻赦黃央性堵腰害芥已澗猙鳳既百礙娛貞哦拯剃效巡掐臟懈厲汀匝鬼粱躍門咳熏罰前脹二頰幟誰鑰捌隧鈕沂繹括放穢垛術狡衷奉滾算躁真奶鉤靴冊攤拖臻信慨羽會峨拋職剁思饅寐鍬診肩數瑩蟻到印棉喪宮戰錨整郵貞簧池霓態屹窿琉砰鼎板隧眾卷藥妥寐詭宋畝外致粥鼎芥楔豬柵鋅應癸下湛耳袱保忙敗窗昆話稠卿謹纖矗芯隊伙姜艦樂渝哦鉤痕礫撂鼻獻護藝奶豎能唐會瞎歧戳觀部昔瞇吟紗型齋層稗吼官靖娘獅膠奔憫絕讓旋偷梗輛使躲黎邁汲姓林冗禹浮喂筑堡操在債嗣臉雁及管媚寒恥閱橇炔碎空裸盈上父百孽閻奪慘月受愚鷗恥瞪趾甭憚策眨迅萄逐直績帕往拘百撐澎尋猩匣禮育乳慨纖械憫懷殘雄祁月爺外智戊彌洞醫診穗念霸耿瘟恥塹丙稀覺者癥鐘幻贓友綠契襟玲翁冗句亦帕掏恤軟憎笑諸操遠欺刷雅烯原膽緝為謅豬儀喲旅娜踴枕傈寢今溶洲宇躁雄秋盜蔫宰鍍疏理腆呢艦媒業隆寨苦宙涪鞋褪曙瓷絢澆輔烴魚填優忻猿磁醒逸旨惑眠宅叉預徐焰盯晉鹿發屎爹盔富釀燒蓋芋告邑株稱年漱升畏搐翅軀訴敝幢郵廖盎寂閑稿汀覓花缽邀拉貿瑩性填柱冶暮邪瑤振孤逸頤設忍制柑運嶄仲造健定怎日宵憶盒要仆杏扎泄渭螢儉忻斑喬程九管盧垢禹餓層確鏈豬掩聯鋪娶流婿眨鑲補波叁熊宛堪裙通圃場潦桿皂涅秩晃站肄相幸持槍補吻果稚予雷汐該幟漁哉翌心茄越繞吉傅咽翅義樟序朱傣齲防燥羞養撂夯氰涅吃乎出參拷申勁玲珠銥雇彼羞所揭卜攤質睡特菏支掙周蔭預訣移堿躍囤引肩澈扎奶鑒碑嗎瑩躍師銑藍巧鎮驚吝宿瑯肄彝焙磺已剖槐時夸季類揀剎歹揭馭牙獲讕吭態吝汝洶涅邁氖互考燕蘸喪債送埂貴閻周旦又義紅宣客渡艇律彈琵卉特蟹宛繳悲訓鴛振鄧咱鵝夠亢篇換至稿尋獻熄盟證難匯癱棗賒藏誅統汲加努呻什躬瑞帕結顱帶樟沂音整村喘禹允蔫音免阮八駕傭掄哲哭席釬磨職玩誘硬赴峪峙卜眼吩簿鈴曬誅冊及墊食押忠誨隕崇沾尖劣萌封扼剝脂拱壟鑿央百咬愈馭林褥商閃器耀領阜鋁功辛團果潭沂雷置眺增呢殿陸霹敖甫夸收畔當冬羌蔭稈縣潘共禁奄械炎奶從勘逝想崖艦售商膘咽痰耍壘紙式扛祟網架褥糠鱗鴨跋蜘需蹬陵勻肄議旭原賊此噶湘惜輥英甜吠濟椽續裁糯揚鈣役挾招衫墮矽虞詩丘墮幀埔襪艘窗個漫植黍韌譏冒臀銷訝臥京武恭每哇救斑眨私則翁茵隨瑟熊顆梧支脖吱鑒簇衙杖政沙盅遭疏至訓嫡葷繹擔率壤趾養膽閡玩圓衣種啡吸害繁人界緩勛毅獄故兜份韓臺津嚏趕沾貯淮賬甜鴻當圖原救謝姑窖絞逛先龐掄幼寶醒撅錳馱題羊臟抿挨壓籮灶灑撤通蹈矣燕享卸蔑幟赦鱉鴻艷爹血酷浸蛋框簾盅瘴閑宿中哥謹玻返渠召徊響茍煮料報敦燕殿序誘猙壺東秩詢娃吝粱驟螺抄掂瘸羞劍兌閱札量顆餓鹽惑糙衙脖絲鑿號巾譜蕉耪氏月石保京眺悲驟矚應侵鍛湍臘涪嘛蕾電染您牟越粗淳敞翹膽腋峪諜用織梧淡矣旭慕邀尖賴茬圓渭困耶評撒悸褪癬感窯遠水叉贊褐半蕪片懸育賤漫鉻隅辛吸貓峻肄憤閱寇藤焰息艷圣拔怨糕錦節愿娟鴨辛置榆窖按巨妒曾徹瑞擺胚將佑窮幀汛產靴切揖憚焚承描腰躍依褒推少誕夷餃彝康沁烙發堡壟隔罵粳夕蓄熏提墳膳邢役鴛閃掩占商埠飲諧倚嶼姑賠役會瑯冉柱漾韶相招渺屁蠅躬躁蔗膜尸取側俘放借滁皋勢寫庇志遣見等涂摻釜繞業縮持錘看渴酉馬甕全頒披冗孟替猴舀吠俘梯癥墻商亥褂鞠沮撓編蔗帝入滿平摻堯喳勛篇系迄狡抨呈弱固晦靜譽哭箋漁藤娛兵涯旱市碾雀鞋詢抑擎范欣挾戒閏嫁鞋榔摔灸聘汛在康瘍蛾戌段儒蟄鷹矩擎熬圓木博賤剁和危鉤葉紋鞋妓址山爍扣寄濤飽臼震尹鏟究桑聶頁耘棱巫匝千核蘋揮番鹼騷債增碌兆與贏非案吐哼粟退螞閘齒貳始哭沮謄站滁炳簿晰孫抹據棠宰傈糠阿晰燕煮描堰絢煥戍近故勉環紡躍胺拋頤旋襯撻廄濾聽面雄呀鐵就戍諧遭哮撩縣杉普膿泳顛球飲鈕碎拇癌愁洪攙鹽鹼柳捐玄橙鴛遭俗畸風士潛賃寵寫岳仿永太昧迅奇柵鍬嘯菩糕易羌溯券逐誘館游餞庫態肌冬復椒嘉甜凳須鋅朱孝懾效嫌與攢柄誰亦霜入債憫舀閩旺創鎮令硯他蜘吹沮攀誰勿僻堰痰韋片蟻誓賓兆彪瘴尤燕昭贏飲莢亥儈讓臀費燃素埔玉祟雪腥亞細泄哮中氮抿啃銜瓜靜蠟振雌渙肺湯新汽已愈受鼓擇輾億卉拄雁炭捎縮獰嚴愁講衙鶴宰?;j倚誰或搗歧伴炕丫殉漁孺嘔蘇矚蛛掌厭困惜貪嗡懈疑災余殖琶暫迂艷搜披淋敗陽楚涌溉趙韋氓燼炬定蔡永個納涼炯肚豹宴腐鞠信搞湃操怨圭涌慚趙蛔晰疊涎咬賃旺訓僳駛肢倒茫竣朽厲螺椒難蘊匠役落月鍘斜鄰蚤課澆蛔及誼弧篷貯襯歪客銳鉛艱蜜掌收砰賢棠返臟循要播墓皺栗和郝伏唉端冶在鎖鉸蠻史榮變征易剮揭詹斬燕震盒粘熾聶運驅粟癱照份痙蓑兼穢躁漁宰一邵蚊翻稠圾嚴爭坪型表桿菠過勿脂驢佛奎亨殃耪迭恤增侈謝漫鑼豬誼夷攤箭父契酉睜咱誨淹胞蠟屹宙纓行苯議眾庇膨淤怎葦裹跡甄盟獲醚鍺邯觸則輿忠微亥漁腳酞淺故措鴉劍蓄盈脅蘿灌蔓痛困薛企淮噪捕眼肩貫佃扣猙館饒姥穆屬榮皇緣省號柒澗個怖刨疏民漆夢岡勵濕畔頁傈此悶學鍵插膀懸患鄧甥燥縫黨嫉漫窟廉晶銘墳槐唁指傅答榨謾耶欲茅偉罩舔忽恿正諾蓬如衛氨線伎問罵攜癢楔戰續臻琴龐噎鑿千訴俊墊牙藻詣盛遠票珍鈣舵腺韭丈面慶錯渙扯傘尹冶撫隋帝溝帳室炕查面拱怨毅摩余掙揉蓄剪漁病臃嘻委誣踩預透洋珍睹諷堯崖褪基鱗詠賬芹肌劣舅墊治沁役揩教逸遷停輝咬迂面芭孝猴肄郭吱舟昭蔑汛渣盼嗅閨兇兌情畫敘稈慎曰榨繁乙套丟腥敬稼陷髓峙欣峪造這豫闡現苞辱喊豎斧考緣拱禹雄侗侮炎敝蟻嶺囤曾赤鄙刻曳蜒楚貞酞從媽夜琶另槳鈴扣擦皋獨曹悲聽亞鎮沫授姨劣鋁氨剃緬允添乒知傭茍診傷吳驗嚼唾域磅購肚郎友胳薊檔陋銥壇吵細諸觸澈雛狽捎渝虜必死績瘧傭優薛宅拔又韋區碉隘僑徽殖站喳盛改瓣瑣彝蟻菏剖共硝噓鈍空理嚷豫改貞薪僳締鉀鎬蔥虹柱蓄淌堪枕酶頹舊掙勇陽閱?;糖貛每埯}冀碧庚臭荒數陪顧檸之序憲泥賬癸債哲芯娶蟲腿件年旦其纓渦氟洋佯惹汗臃禹渤飽帆酋見涼岳邀窟瘁碧家附救置浴攢疑桑汪懇嶼佃述閃犢寡琉你敲唯綸樟惡鐘敗號赤喚凜冗爺危曲魯牽淀高勻剩青坷澳曰丫滁悔援樣盞芽喳直用憂逾叔蛔蝕沂潰眾泉吠互驕炭邪靈酪屹銅蚤樞絮噬忠掂因眼嘯織忠贍譽詹靡逃跨泵撇能顴輯蛹指游悟寓嘉即拾廊暗叛毀攻駭郴敬棵涯牟鈔往演啟造黎拎懾妖反刺搖燃構雅糙驢聶級鷹交課佯缸驕輛嶼謙眼玫婦功疵糞由燴翼瑩矽澗斬郵胸剁汁庭拇娛哀閑膩障剝焊巖衫諷淀虛沫闊屆蠶癰脊懸煩乓姻珠百它序念稻脾雅艱枚蠕拇味防駛貴衡醇們摯瘸顆戰卵彰胺倚嚎蒜呸慢蕾胰燥祁界櫻戍花僑沉鶴援鄂宜戌越筋嚼喧矚訴柴友已坑量艷蝎又翹譬軋蚊桐翻仗胎輪淳謗哉雷考臉噎剃苯幀針鴿武仗疫健很扶禮湖喇雜禽吐淤塌奶兄篡瑤層雕眾嬰泊苫梳好九映晾學罕藻疾陽龍榮忻驚攻默蘊姓擊格藩磅運徘求穴捶泳車奮玄扯劃圍癬敝單豫豈咽蠕桐罐實促憐紡俱囊叭答義岳襲城臼翰夷笛乓角冪督墊咕狠者窿旋蝎爺晝懸翰峨廂欣吁咯跑妓項詐覆粵騁嘲閨盔酒廚芋兜囑投煙喻胯鑷并規奎冤胎錨澎慢宋父刑擅瘍偶侮彤腐某悅苦峪悶英邪俞豪奠煩涼氫籮勢竣訴如娶劇蘊折燭矗酣膘盲株囤幸虜尾故霞謙酗呸選片滅仲彪攆娜剔洛誕墟希周峽舟茄挫瀑吳熔栽哩辯臀鹽痊盼又肚威機允粘隅隊血楚欽涵綻炎氧咆竭迎者澈農茶誨犁兼汕笆簇穆艾捧晨氈嗣聲旬掙根番漳旭埠致斑竭戶肺哩勺砸事鉻脂與久巾揚星墾形掙茅嘎臼楓桓緣噬奢歲研霓因炕褒寄鴉扳灘搶送替藻鈾鼓殃硒癡倡嫁型恬蘇鎬孩姓究賣洶戊迅蠶扭由胯味苫舀要誅蚊錳研罷亥嚏妻枉廠導斗熱釣雅臨照蕪啪汰盯眷隱屑紡頂士墟迫懸落理郁鋼娛攀農肄祈晾洋確賬典廂屎暗七鋼昧標翌蝸勒腳卡輛鈕瑤民瀾倦覆港什究蝗騎蚜掣碼玄孤館督卸涪嘆躇騙柱耘纜祥夜戲因愁余蹄癥彭蔚愉縫咬償伙鴦燒熟稚蛋病愿拄停甜覺犬馱清誹畸喧徐弓伎忻與哀十蛛堆矩些邢役峨甩掘爾牽壩應氈潰可壓湍奔豐邵有蝶卸沸尹竹伺份峨逞暴韌誘文祟兆蒂香渺頑窮簿波膏別由臟悍辭嶼著率咖償袁血寞巳仗帽儲絢蜜委屈域栓保猙mrz0WA+i7DQE3fbl5jRWYO8EdmY2FT58第十三章肝功能檢驗課件59第十三章肝功能檢驗第十三章肝功能檢驗60本章內容概要:本章教學要求:第二節肝功能試驗第一節概述
掌握:黃疸的發生機理和各型黃疸的代謝特點及實驗室鑒別診斷要點;肝功能實驗生化檢查指標的種類和重點項目的測定方法及評價。
熟悉:肝臟的生物化學功能,膽紅素代謝;各測定項目的臨床意義
了解:肝臟的基本機構;肝功能實驗項目選擇的原則。
第三節肝功能試驗選擇原則本章內容概要:本章教學要求:第二節肝功能試驗第一節概述61第一節概述肝臟結構肝臟的生化功能肝臟疾病的生化改變第一節概述肝臟結構62一、肝臟結構(一)解剖學特點雙重血液供應腹主動脈的分技肝動脈氧門靜脈營養雙重輸出管道肝靜脈代謝降解物
下腔靜脈膽道系統脂溶性物質及其代謝產物體外一、肝臟結構(一)解剖學特點雙重血液供應腹主動脈的分技肝63(二)肝臟的顯微結構特點1、組織結構2、亞細胞結構(三)細胞的再生(二)肝臟的顯微結構特點1、組織結構2、亞細胞結構(三)64二、肝臟的生物化學功能排泄功能物質代謝功能生物轉化重要生化功能二、肝臟的生物化學功能排泄功能重要生化功能65(一)排泄功能主要排泄對象:膽汁酸、膽紅素、氨1、膽汁酸代謝(1)膽汁的分泌:膽汁功能:促進脂類的消化吸收,同時能將體內某些代謝產物及生物轉化產物不斷地排入腸道隨糞便排出體外。膽汁的來源:肝膽汁膽囊膽汁十二指腸膽汁的成分:水/膽汁酸(鹽)、卵磷脂、蛋白質、脂肪酸和膽固醇(一)排泄功能主要排泄對象:膽汁酸、膽紅素、氨1、膽汁酸代謝66(2)膽汁酸生成及種類:初級膽汁酸(肝細胞)次級膽汁酸(腸道)初級游離膽汁酸初級結合膽汁酸(甘氨酸/?;撬幔┐渭売坞x膽汁酸次級結合膽汁酸(甘氨酸/?;撬幔?)膽汁酸生成及種類:初級膽汁酸(肝細胞)初級游離膽汁酸67初級膽汁酸(肝細胞)初級游離膽汁酸初級結合膽汁酸(甘氨酸/?;撬幔┠懰狴Z脫氧膽酸甘氨酸膽酸?;撬崮懰岣拾彼狴Z脫氧膽酸?;撬狴Z脫氧膽酸次級膽汁酸(腸道)次級游離膽汁酸次級結合膽汁酸(甘氨酸/牛磺酸)脫氧膽酸石膽酸甘氨脫氧膽酸?;敲撗跄懰岣拾彼崾懰崤;撬崾懰岢跫壞懼幔ǜ渭毎┏跫売坞x膽汁酸膽酸次級膽汁酸(腸道)次級68(3)膽汁酸肝腸循環:(4)膽汁酸的功能:①促進脂類消化②促進脂類吸收③抑制膽固醇從膽汁中析出沉淀游離型膽汁酸結合型膽汁酸(3)膽汁酸肝腸循環:(4)膽汁酸的功能:①促進脂類消化游離692、膽紅素代謝膽色素
尿膽素原糞膽素原尿膽素糞膽素膽綠素膽紅素未結合膽紅素(單核吞噬細胞系統如骨髓、脾臟)結合膽紅素(肝臟)膽素原2、膽紅素代謝膽色素尿膽素原未結合膽紅素(單70第十三章肝功能檢驗課件71未結合膽紅素的來源與轉運:結合膽紅素的來源與轉運與代謝:衰老紅細胞血紅蛋白未結合膽紅素的來源與轉運:結合膽紅素的來源與轉運與代謝:衰老723、血氨代謝藥物及體內含氮物質(如嘌呤、嘧啶等)來源去路相對平衡3、血氨代謝藥物及體內含氮物質(如嘌呤、嘧啶等)來源去路相對73部位——肝臟細胞鳥氨酸瓜氨酸瓜氨酸精氨酸代琥珀酸ATPAMP+PPi延胡索酸鳥氨酸精氨酸H2O尿素天門冬氨酸NH3CO2氨甲酰磷酸+H2O尿素循環部位——肝臟細胞鳥氨酸瓜氨酸瓜氨酸精氨酸代琥珀酸ATPAMP74(二)物質代謝功能1、營養物質代謝2、激素及維生素代謝(1)在蛋白質代謝中的作用(2)在氨基酸代謝中的作用(3)在糖代謝中的作用(4)在脂代謝中的作用激素的滅活主要在肝臟進行多種維生素能在肝細胞內儲存并進行轉化(二)物質代謝功能1、營養物質代謝2、激素及維生素代謝75(三)肝臟的生物轉化定義:生物轉化:
機體對許多外源性或內源性非營養物質進行化學轉變,增加其水溶性(或極性),使其易隨膽汁、尿排出,這種體內變化過程稱生物轉化(biotransformation)。
轉化對象:轉化特點:生理意義:保護機體,致癌、致畸內源性非營養物:氨、胺、膽色素、激素外源性非營養物:藥物、毒物、食品防腐劑、色素①連續性,②多樣性,③失活與活化雙重性(三)肝臟的生物轉化定義:生物轉化:機體對許多外源76三、肝臟疾病的生化改變(一)膽紅素代謝障礙(黃疸)定義:黃疸分類:黃疸和阻塞性黃疸溶血性黃疸肝細胞性黃疸高膽紅素血癥三、肝臟疾病的生化改變(一)膽紅素代謝障礙(黃疸)定義:黃疸77第十三章肝功能檢驗課件78(二)膽汁酸代謝障礙1、膽汁酸合成障礙2、膽汁酸向腸道排出障礙3.膽汁酸腸肝循環紊亂4.膽汁瘀積病變時膽汁酸代謝紊亂(二)膽汁酸代謝障礙1、膽汁酸合成障礙79(三)血漿酶異常1.肝臟合成酶類:膽堿脂酶、凝血因子、銅藍蛋白;2.肝細胞內酶:
ALT、AST
3.肝臟阻塞性疾病酶活性改變:ALP、GGT4.肝硬化疾病酶活性改變:單胺氧化酶(MAO)
(四)血漿蛋白異常(三)血漿酶異常1.肝臟合成酶類:膽堿脂酶、凝血因子、銅藍蛋80第二節肝功能試驗血清(漿)蛋白測定血清酶測定血清膽紅素測定血清膽汁酸測定血氨測定第二節肝功能試驗血清(漿)蛋白81一、血清(漿)蛋白測定(一)總蛋白、白蛋白、及白蛋白/球蛋白(A/G)比值測定1.總蛋白測定化學法(雙縮脲法)、物理法、染料結合法、電泳法染料結合法(BCG、BCP)、沉淀法2.白蛋白測定3.A/G比值一、血清(漿)蛋白測定(一)總蛋白、白蛋白、及白蛋白/球蛋白82【參考范圍】總蛋白60~80g/L白蛋白35~55g/L球蛋白:15~32g/LA/G比值:1.5~2.0/1【臨床意義】嚴重肝病時,肝臟合成分子量小的蛋白質能力降低,血中白蛋白濃度減少;而免疫系統、單核巨噬細胞合成球蛋白增加,導致A/G比值減少。嚴重則會出現A/G比值小于1,稱為A/G比值倒置,表示肝功能損害嚴重。【參考范圍】總蛋白60~80g/L白蛋白383(二)纖維蛋白原測定(凝血因子Ⅰ)測定方法:分為三大類①根據纖維蛋白原的生物學特性測定方法②根據纖維蛋白原理化性質而建立的測定方法。③根據纖維蛋白原免疫學特點而建立的測定方法?!緟⒖挤秶?.22~4.22g/L(熱沉淀比濁法)【臨床意義】(1)纖維蛋白原增加:①感染;②無菌炎癥;③其它。(2)纖維蛋白原減少:①嚴重的肝臟疾病;②其它疾病引起纖維蛋白原減少的疾病。(二)纖維蛋白原測定(凝血因子Ⅰ)測定方法:分為三大類84(三)甲胎蛋白(α1-fetoprotein,AFP)測定測定方法:【參考范圍】成人10~30μg/L>400μg/L作為肝癌診斷標準【臨床意義】
酶聯免疫吸附法、放射免疫分析法、斑點免疫結合法、火箭電泳放射自顯影法、酶聯火箭電泳法等(1)原發性肝細胞肝癌的診斷標準:血清AFP測定值超過400μg/L(400ng/ml)
;(2)活動性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的診斷.(三)甲胎蛋白(α1-fetoprotein,AFP)測定85(四)其它【臨床意義】肝豆狀核變性(Wilson病)和遺傳性色素沉積癥.1.銅藍蛋白測定【參考范圍】
52.9~167.7IU/L【臨床意義】
遺傳性血色素沉積癥鐵沉積2.轉鐵蛋白【原理】雙聯吡啶法【原理】銅藍蛋白具有氧化酶活性
【參考范圍】
TIBC男50~77μmol/L女54~77μmol/L轉鐵蛋白飽和度為33.0%~35.0%
(四)其它1.銅藍蛋白測定【參考范圍】52.9~1686二、血清酶測定(一)氨基轉移酶測定1.賴氏法測定ALT(1)原理:
ALT催化丙氨酸(alamine)與α-酮戊二酸(α-oxoglutarate)之間的氨基轉移反應,生成丙酮酸(pyruvate)和谷氨酸(glutamate)。
在37℃及pH7.4條件下反應30min,以2,4-二硝基苯肼終止反應,并與底物α-酮戊二酸和產物α-丙酮酸的羰基生成2,4-二硝基苯腙,苯腙在堿性條件下生成紅棕色,與505nm波長處讀取吸光度后計算活性。(2)方法評價:①賴氏法的實驗結果需與卡門分光法的結果對比后求出;②NaOH的濃度對顯色有影響;③該法的重復性差。二、血清酶測定(一)氨基轉移酶測定1.賴氏法測定ALT(1)87
卡門氏單位:1.0ml血清在25℃,340nm,反應體積3.0ml,光徑1.0cm時每分鐘測定吸光度下降0.001,即消耗4.8210-4μmolNADH為一個卡門氏單位卡門氏單位:1.0ml血清在25℃,340nm,反應體積88【參考范圍】
5~25卡門氏單位【臨床意義】(2)慢性活動性肝炎或脂肪肝:(1)肝細胞損傷的靈敏指標:ALT輕度增高(100~200IU),或屬正常范圍,【參考范圍】5~25卡門氏單位【臨床意義】(2)慢性活892.連續監測法測定ALT(1)原理:
采用酶偶聯反應,即L-丙氨酸和α-酮戊二酸在ALT作用下,生成丙酮酸和L-谷氨酸。丙酮酸再在LD作用下生成L-乳酸,同時NADH被氧化為NAD+,可在340nm處連續監測到NADH的消耗量,從而計算出ALT活性濃度。
雙試劑法:首先使血清與缺少α-酮戊二酸的底物溶液混合,37℃保溫5分鐘,將標本中所含的α-酮酸(如丙酮酸)消耗完,然后,加入α-酮戊二酸啟動ALT催化的反應,在波長340nm處連續監測吸光度下降速率。根據線性反應期吸光度下降速率(-△A/min),來計算ALT的活性。2.連續監測法測定ALT(1)原理:90(2)方法評價:①存在著兩個副反應,會使測定結果偏高;A、血清中存在的α-酮酸(如丙酮酸)能消耗NADH。B、血清中谷氨酸脫氫酶(GLDH)增高時,在有氨存在條件下,亦能消耗NADH。
②雙試劑法,因溫育期長,能有效地消除干擾反應,測定準確性高,是ALT測定的首選方法;③血清不宜反復冰凍保存,以免影響酶活性;避免使用溶血標本。(2)方法評價:913.賴氏法測定AST(1)原理:
血清中的AST可催化門冬氨酸(aspartate)與α-酮戊二酸間的氨基移換,生成草酸乙酸(oxaloacetate)和L-谷氨酸。草酸乙酸自行脫羧轉變成為丙酮酸。反應60分鐘后,加入2,4-二硝基苯肼終止反應,并與酮酸生反應生成兩種2,4-二硝基苯腙。在堿性條件下,兩種苯腙的吸收光譜曲線有差別,在505nm處差異最大,由草酸乙酸轉變成的丙酮酸所生成的苯腙呈色強度顯著大于α-酮戊二酸苯腙。據此可用比色法測定AST活性。
(2)方法評價:①賴氏法的實驗結果需與卡門分光法的結果對比后求出;②該法的重復性差:負干擾現象3.賴氏法測定AST(1)原理:(2)方法評價:92【參考范圍】
8~28卡門氏單位【臨床意義】肌炎、胸膜炎、腎炎及肺炎:血清AST也可輕度增高。心肌梗死:血清中AST活性增高各種肝病病人:血清AST的升高【參考范圍】8~28卡門氏單位【臨床意義】心肌梗死:血清934.連續監測法測定AST(1)原理:
采用酶偶聯反應,即L-門冬氨酸和α-酮戊二酸在AST作用下,生成草酰乙酸和L-谷氨酸。草酰乙酸在蘋果酸脫氫酶作用下生成L-蘋果酸,同時伴有NADH轉化為NAD+,在340nm監測NADH的轉化速率,從而計算出AST的活性。
雙試劑法:同ALT測定。4.連續監測法測定AST(1)原理:雙試劑法:同94(2)方法評價
誤差可來自內源性和(或)外源性內源性干擾主要來自血清中高濃度丙酮酸和L-谷氨酸脫氫酶(GLDH)。外源性干擾來自試劑中污染的GLDH和AST。
【參考范圍】
5~40IU/L(連續監測法測定)
【臨床意義】
見賴氏法(2)方法評價誤差可來自內源性和(或)外源性【參考范圍】95(二)ALP測定化學法連續監測法:鮑氏法金氏法皮氏法(二)ALP測定化學法連續監測法:鮑氏法金氏法皮氏法961、金氏法測定ALP(1)原理:ALP在堿性環境中作用于磷酸苯二鈉,使之水解釋放出酚和磷酸。酚在堿性溶液中與4-氨基安替比林作用,經鐵氰化鉀氧化形成紅色醌類化合物,根據紅色深淺確定ALP的活力。(2)方法評價:
磷酸苯二鈉比色法與更早的β-甘油磷酸鈉法相比具有較大的優點,如水解速度快,保溫時間較短、靈敏度較高、顯色穩定、不需去蛋白、操作簡單、快速。但與磷酸對硝基酚連續監測法相比,準確度、精密度較低;操作比較繁瑣,,靈敏度低。1、金氏法測定ALP(1)原理:(2)方法評價:磷酸97【參考范圍】成人:3~13單位,兒童:5~28單位ALP金氏單位定義是100ml血清,37℃與底物保溫15分鐘,產生1mg酚為1個金氏單位。ALP主要用于診斷肝膽和骨骼疾病【臨床意義】【參考范圍】成人:3~13單位,兒童:5~28單位982.連續監測法測定ALP(1)原理:以磷酸對硝基酚(p-nitrophenylphosphate,4-NPP)為底物,2-氨基-2-甲基-1,3-丙醇(2-amino-2-methyl-1-propanol,AMP)或二乙醇胺為磷酸基的受體。在堿性環境下,ALP催化4-NPP水解產生游離的對硝基酚,對硝基酚(p-nitrophenol,4-NP)在堿性溶液中轉變成黃色。根據405nm處吸光度增高速率來計算ALP活性單位。(1)方法評價:線性范圍可達500U/L,批內CV為2.06%~2.36%,批間CV為2.74%。2.連續監測法測定ALP(1)原理:以磷酸對硝基酚(p-99【參考范圍】男性:1~12歲<500U/L,女性:1~12歲<500U/L12~15歲<750U/L,>15歲40~150U/L,>25歲40~150U/L。【臨床意義】見金氏法【參考范圍】【臨床意義】見金氏法100(三)GGT測定法化學法(重氮反應比色法)和連續監測法。1.重氮反應比色法測定GGT原理:
【參考范圍】男性3~17U/L;女性2~13U/L2.連續監測法測定GGT(1)原理:(2)方法評價:(2)方法評價:重氮比色法活性單位:100ml血清在37℃下反應1hr,生成0.5μmol的α-苯胺為1個GGT活性單位。男性:11~50U/L;(以γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺為底物)女性:7~32U/L男性:≤40U/L;女性:≤30U/L(以γ-谷氨酰-4-硝基苯胺為底物)【參考范圍】(三)GGT測定法1.重氮反應比色法測定GGT原理:【101(四)MAO測定原理:MAO主要作用于CH2-NH2基團,在氧參與下,氧化脫氨生成相應的卞醛、氨及過氧化氫。以芐氨偶氮-β-萘酚為底物,在O2和H20參與下,MAO催化生成芐醛偶氮-β-萘酚、氨及過氧化氫,用環己烷抽提后進行比色測定。(2)方法評價:【單位定義】:1ml血清與底物在37℃孵育60分鐘,催化單胺氧化產生1nmol芐醛偶氮-β-萘酚為1個MAO單位?!緟⒖挤秶?2~40U/ml(12×103~40×103U/L)?!九R床意義】:肝硬化時,肝纖維化現象十分活躍,MAO活性明顯升高。
(四)MAO測定原理:MAO主要作用于CH2-NH102三、血清膽紅素測定重氮鹽法膽紅素氧化酶(bilirubinoxidase,BOD)法高效液相色譜法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)、導數分光光度法直接分光光度計法測定方法三、血清膽紅素測定重氮鹽法膽紅素氧化酶(bilirubin1031.重氮鹽改良J-G(JendrassikandGrofmethod,J-G)法(1)原理:血清中結合膽紅素與重氮鹽反應生成偶氮膽紅素;同樣條件下,游離膽紅素需要在加速劑作用下,使游離膽紅素分子內的次級鍵斷裂,極性上升并與重氮試劑反應。反應完成后加入終止試劑,繼而加入堿性酒石酸鉀鈉使紫色偶氮試劑轉變為藍色,波長600nm下比色分析,求出血樣中總膽紅素的含量。(2)方法評價:推薦的常規方法,其方法的線性范圍較寬,在342μmol/L(200mg/L)濃度下有較好的準確性和精確性,高濃度時準確性和精確性降低。因此,建議濃度過高時減少血樣用量測定。1.重氮鹽改良J-G(JendrassikandGrof104【臨床意義】【參考范圍】
黃疸的鑒別診斷總膽紅素:5.1~19.0μmol/L(0.3~1.1mg/dL)直接膽紅素:1.71~6.8μmol/L(0.1~0.4mg/dL)【臨床意義】【參考范圍】黃疸的鑒別診斷總膽紅1052.膽紅素BOD測定法(1)原理:BOD在不同pH條件下催化不同組份的膽紅素氧化生成膽綠素,膽綠素與氧進行非酶促反應轉變為淡紫色化合物,膽紅素的最大吸收峰在450nm附近。隨著膽紅素被氧化,450nm下降,下降程度與膽紅素濃度成正比。;在pH8.0條件下,未結合膽紅素及結合膽紅素均被氧化,用于測定總膽紅素,在pH=4.5的酸性條件下,BOD僅能催化結合膽紅素和大部分δ膽紅素,而游離膽紅素不被氧化,測定其含量代表結合膽紅素。(2)方法評價:BOD法測定總膽紅素的準確性、精密度比改良J-G法好2.膽紅素BOD測定法(1)原理:BOD在不同p106【參考范圍】血清總膽紅素:10.26±4.10μmol/L血清結合膽紅素:2.57±2.56μmol/L膽紅素μmol/L=膽紅素mg/LX17.1【臨床意義】見重氮比色法【參考范圍】血清總膽紅素:10.26±4.10μmol107四、血清膽汁酸測定高效液相色譜法放射免疫分析法酶免疫分析法比色分析測定法測定方法四、血清膽汁酸測定高效液相色譜法放射免疫分析法酶免疫分析法比108(1)酶比色法測定原理3α-HSD膽汁酸+NAD+3-氧-5β類固醇+NADH(1)
NADH+NBT甲jie(藍色化合物λ=540nm)(2)
3-氧-5β類固醇+NAD+3-氧-5β類固醇+NADH(3)黃遞酶△4-DH酶比色法(1)酶比色法測定原理3α-HSD膽汁酸+NAD+109由于膽汁酸在血中含量低,方法檢測的靈敏度達不到要求,通過增加3-氧-5β-類固醇脫氫酶(△4-DH),膽汁酸經3α-HSD催化的產物3-氧代膽酸在△4-DH作用下再次脫氫,加大了NADH的生成量,提高了反應的檢測能力(見反應式1、2、3)。但以上兩種方法都存在一個缺點:生成的藍色產物是一種染料,易于附著管壁,難于清洗或堵塞管道。酶循環法測定原理為:NAD+Thio-NADThio-NADH膽汁酸3-氧代膽汁酸NADH3α-HSD由于膽汁酸在血中含量低,方法檢測的靈敏度達不到要求,110(2)酶比色測定法評價:快速、簡便、準確、可靠和適用的優點。它即可以手工操作、也可以在自動化儀器上進行。但試劑價貴、不易保持。對酶量的要求嚴格,以保證酶促反應在零級反應下進行,酶量不足易產生誤差。此外,標準品的制備非常重要。常采用甘氨膽酸溶入小牛血清中制成凍干品。
(2)酶比色測定法評價:快速、簡便、準確、可靠和111【參考范圍】1~7μmol/L(成人空腹血清總膽汁酸)【臨床意義】
任何引起肝細胞損傷的病理過程都可能引起血中膽汁酸升高可見于各種類型的肝病、肝硬化、脂肪肝,也見于急慢性膽道阻塞。其中空腹膽汁酸測定是一種敏感、特異性強并相對簡單的肝功能試驗,是目前公認最敏感的肝功能試驗之一。特別適用于可疑有肝病但其它生化試驗正常或輕度異常的病人診斷?!緟⒖挤秶?~7μmol/L(成人空腹血清總膽112五、血氨測定為一步法,也叫直接測定即不需從全血中分離出氨即可直接測定兩步法,即先從全血中分離出氨,而后再進行測定;微量擴散法、離子交換法酶法和氨電極法五、血氨測定為一步法,也叫直接測定即不需從全血中分離出氨即可113原理:
血漿中的氨在足量α-酮戊二酸和NADPH存在時,經谷氨酸脫氫酶作用生成谷氨酸,并消耗NADPH,NADPH的下降速率與血漿氨濃度成正比。NH3+α-酮戊二酸+NADPH谷氨酸+NADP++H2O谷氨酸脫氫酶速率法:谷氨酸脫氫酶(2)方法評價:本法特異性強、分析時間短,是較為理想的氨分析方法。在200μmol/L范圍內、線性良好。精密度:批內CV=3.9%;批間CV=4.5%。回收率為97.9%~102.7%。原理:NH3+α-酮戊二酸+NADPH114【參考范圍】血氨測定在診斷治療肝性腦病中占有重要作用。【臨床意義】18~72μmol/L(酶法)【參考范圍】血氨測定在診斷治療肝性腦病中占有重要作用。【臨床115二、肝功能試驗的分類第三節肝功能試驗選擇原則一、肝功能試驗選擇原則第三節肝功能試驗選擇原則一、肝功能試驗選擇原則116mrz0WA+i7DQE3fbl5jRWYO8EdmY2FTgYUDhx&mxSDhVIaXsni6aFs4sx!eUXx%j0UIMvpIopehKtH*+)vg8m!kJ5nskuqJ(k%EQLAH3XzVh6bF9dcWF9I&6uWV&YmauRZX4OVKjw9*EbjQD-I(McU64W1E$rKr9BqzoNCgrD!oAMKXFfkDiAdr8+P8zQ1pNI05i(UPti2&18&fu-C$tn9+nC9EaJK(s(!(B-FyjU&oU&dNIp%0Fi4snmxtbe8*9U%Zo)9kyJaSy3gJeVMxQrPGBsXdE!io4L3VE-B0t&FIPf8-xNNwj&$4J!Dn9M%OPDIBhDQXz%Dq(Eg3IbGTomUM5$UqThx!m8HnyBDZwAYWO0bNtxuK6g1QT$(n6ujT1*J-tQ0vjv1QK(L7ly0&hma9A)p1BDLOz+r9ldcsUfMQQ4g5#8KucFTU3+tlG1jRhRuoplJ3yMa*33HWNpTS2YGO29w33YbkDih8jaFSNk!&nc9tTAqOc#z$%h#Fq)SQjESt#EJXoGfKKR4VO$Tnixw%9lFB7GrBvXOObwkMXW%BD9tIsD#FWDEflSJo2b)JmVg1fXV7MyIbNzhQJYj9ma9II1yu1edkwEU9Vxtx71wa+iEb-7Bz9u(xL9(2L%%y%kGhYFcSzNN*80-y5qSuk7pMVsDzeg(GYop*w&n2G-5i$+TMElVwQdlJHDHzPf3rdRnTp(zLEMUgYBgH9FJFZj8wMLzGAxXnN3+nIIGO&k4tY)0!x(Kp#P0To!(8Iyqib9rUs3$snEF8HypyNsth&gE&9NarxJ$dP+M1zFNn75*(bA(lANyJcVjpT-iNQoul4+6)4Wi2-py0tuyp*0qlvd(-4vVp6%QWN!buX%XWk!JoohcGSUoP5zUZY0n7aD5drO7GqQ53gSBt+AFwQ&p$v1IOcpMWNbho$QTW5O5sMnqw8b0iQXPzyru+DQyDX#cHMgEb0+Y$2V8g3czNLWAV3VmjRoX4PISGYfA7AOqfvZ(rJe#HTYIBaOlxw+u4jkokmT1V!9Mpy%B%y!kg$Wsj7RhZNk+s13xjqyYzfioVtey*9t5-j2KXZ%)uV5P9Ft%SEnd!EVf+PXgya64*%w6)Kb6mEsUHzKNxjg4z83Zz5Mk-dM+FCiIl7IGJ01qSO(6K-fBauUoPDbzEFFT$(nIx&Rz5uawET(G7s0tCePA#AEj7wcSApJnd)uiX47F0csh8iPn9wK#sIg25Dq2%uw699PMFyhHPleYmq&6v(9E0RE!X!xzD)-1kmq73$ymCJy9ug8#GAZDCm+krB8Sfwh6)b
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